熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù)，從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。
分光光度計工作原理
可見分光光度計是一種結構簡潔、使用方便的單光束分光光度計，基于樣品對單色光的選擇吸收特性可用于對樣品進行定性和定量分析。可應用于物理、化學、醫(yī)學、生物學等學科進行科研或供化學工業(yè)、食品工業(yè)、制藥工業(yè)、冶金工業(yè)、臨床生化、環(huán)境保護部門進行各種物質的定性定量分析?？梢姽夥止夤舛扔嫷墓ぷ髟砣缦拢?/span>
當一束單色光照射待測物質的溶液時，當某一定頻率(或波長)的可見光所具有的能量(hf)恰好與待測物質分子中的價電子的能級差相適應(即ΔE=E2-E1=hf)時，待測物將對該頻率(波長)的可見光產生選擇性的吸收。用可見分光光度計可以測量和記錄其吸收程度(吸光度)。由于在一定條件下，吸光度A與待測物質的濃度C及吸收地長度l的乘積成正比，即A= KCL，所以，在測得吸光度 A后，可采用標準曲線法、比較法以及標準加入法等方法進行定量分析。
分光光度計基本結構：
1. 光源：
為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈，后者能發(fā)射出強度較大的連續(xù)光譜，且在300nm～400nm 范圍內強度幾乎相等，故較常用。
2.激發(fā)單色器：
置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或**單色器，篩選出特定的激發(fā)光譜。
3.發(fā)射單色器：
置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器，常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。
4. 檢測器：
一般用光電管或光電倍增管作檢測器?？蓪⒐庑盘柗糯蟛⑥D為電信號。
5. 樣品室：
通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時，光源與檢測器成直角安排;測量固體時，光源與檢測器成銳角安排。
分光光度計日常維護
一、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降;造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正。應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特別是地處南方地區(qū)的實驗室。
二、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也會影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成光學部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內衛(wèi)生條件，防塵等。
三、儀器使用一定周期后，內部會積累一定量的塵埃，由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內部進行除塵工作，同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑，最后，恢復原狀，再進行一些必要的檢測、調校與記錄。
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