一、開機
開機前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，確認電源是否連接。打開儀器電源開關(guān)，等待儀器自檢通過，自檢過程中禁止打開樣品室。
二、使用
儀器自檢結(jié)束后(7個自檢項目均出現(xiàn)OK字樣)，按[MAINMENU]鍵(主菜單)，屏幕顯示如下5個功能項：
1、Phtometry(定量運算);
2、WavelengthScan(波長掃描模式);
3、TimeScan(時間曲線掃描);
4、System(系統(tǒng)校正);5、Datadisplay(光度直接測量模式)。按相應選項前的數(shù)字鍵，即可進入該選項的下一級子菜單。
1、Phtometry(定量運算)
1)按[MAINMENU]鍵，再按數(shù)字[1]鍵進入Phtometry子菜單下，選中對應的數(shù)字來選擇所需的測定方式：
?、?T/ABS(透過率/吸光度測定模式);
?、赗atio(比例測定模式);
③Concentration(濃度測定模式或標準曲線模式);
2)按數(shù)字[1]鍵進入%T/ABS(透過率/吸光度測定)子菜單，選中對應的數(shù)字鍵來設定測定條件：①NUMWL(設定測試波長的數(shù)目，較多可設定6個不同波長);
②WLSetting(設定測試波長具體數(shù)值)③DataMode(選擇測定吸光度或透光率)，設定完畢后點擊[Enter]鍵確定，所有項目設定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定，等待儀器調(diào)整至準備狀態(tài)，此時屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO，將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中，按[Start/Stop]鍵進行零點的自動調(diào)整，自動調(diào)零完成后，將樣品置于光路中，再按[Start/Stop]鍵進行測量，儀器的顯示屏自動給出對應波長的數(shù)值。
3)按數(shù)字[3]鍵進入③Concentration(濃度測定模式或標準曲線模式)，選中對應的數(shù)字來設定條件(波長數(shù)目，波長數(shù)值，標準溶液數(shù)目及濃度)，設定完畢后點擊[Enter]鍵確定，所有項目設定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定，等待儀器調(diào)整至準備狀態(tài)，此時屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO，將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中，按[Start/Stop]鍵進行零點的自動調(diào)整，自動調(diào)零完成后，將標準溶液置于光路中，按照濃度從低到高順序依次按[Start/Stop]鍵進行測量，測量完畢后儀器將自動給出標準曲線，標準曲線下方有三項供選擇：①Process(更改標準曲線的坐標和觀察濃度回歸曲線的數(shù)據(jù));②Measure(直接進入樣品的測量);③Print(打印濃度回歸曲線譜圖和數(shù)據(jù))，選中對應的數(shù)字就可執(zhí)行相應的功能。
4)如果希望返回上一級菜單，按[CLEARRETURN]鍵返回，返回主菜單直接按[MAINMENU]鍵。
2、WavelengthScan(波長掃描模式)
1)參數(shù)修改：按[MAINMENU]鍵，再按數(shù)字[2]鍵進入②WavelengthScan(波長掃描模式)子菜單下，選中對應的數(shù)字來選擇所需修改的內(nèi)容，修改掃描的起始波長，測量模式，圖譜坐標的上下限，掃描速度等等。修改完畢按數(shù)字[0]鍵確定。
2)波長掃描：分別將兩個比色皿裝上空白溶液和樣品溶液，放入比色槽中，按[Start/Stop]鍵進行譜圖掃描(如想終止掃描再次按按[Start/Stop]鍵)，待儀器自動進行基線校正，提示拉入樣品自動測試，測試完畢后有掃描圖譜出現(xiàn)，下方有相應的數(shù)據(jù)處理選項①Process②Baseline③Print;
3)數(shù)據(jù)處理：按數(shù)字[1]鍵進入①Process(數(shù)據(jù)處理)，可以讀峰谷值，修改坐標，顯示所有數(shù)據(jù)，求一階倒數(shù)等等功能。
3、TimeScan(時間曲線掃描)
同上(二)操作。
4、System(系統(tǒng)校正)
一般不做。
5、Datadisplay(光度直接測量模式)
同上(二)操作。
三、關(guān)機
將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈;關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理人員認可方可離開。
雙光束紫外-可見分光光度計（以下簡稱儀器），系指從單色器發(fā)出的單色光經(jīng)光束開關(guān)（斬光器）分成為樣品和參比兩條光束結(jié)構(gòu)的儀器。
