1、液相色譜儀整機保養(yǎng)
(1)短期停機
在完成一天工作以后,都要停機等第二天再繼續(xù)工作,則可按以下步驟停機。
A)關(guān)閉二次儀表(記錄儀、積分儀或色譜工作站)。
B)關(guān)閉檢測器電源(同時切斷柱箱溫度檢測器的電源)。
C)停止恒流泵工作,然后切斷其電源。
D)用二次蒸餾水沖洗進樣閥的進樣孔(在“LOAD”和“INJECT”兩個位置)。
E)切斷實驗室工作電源,加滿盛液瓶中的流動相,待第二天使用。
F)將儀器罩上防塵罩。
?。?)長期停機
液相色譜儀數(shù)周或數(shù)月暫不使用,這時除按《短期停機》的A)~D)步驟處理外,還須完成以下步驟:
A)拆下恒流泵的流動相盛液瓶,換上色譜柱指定的保護試劑(例:甲醇、去離子水等),開啟泵數(shù)分鐘(流速0.5mL/min~1.5mL/min)后停泵。
B)從系統(tǒng)中拆下色譜柱,用專用的密封螺帽將柱管兩端密封后保存。
C)用普通φ1.6導(dǎo)管替代分離柱聯(lián)結(jié)。
D)用二次蒸餾水或去離子水輸入輸液泵,開啟泵,流量1mL/min~2mL/min,沖洗泵體、進樣閥、檢測器流通池數(shù)分鐘,在沖洗過程切換六通閥數(shù)次,使定量管得到清洗。
E)拆除替代柱的導(dǎo)管、泵輸入端和出口的導(dǎo)管和流通池輸入、輸出口導(dǎo)管,分別用螺帽密封輸液泵出口和流通池輸入、輸出口。
F)撥下總電源接線板的插頭,貯存好專用的流動相和樣品,用干布擦洗儀器,罩上防塵罩。
G)檢測器存放地點應(yīng)干燥
2、液相色譜儀輸液泵的保養(yǎng)
輸液泵是液相色譜儀的心臟部件,品質(zhì)再好的泵,若不注意日常保養(yǎng),其損壞的幾率是極高的,將大大降低儀器的使用價值。
a)使用甲醇作流動相,請注意自身保護和環(huán)境保護,廢液注入空瓶內(nèi),集中處理,不得倒入下水道內(nèi)。
b)輸液泵使用前,先注意探漏檢查,視各密封點和泵體有否漏液。
c)在無流動相通入的情況下,嚴(yán)禁啟動泵體電機,以免柱塞密封環(huán)磨損。
d)測試泵流量性能時,用于收集液體的容器,應(yīng)選用小口瓶頸的容器,防止收集過程中,溶液蒸發(fā),影響測量精度。,必要時應(yīng)將其密封存放在干燥容器內(nèi),以預(yù)防光學(xué)系統(tǒng)霉變。
e)金屬泵體的輸液泵,應(yīng)盡量避免使用含有鹵離子(如KCL、NaCL、NH4CL)的流動相或能產(chǎn)生鹵離子的流動相,若必須使用此類流動相,建議使用泵體用非金屬材料制造的輸液泵。方則使用后,應(yīng)立即使用去離子水清洗泵體和整個色譜系統(tǒng)的管路。
f)使用的流動相必須是HPLC級或分析純級,特別是配置的流動相,在使用前,必須過濾掉其中的顆粒狀雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm的濾膜過濾)
g)長期不使用輸液泵,應(yīng)在最后分析結(jié)束時,用注射器吸取去離子水通過專用的泵頭清洗孔清洗泵體和柱塞桿。以延長密封圈和寶石柱塞桿的壽命。
h)輸液泵液路在維修或保養(yǎng)時,應(yīng)切斷儀器電源。非專業(yè)維修人員請不要打開機箱罩。
液相色譜儀分離的目的必須十分明確,下面的問題在建立方法之初就應(yīng)確定:
?。?)主要目的是什么?定量或定性,還是定性、定量同時做?;
?。?)是否有必要解析出樣品的所有成分?譬如可能有必要分離出產(chǎn)品中的所有降解物或雜質(zhì),以使含量測定結(jié)果更加可靠,但卻沒必要將它們彼此完全分開。
(3)如要求定量分析,準(zhǔn)確度與精密度需多大?樣品主要成分的精密度通常能達到±1—2%,特別是不需樣品預(yù)處理的情況。
?。?)特殊化合物可能會以不同的樣品形式出現(xiàn)(如:原料藥,一種或多種形態(tài),環(huán)保樣品等)。是否需要一種以上的HPLC方法?單一方法分離不同形態(tài)樣品是否理想?
(5)一次將分析多少樣品?當(dāng)必須同時處理大量樣品時,運行時間將變得非常重要。
有時甚至為了縮短運行時間而以犧牲樣品分離度作代價,如縮短柱長或加快流速。當(dāng)一次分析的樣品數(shù)目超過10個,運行時間一般應(yīng)控制在20min以內(nèi)。
?。?)將要使用該方法的實驗室中,有哪些HPLC設(shè)備?色譜柱能否恒溫系統(tǒng)能否做梯度洗脫?該方法是否可在不同設(shè)計與生產(chǎn)的設(shè)備上運行?
方法建立實驗開始之前,應(yīng)明確對方法的這些要求。
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