紫外分析儀是熒光技術的應用,熒光技術是什么呢? 首先了解一下什么是熒光,熒光又作“螢光”,是指一種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當某種常溫物質經(jīng)某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進入激發(fā)態(tài),并且立即退激發(fā)并發(fā)出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且一旦停止入射光,發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為熒光。 知道了什么是熒光,顧名思義就能想到什么是熒光技術。熒光技術是某些物質受一定波長的光激發(fā)后,在極短時間內(10-8秒)會發(fā)射出波長大于激發(fā)波長的光,這種光稱為熒光。這一發(fā)光現(xiàn)象在各方面的應用及有關的方法稱為熒光技術(fluorescent technique)。 物質經(jīng)過紫外線照射后發(fā)出熒光的現(xiàn)象可分為兩種情況,第一種是自發(fā)熒光,如葉綠素、血紅素等經(jīng)紫外線照射后,能發(fā)出紅色的熒光,稱為自發(fā)熒光;第二種是誘發(fā)熒光,即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過紫外線照射發(fā)出熒光,稱為誘發(fā)熒光。
熒光技術在生物化學及分子生物學研究中應用主要包括以下幾個方面:
1、物質的定性:不同的熒光物質有不同的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,因此可用熒光進行物質的鑒別。與吸收光譜法相比,熒光法具有更高的選擇性。
2、定量測定:利用在較低濃度下熒光強度與樣品濃度成正比這一關系可以定量分析樣品中熒光組分的含量,常用于測定氨基酸、蛋白質、核酸的含量。熒光定量測定的一個優(yōu)點是靈敏度高,例如維生素B2的測定限量可達1毫微克/毫升,這一優(yōu)點使測定時所需要樣品量大大減少。 這種定量測定方法還可應用于酶催化的反應,只要反應前后有熒光強度的變化,就可用來測定酶的含量及酶反應的速率等。
激光粒度分析技術就是一種既可以準確測定顆粒物濃度又可以測定粒度分布(粒度組成)的現(xiàn)代技術。
該技術采用MIE氏散射原理,通過檢測顆粒物的散射譜分析粒度組成,他的突出優(yōu)點是不接觸測量,速度快,重復性好,可以動態(tài)測量。
在線激光粒度儀就是針對生產(chǎn)現(xiàn)場的實際需要,發(fā)展起來的一種實時粒度分析手段,它具有實時性,連續(xù)性,抗電磁、高溫、粉塵、震動、腐蝕性干擾能力,為控制系統(tǒng)提供準確的控制信號,真正實現(xiàn)生產(chǎn)自動化、監(jiān)測科學化。
激光粒度分析儀的使用過程中,對于使用者來說,如何選取儀器的遮光比對于提升儀器精準度是很有影響的,所謂的遮光比就是在使用納米激光粒度儀測試樣品時,配置的樣品懸浮液的濃度,遮光比的正確選擇是激光粒度儀在粒度測試過程中的重要的步驟,遮光比是否合適或者說被測樣品的濃度是否合適嚴重關系到粒度測量結果的準確性和代表性。
激光粒度分析儀的測量原理要求在測試過程中,樣品的濃度以樣品中顆粒之間相互不發(fā)生二次散射為原則,理論上就是要求懸浮液或者空氣中顆粒之間的距離為顆粒直徑的3倍,但是這個要求非常難以掌握,因此在實際的粒度測試中,通過調整遮光比的數(shù)值來盡量保證顆粒之間不發(fā)生二次散射。
遮光比不宜過大(超過50%)或者過小(低于5%),遮光比過大時,顆粒的濃度過高,容易發(fā)生二次散射,測量結果誤差增大;遮光比過低,樣品中顆粒的濃度太低,顆粒數(shù)太少,測試結果的代表性很差,甚至可能導致測試結果是無效的,因此在測試過程中,對遮光比的選取要通過反復試驗,以得到正確的測量結果。
一般來說,對于比較粗的樣品,遮光比可以選擇的比較高,如20~30%,正常情況可以為10~25%;對于超細的樣品,可以適當降低樣品的遮光比,但一般不要超過40%,這些都是實驗得到的經(jīng)驗數(shù)值,但最終還需通過反復實驗,找到對應樣品測試時遮光比的較佳數(shù)值。