它能消除光源不穩(wěn)和放大器增益變化的影響，并能自動記錄和掃描物質(zhì)的吸收光譜圖。
儀器在開機后通常會做一些自檢，但仍應按本規(guī)程進行檢定。儀器的波長范圍包括195~800nm，狹縫為0.1~5nm可調(diào)。
工作原理
紫外可見分光光度法是利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進行分析的一種儀器分析方法。
這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價電子能級的躍遷，它廣泛用于無機和有機物質(zhì)的定性和定量分析。
朗伯一一比耳定律（Lambet-Beer）是光吸收的基本定律，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎。
當入射光波長一定時，溶液的吸光度是吸光物質(zhì)的濃度c及吸收介質(zhì)厚度（吸收光程）的函數(shù)。
其常用表達式如下（式中ε為系數(shù)）：
A=ε·c·l
紫外見分光光度計是基于紫外可見分光光度法的原理工作的常規(guī)分析儀器。根據(jù)光路設計的不同，紫外可見分光光度計可以分為單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。
制定依據(jù)
本規(guī)程主要參照國家計量檢定規(guī)程《JJG178-2007紫外、可見、近紅外分光光度計》、《JJF1641-2017紫外可見分光光度計型式評價大綱》及《中國藥典》2015年版四部指導通則“0401紫外-可見分光光度法”擬定。
項目及技術(shù)要求
波長準確度≤±1.0nm（紫外光區(qū)），≤±2.0nm（500nm附近）；
波長重復性≤0.5nm。
基線平直度≤0.01吸光度。
0%線噪聲≤0.1%，100%線噪聲≤0.5%.
吸光度準確度應符合規(guī)定。
雜散光<0.8%。
光譜帶寬≤標示帶寬±20%。
吸收池配對誤差≤0.5%。
檢測結(jié)果處理
自檢結(jié)果全部符合技術(shù)要求者，即為合格，可以使用。若檢測結(jié)果不符合規(guī)定，應重新調(diào)試儀器再進行自檢，符合規(guī)定后方可使用。
分光光度法是根據(jù)被測物質(zhì)分子對紫外、可見波段范圍單色輻射的吸收或反射強度來進行物質(zhì)的定性、定量或結(jié)構(gòu)分析的一種方法。
可見分光光度計的維護：
1、保護光源：光源燈有一定的壽命，儀器不工作時不要開燈，若工作間歇時間短，可不關(guān)燈。 一旦停機，則要待燈冷卻后再重新啟動，并預熱15min。
燈泡發(fā)黑或亮度明顯減弱或不穩(wěn)定時，就及時更換。 經(jīng)經(jīng)紫外光照射后形成結(jié)痕可用無水乙醇去除。
2、保證合適的工作環(huán)境溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。
不適宜的溫度和濕度可引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降；造成光柵、反射鏡、聚焦鏡等光學部件的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等；甚至使儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正溫度和濕度。
3、定期清潔，保障環(huán)境和儀器內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵。
儀器使用一定時間后，內(nèi)部會積累一定量的塵埃，建議由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進行除塵工作，同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑，最后恢復原狀，再進行一些必要的檢測、調(diào)校和記錄。
4、正確使用比色皿拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。
清洗比色皿時，先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。若被比色皿被有機物沾污，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液（1:2）浸泡片刻，再用水沖洗。
每次做完實驗應立即洗凈比色皿。比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干，以保護透光面。
可見分光光度計是一種結(jié)構(gòu)簡潔、使用方便的單光束分光光度計，基于樣品對單色光的選擇吸收特性可用于對樣品進行定性和定量分析。
廣泛應用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢測、生物化學、石油化工、環(huán)保監(jiān)測、食品生產(chǎn)和質(zhì)量控制等部門作定性、定量分析，還可作為大、專院校和中學相關(guān)課程的教學演示和實驗儀器。
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