氣相色譜儀定性分析就是要確定各色譜峰所代表的化合物。由于各種物質(zhì)在一定色譜條件下均有確定的保留值，保留值可作為一種定性指標(biāo)，目前各種色譜定性方法都是基于保留值定性的。但不同物質(zhì)在同一色譜條件下，可能具有相似或相同的保留值，即保留值并非專屬，因此僅根據(jù)保留值對(duì)一個(gè)完全未知的樣品定性是困難的。如果在了解樣品來源、性質(zhì)和分析目的的基礎(chǔ)上，對(duì)樣品組成作初步判斷，再結(jié)合下列方法，可確定色譜峰所代表的化合物?！?i> 一、利用已知純物質(zhì)對(duì)照定性： 利用已知純物質(zhì)對(duì)照定性是基于在一定操作條件下各組分的保留時(shí)間為定值，是色譜定性分析中較為方便的方法?！ 〖兾镔|(zhì)對(duì)照定性僅適用于組分性質(zhì)已有所了解、組成比較簡(jiǎn)單、有純物質(zhì)的未知物?！ ?i>二、根據(jù)相對(duì)保留值定性： 利用保留值定性時(shí)，必須使兩次分析條件完全一致，有時(shí)不易做到。有時(shí)利用相對(duì)保留值定性比利用保留值定性更方便、更可靠，只要保持柱溫不變即可。利用相對(duì)保留值定性要求找一個(gè)基準(zhǔn)物質(zhì)，通常選容易得到純品而且與被分析組分相近的物質(zhì)作基準(zhǔn)物質(zhì)，如正丁烷、環(huán)己烷、正戊烷、苯、對(duì)二甲苯、環(huán)己醇和環(huán)己酮等?！?i> 三、利用已知物峰增高定性： 當(dāng)未知樣品中組分較多，色譜峰過密，不易辨認(rèn)時(shí)，或僅作未知樣品指定項(xiàng)目分析時(shí)，可用此法?！ ∈紫茸鞒鑫粗獦悠返纳V圖，然后在未知樣品中加入某已知物，又得到一個(gè)色譜圖，峰高增加的組分可能為這種已知物?！ ?i>四、根據(jù)保留指數(shù)定性： 保留指數(shù)表示樣品在GC固定相上的保留行為，是目前使用廣泛并被國(guó)際公認(rèn)的GC定性指標(biāo)?！ ?、理論基礎(chǔ)： 正構(gòu)烷烴的調(diào)整保留時(shí)間的對(duì)數(shù)（lgtr′）與其相應(yīng)的碳數(shù)成線性關(guān)系?！ ?、計(jì)算方法： 保留指數(shù)是以正構(gòu)烷烴作為標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定在任何色譜條件下正構(gòu)烷烴的保留指數(shù)均為其分子中的碳數(shù)乘以100。待測(cè)樣品的保留指數(shù)IX是與待測(cè)樣品具有相同調(diào)整保留值的假想的正構(gòu)烷烴中的碳數(shù)乘以100。測(cè)定時(shí)，將碳數(shù)為n和n+1的正構(gòu)烷烴加到待測(cè)樣品中進(jìn)行色譜分析，待測(cè)樣品的保留指數(shù)IX可按下式計(jì)算： IX=[n+（lgtr（X）′－lgtr（n）′）/（lgtr（n+1）′－lgtr（n）′）]×100 式中：tr（n+1）′＞tr（X）′＞tr（n）′ 五、利用經(jīng)驗(yàn)規(guī)律和文獻(xiàn)值定性： 當(dāng)沒有待測(cè)組分的純標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí)，可利用GC經(jīng)驗(yàn)規(guī)律和文獻(xiàn)值進(jìn)行定性。 1、碳數(shù)規(guī)律： 大量實(shí)驗(yàn)證明，在一定溫度下，同系物的調(diào)整保留時(shí)間的對(duì)數(shù)與分子中的碳原子數(shù)成線性關(guān)系，即： lgtR′=A1n+C1 式中：A1和C1均為常數(shù)，n為分子中的碳原子數(shù)（n≥3）?！ 「鶕?jù)某一同系物中兩個(gè)或更多已知組分的調(diào)整保留時(shí)間的對(duì)數(shù)值，可求得同系物中其它組分的調(diào)整保留時(shí)間?！ ?