液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜及液-固色譜。現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。
1、 泵。
泵是液相色譜儀的心臟。處于良好工作狀態(tài)的泵,基線平穩(wěn),保留時(shí)間重現(xiàn)性好,梯度洗脫時(shí)壓力變化緩慢而且平穩(wěn)。
1)選擇優(yōu)質(zhì)的溶劑和試劑,在進(jìn)入儀器前用 0.45um 膜過濾,并進(jìn)行脫氣處理。
2)泵開始使用時(shí),一定要用合適的流動相徹底清洗干凈。
3)定期檢查并更換在線過濾片及有關(guān)的墊圈,經(jīng)常清洗進(jìn)液處的微孔濾頭。
4)改變流動相時(shí),應(yīng)注意沉淀的產(chǎn)生,以防止泵堵塞。
2、色譜柱。
色譜柱是化合物分離的關(guān)鍵。保養(yǎng)良好的色譜柱具有很高的塔板數(shù),基線平穩(wěn)。
1)色譜柱比較嬌氣不能夠碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震蕩;安裝時(shí)要保證閥件或管路的清潔。
2)流動相在使用前必須進(jìn)行脫氣處理,盡量不使用或少使用高粘度的流動相。
3)在滿足靈敏度的前提下,盡可能的使用小進(jìn)樣量。如果樣品比較臟,要進(jìn)行凈化或提純處理。
4)分析結(jié)束后要清洗掉進(jìn)樣閥中殘留的樣品,并用流動相或適當(dāng)?shù)娜軇┣逑瓷V柱。
5)如長期不用,用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑保存并封閉或定期補(bǔ)充合適的流動相。
3 、檢測器
分析完成后,馬上關(guān)閉檢測器。
4 、進(jìn)樣器
分析結(jié)束后反復(fù)沖洗進(jìn)樣口,防止樣品的交叉污染或堵塞。
高效液相色譜儀可以完成二元高壓梯度洗脫,也可以拓展為制備系統(tǒng),采用高壓混合器連接兩個(gè)高壓恒流泵,利用RS232通訊,即可實(shí)現(xiàn)梯度分析;
便于用戶自由選擇與搭配,混合器材主要由不銹鋼、生物惰性PEEK等構(gòu)成,用途廣泛;
可廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測、化工分析、環(huán)境監(jiān)測等眾多分析領(lǐng)域。
高效液相色譜儀分離原理:液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動相和固定相都是液體。
流動相與固定相之間應(yīng)互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個(gè)明顯的分界面。
當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱,溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí),高效液相色譜儀報(bào)價(jià),服從于高效液相色譜計(jì)算公式;
6種定量計(jì)算方法:歸一法、修正歸一法、帶比例因子的修正歸一法、內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法,高效液相色譜儀適用范圍,以及指數(shù)計(jì)算法。
高效液相色譜儀特點(diǎn):
1、梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制,編輯、存貯60個(gè)梯度方法,運(yùn)行復(fù)雜的梯度程序;
2、泵形式:串聯(lián)雙柱塞 浮動式密封圈;泵頭自沖洗功能,泵無須手動排空即可輸液“自吸式單向閥”技術(shù),可延長密封圈使用壽命;
3、光路系統(tǒng)采用精密定位結(jié)構(gòu)和獨(dú)特的散熱技術(shù),高效的光學(xué)系統(tǒng)和數(shù)字過濾;
4、程序化的溶劑類和壓縮因子,可自動補(bǔ)償;完整的預(yù)清洗功能,更于快速溶劑更換;
5、波長調(diào)節(jié)功能:既可由鍵盤面板控制也可由程序軟件設(shè)定,全封閉集成型光電檢測元件,無需任何機(jī)械部分調(diào)整即可選擇或改變波長;
6、光源運(yùn)行時(shí)間在線監(jiān)測并顯示,方便用戶確定光源壽命;
7、三條流量校正曲線以及特有的多點(diǎn)參數(shù)校正,保障了極高的流量準(zhǔn)確性;
8、梯度:高壓2-3元;梯度方式:高壓,梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制,可通過PC機(jī)及泵控制;
9、實(shí)時(shí)顯示樣品池和參比池能量,方便判斷光源和流通池狀態(tài);
10、紫外檢測器具有自動波長定位調(diào)整,自動調(diào)零,多量程輸出選擇;
11、智能化高,可實(shí)現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)化平臺監(jiān)控,提高了你的QC效益;
12、自動化,讓你從繁鎖的分析操作中解放出更多的時(shí)間。