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酶標(biāo)儀的六個(gè)自檢方面 酶標(biāo)儀如何操作

時(shí)間:2020-08-06    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
        酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀,是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的專用儀器又稱微孔板檢測(cè)器。酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì),其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。
想要對(duì)某一酶標(biāo)儀進(jìn)行詳細(xì)的了解和認(rèn)識(shí),建議是能夠按照如下流程進(jìn)行自檢操作:
        (一)外觀
        酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,型號(hào),編號(hào),生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開(kāi)關(guān)均能正常工作,外表面無(wú)明顯機(jī)械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。
        (二)酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)
        選用492nm波長(zhǎng),在吸光度o.0A處,測(cè)定標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片(測(cè)定操作按儀器說(shuō)明進(jìn)行),記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測(cè)定值之差不應(yīng)超過(guò)±0.00。
        (三)吸光度測(cè)定的準(zhǔn)確度
        選用405,492和620nm波長(zhǎng),以空氣為參比,分別測(cè)定標(biāo)稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用專用測(cè)試板代替酶標(biāo)板,按儀器說(shuō)明連續(xù)測(cè)定3次,按下式計(jì)算準(zhǔn)確度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:為標(biāo)準(zhǔn)值)。
        (四)吸光度測(cè)定的重復(fù)性
        波長(zhǎng)選擇同(三),在酶標(biāo)板*排加注空白溶液,二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)定5次。記錄每次測(cè)定的二排吸光度值,取二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值。
        (五)酶標(biāo)儀的線性選用540nm波長(zhǎng),將標(biāo)稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入專用測(cè)試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測(cè)定3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于專用測(cè)試板的同一孔位中,重復(fù)測(cè)定3次。
        (六)測(cè)定速度的檢定.
        選用492nm波長(zhǎng),放人96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)定,用秒表計(jì)測(cè)儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。酶標(biāo)儀除了在選購(gòu)時(shí),應(yīng)盡可能自檢外,在使用中也應(yīng)定期檢定,以保證酶標(biāo)儀測(cè)定的有效性。附:200ttg/ml重鉻酸鉀溶液的配制將重鉻酸鉀固體試劑放人稱量瓶中(去蓋)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器內(nèi)冷卻30min,在分析天平上準(zhǔn)確稱取o.2829g,置于100ml燒杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗燒杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀釋至刻度線,搖勻。

酶標(biāo)儀在臨床實(shí)驗(yàn)方面應(yīng)用廣泛,用于鑒別乙肝兩對(duì)半,HIV,鑒定DNA等許多方面,可以說(shuō)它是臨床及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)不可或缺的基礎(chǔ)設(shè)備。

故障一:測(cè)量的結(jié)果重現(xiàn)性不好,即使用空板測(cè)量誤差也在允許的范圍之外。

故障分析:檢查試劑發(fā)現(xiàn)沒(méi)有問(wèn)題,檢查判定公式也沒(méi)有問(wèn)題,檢查光路也沒(méi)有污染。幾經(jīng)周折終于發(fā)現(xiàn)卡微板的卡簧在伸縮后沒(méi)有卡到位,造成微板在測(cè)量時(shí)在機(jī)內(nèi)晃動(dòng)影響測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)。

故障二:測(cè)量結(jié)果OD值偏低

故障分析:排除完燈的能量值偏低后,檢查發(fā)現(xiàn)濾光片上有灰塵,用蒸餾水和擦鏡紙擦洗干凈晾干后故障排除。

測(cè)試方法:酶標(biāo)儀的儀器指標(biāo)在蕞佳狀態(tài),就儀器的精度測(cè)試和儀器的線性度介紹幾種測(cè)試方法。

精度測(cè)試:該過(guò)程可被用于檢測(cè)不同微板之間的測(cè)量精度。

使用新制備的在0.1% TWEEN20中的橘黃色甲基填充微孔,在每個(gè)微孔中使用不同稀釋度的溶劑以便獲得一個(gè)光密度范圍,首先確保每孔注入200mL液體,使用492nm慮光片測(cè)量至少3次,對(duì)每一微孔進(jìn)行下列計(jì)算:

(1)平均OD值;(2)蕞高和蕞低值;(3)平均值。高和低值之間的差值和百分比。讀數(shù)范圍在0.000到2.000Abs。同一孔平均值,高值和低值之間的差值應(yīng)該在+/一1.0%和+/一0.010OD范圍內(nèi)。

讀數(shù)范圍在2.000到3.000Abs同一孔平均值,高和低值之間的差值應(yīng)在+/一1.0% 和+/一0.005OD值范圍內(nèi)。讀數(shù)范圍在3.000Abs以上時(shí)準(zhǔn)確度不符合要求。

酶標(biāo)儀儀器線性度:儀器的線性度可使用一種溶劑的稀釋系列得到。如可在492 nIn處測(cè)量在0.1%TWEEN20中的橘黃色甲基的稀釋系列。

具體方法如下:在參考光密度計(jì)上測(cè)量被稀釋的溶劑,畫出OD值對(duì)已知濃度的點(diǎn)圖,并畫出通過(guò)這些點(diǎn)的好的直線。將從系列稀釋中測(cè)得的吸光度值與該圖比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。微板中每種稀釋度加入250t,-L,對(duì)每種稀釋至少使用兩個(gè)樣本,以便降低因加樣引起的誤差。 測(cè)量微板使用測(cè)量模式,利用測(cè)量得到的平均OD值和每個(gè)樣本的已知濃度畫一條OD濃度的曲線,從系列稀釋中測(cè)得的吸光值與該曲線比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。

對(duì)光度記和本儀器,比較計(jì)算的濃度,不準(zhǔn)確度不應(yīng)大于以下,使用標(biāo)準(zhǔn)濾光片492nm時(shí)吸光度在0.000~2.000Abs+/一1%、2.000~3.000Abs+/一1.5%。使用梯度濾光片492nm時(shí),吸光度在0.000~2.500Abs+/一2%。

 

酶標(biāo)儀維護(hù)保養(yǎng)注意事項(xiàng)
  酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相的專用光電比色計(jì)或分光光度計(jì)。主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)反應(yīng)中檢測(cè)吸光度值,用途是應(yīng)用于ELISA試劑的測(cè)定,是一款廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室,包括臨床實(shí)驗(yàn)室的醫(yī)療設(shè)備。

  酶標(biāo)儀維護(hù)保養(yǎng)注意事項(xiàng):

  1、儀器應(yīng)放置在無(wú)磁場(chǎng)和干擾電壓,低于40分貝的環(huán)境下;

  2、應(yīng)避免陽(yáng)光直射以防止設(shè)備老化;

  3、操作時(shí)環(huán)境溫度應(yīng)在15℃-40℃之間,環(huán)境濕度在15%-85%之間;

  4、運(yùn)行中操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定;

  5、操作環(huán)境空氣清潔,避免水汽,煙塵;

  6、保持干燥、干凈、水平的工作臺(tái)面,足夠大的操作空間;

  7、使用加液器加液,加液頭不能混用;

  8、盡量配套使用洗板機(jī)洗板,能有效避免交叉污染;

  9、在測(cè)量過(guò)程中,請(qǐng)勿碰酶標(biāo)板,以防酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人員的手;

  10、請(qǐng)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請(qǐng)洗手;

  11、如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒的操作說(shuō)明,以防對(duì)操作人員造成損害。

標(biāo)簽: 酶標(biāo)儀
酶標(biāo)儀 酶標(biāo)儀維護(hù)保養(yǎng)注意事項(xiàng)_酶標(biāo)儀

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