、沸點(diǎn)規(guī)律： 同族中具有相同碳數(shù)碳鏈的異構(gòu)體化合物，其調(diào)整保留時(shí)間的對(duì)數(shù)和它們的沸點(diǎn)成線性關(guān)系，即： lgtR′=A2Tb+C2 式中：A2和C2均為常數(shù)，Tb為組分的沸點(diǎn)（K）?！ 「鶕?jù)同族同碳數(shù)碳鏈異構(gòu)體中兩個(gè)或更多已知組分的調(diào)整保留時(shí)間的對(duì)數(shù)值，可求得同族中具有相同碳數(shù)的其它異構(gòu)體的調(diào)整保留時(shí)間?！ ?i>六、利用多柱定性： 對(duì)于復(fù)雜樣品，利用多柱定性更有效、更可靠，使原來在一根色譜柱上可能出現(xiàn)相同保留值的兩種組分，在另一根色譜柱上可能出現(xiàn)不同的保留值。 實(shí)驗(yàn)表明，同系物在兩種不同固定相上保留值的對(duì)數(shù)成線性關(guān)系?！ ?i>七、利用多檢測(cè)器定性： 在相同的色譜條件下，同一樣品在不同的檢測(cè)器上有不同的響應(yīng)信號(hào)，可利用檢測(cè)器的選擇性進(jìn)行定性。 實(shí)際工作中多采用雙檢測(cè)器定性。雙檢測(cè)器可串聯(lián)，也可并聯(lián)?！ ?i>八、利用化學(xué)反應(yīng)定性： 1、利用衍生物定性： 有機(jī)物中某些難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定或極性很強(qiáng)的物質(zhì)，如酸類、糖類、醇類和胺類等，可利用各種衍生反應(yīng)生成衍生物后進(jìn)行定性。這樣可克服直接分析的困難，使這些物質(zhì)的分析變得比較容易?！ ?duì)于GC可直接定性的未知物，如已初步定性，也可將未知物和標(biāo)準(zhǔn)物同時(shí)轉(zhuǎn)化成衍生物，如果未知物與標(biāo)準(zhǔn)物的保留值變化一致，則可認(rèn)為它們是同一物質(zhì)。 2、利用消除法定性： 利用某些官能團(tuán)與化學(xué)試劑反應(yīng)，使樣品中某組分消失而不出峰，以確定所消失的組分代表何種物質(zhì)?！ ∠Х磻?yīng)可以在柱上、注射器中或單獨(dú)的微型反應(yīng)管中進(jìn)行，然后將反應(yīng)物注入GC進(jìn)行分析定性。 3、利用柱后流出物的化學(xué)檢驗(yàn)定性： 收集色譜柱分離后的純組分，利用官能團(tuán)分類試劑進(jìn)行檢驗(yàn)定性?！ ∈占椒ㄓ腥軇┕怖淠占?、溶劑結(jié)晶收集法和螺旋玻璃管冷凝收集法等。 也可將柱后餾出物直接通入盛有官能團(tuán)分類試劑的檢驗(yàn)管，利用官能團(tuán)特征反應(yīng)對(duì)各種餾出物進(jìn)行定性?！ ?i>九、利用GC與其它儀器聯(lián)用定性： GC具有很強(qiáng)的分離能力，適合多組分混合物的定量分析，但定性分析常因沒有純物質(zhì)或幾種物質(zhì)的保留值相近而發(fā)生困難，因此，對(duì)復(fù)雜混合物的定性分析難以做出正確判斷。而質(zhì)譜、紅外光譜和核磁共振譜等特別適合單一組分的定性，將GC與其聯(lián)用，能發(fā)揮各自的長(zhǎng)處，可解決復(fù)雜混合物的定性問題?！ ÷?lián)用方式有不在線和在線兩種。不在線是將色譜柱分離的組分收集后，再進(jìn)入其它儀器進(jìn)行定性。在線是色譜柱分后的組分直接進(jìn)入其它儀器進(jìn)行定性。后一種發(fā)展十分迅速，目前已發(fā)展了各種形式的聯(lián)用儀器，其中以色質(zhì)聯(lián)用比較有效，是鑒別復(fù)雜混合物強(qiáng)有力的工具之一。
標(biāo)簽: 色譜儀 色譜儀 色譜儀的定性分析_色譜儀
高速逆流色譜法于1982年由美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院Ito博士研制開發(fā)的一種新型的、連續(xù)高效的液液分配色譜技術(shù)，與其它色譜技術(shù)不同的是它不需任何固態(tài)載體，因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響。
