紫外分光光度法是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜，來研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計(jì)可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。
分光光度計(jì)應(yīng)用范圍
1、紫外檢測：常規(guī)紫外光波長下檢測樣品吸光值。
2、動(dòng)力學(xué)檢測：用于酶活力和生長曲線等動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)的測定。
3、全波長掃描：185-910nm全波長掃描，顯示吸收曲線。
4、探針檢測：檢測熒光標(biāo)記探針的吸光值，可用于去除未能標(biāo)記探針的樣品。
5、核酸檢測：可檢測dsDNA、ssDNA、RNA等不同類型核酸的濃度及其在260nm、280nm處的吸光值。
6、蛋白檢測：檢測普通純化后蛋白的濃度和280nm處的吸光值，BCA、Bradford、Lowry、Pierce 660nm 蛋白定量分析。
7、菌液/懸浮細(xì)胞濃度檢測：可檢測菌液OD600值及監(jiān)測懸浮細(xì)胞生長情況。
8、用戶自定義檢測：可自定義設(shè)置檢測的參數(shù)，如最大吸收峰，計(jì)算公式等。
分光光度計(jì)特點(diǎn)
1.僅需微量體積樣品，減少所需的樣品消耗，并且無需稀釋，0.5ul至2ul的樣品即可完成測量。
2.檢測波長范圍：200-850nm
3.極快的檢測速度，無需預(yù)約，可隨時(shí)檢測。每個(gè)樣品的測量在很短的時(shí)間測試完成
4.更長的光學(xué)壽命，智能識(shí)別用戶使用情況，5分鐘內(nèi)無操作，將自動(dòng)關(guān)閉光源，以延長使用壽命。
5.待用戶按下檢測按鈕時(shí)候，自動(dòng)開啟，整個(gè)過程無需用戶干預(yù)，設(shè)備自動(dòng)識(shí)別
6.圖形軟件操作界面更直觀，結(jié)果可直接以EXCEL表格導(dǎo)出，便于數(shù)據(jù)查看和分析
分光光度計(jì)常見故障：
1、不使用氘燈時(shí)如何關(guān)閉氘燈?
當(dāng)連接儀器時(shí)，選擇儀器>配置>保養(yǎng)標(biāo)簽，然后點(diǎn)擊氘燈邊上的燈狀態(tài)框，除去復(fù)選標(biāo)記。只要掃描范圍和固定波長測定不在氘燈的范圍之內(nèi)時(shí)，氘燈將處于關(guān)閉狀態(tài)。
2、如果發(fā)生通訊故障，應(yīng)該檢查哪些項(xiàng)目?
①檢查在儀器配置屏幕(選擇儀器>配置)中是否選擇了合適的通訊口;
②檢查電纜是否正確，牢固地連接
③檢查儀器的電源是否已經(jīng)打開
3、紫外區(qū)讀數(shù)漂移的原因
確認(rèn)氘燈是否點(diǎn)亮。氘燈的使用時(shí)間是否超過了預(yù)期的500h壽命，一旦超過，光強(qiáng)減弱，也許需要更新。此外可檢查夾縫寬度的設(shè)置是否太小。
4、為什么基線校正不能正常起作用?
是否樣品室中放了樣品?基線校正時(shí)有三種選擇，可確保基線校正的正常。
①樣品室池架內(nèi)空置(空氣對空氣)。此時(shí)校正儀器的基線，特別適合精細(xì)的基線校正
②樣品池中放入溶劑，參比側(cè)空置
③樣品和參比池中都放入溶劑
需要確認(rèn)樣品室的門已經(jīng)關(guān)好。雜散光會(huì)影響基線的質(zhì)量。此外，在指定的波長范圍內(nèi)溶劑和樣品池的材料匹配。
449717568
11