同時(shí)它也具有適用范圍廣、快速、進(jìn)樣量大、費(fèi)用低、回收率高等優(yōu)點(diǎn)。因此，己在生物、醫(yī)藥、食品、材料、化妝品和環(huán)保等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用，尤其是在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領(lǐng)域倍受重視。
高速逆流色譜儀原理及特點(diǎn)
利用了一種特殊的流體動(dòng)力學(xué)（單向流體動(dòng)力學(xué)平衡）現(xiàn)象。具體表現(xiàn)為一根100多米長(zhǎng)的螺旋空管，注入互不相溶的兩相溶劑中的一相作為固定相，然后作行星運(yùn)動(dòng)；同時(shí)不斷注入另一相（流動(dòng)相），由于行星運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的離心力場(chǎng)使得固定相保留在螺旋管內(nèi)，流動(dòng)相則不斷穿透固定相；這樣兩相溶劑在螺旋管中實(shí)現(xiàn)高效的接觸、混合、分配和傳遞。由于樣品中各組分在兩相中的分配比不同，因而能使樣品中各組分得到分離。
應(yīng)用范圍廣，適應(yīng)性好。由于溶劑系統(tǒng)的組成與配比可以是無限多的，因而從理論上講HSCCC適用于任何極性范圍的樣品的分離，所以在分離天然化合物方面具有其獨(dú)到之處。并因不需固體載體，而消除了氣液色譜中由于使用載體而帶來的吸附現(xiàn)象，特別適用于分離極性物質(zhì)和其它具有生物活性的物質(zhì)。
重現(xiàn)性好。如果樣品不具有較強(qiáng)的表面活性作用，酸堿性也不強(qiáng)，那么多次進(jìn)樣，其分離過程穩(wěn)定性都保持很好、峰的保留相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差也小于2%，重現(xiàn)性相當(dāng)好。
高速逆流色譜是建立在單向性流體動(dòng)力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法，它是在研究旋轉(zhuǎn)管的流體動(dòng)力平衡時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)螺旋管在慢速轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端。用某一相作移動(dòng)相從一端向另一端洗脫時(shí)，另一相在螺旋管里的保留值大約50%，但這一保留量會(huì)隨著移動(dòng)相流速的增大而減小，使分離效率降低。但使螺旋管的轉(zhuǎn)速加快時(shí)，兩相的分布發(fā)生變化。
當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到臨界范圍時(shí)，兩相就會(huì)沿螺旋管長(zhǎng)度完全分開，其中一相全部占據(jù)首端的一段，我們稱這一相為首端相，另一段全部占據(jù)尾端的一段，稱為尾端相。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征，在高的螺旋管轉(zhuǎn)動(dòng)速下，如果從尾端送入首端相，它將穿過尾端相而移向首端，同樣，如果從首端相送入尾相，它將穿過首端相而移向螺旋管的尾端。
分離時(shí)，在螺旋管內(nèi)首先注入其中的一相(固定相)，然后從合適的一端泵入移動(dòng)相，讓它載著樣品在螺旋管中無限次的分配。儀器轉(zhuǎn)速越快，固定相保留越多，分離效果越好，且大大地提高了分離速度，故稱高速逆流色譜。
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