2、不要自行拆卸各部件；鏡筒要插上接目鏡或益上鐐苗蓋，避免灰塵從鏡筒上部進入；透鏡表面不要用手指碰觸或拭擦，如有灰塵，先用柔軟毛筆輕輕拂去，再用柔軟的清潔細布拭撩，也可用擦鏡紙蘸少許二甲苯或石油迷試擦，但注意不要在透鏡表面劃出條紋。如鏡片有輕度長霉，用擦繞紙擦不去時，可用棉簽蘸少許70％乙醇與30％乙迷混合液輕輕拭撩。
3、生物顯微鏡不可與腐蝕性酸類、減類或揮發(fā)性強的化學藥品放在一起，以免被腐蝕，縮短使用年限。原則上，當觀察含液體的標本時，一般都要蓋上蓋玻片；若液體中含有酸、堿等腐蝕性化學物質(zhì)時，應把蓋玻片的四周用石蠟或凡士林封住，然后觀察。但由于進行中藥顯微鑒定時，經(jīng)常要用這一類試劑，不可能都封固，因此要特別小心，防止液體流到載物臺上，吏不要沾到物鏡上。
4、生物顯微鏡不應在直射陽光下暴曬，也不要放在靠近爐子或暖氣的地方，以避免過劇的冷熱變化引起透鏡和機件的脫膠、變形或損壞。
5、清潔接物鏡只限于外表面。接物面被藥品污染后即用撩鏡紙蘸少許擦鏡液拭擦（不要用乙醇）；若背面須清潔時，可用柔軟毛筆拂拭，或用皮吸頭吸去灰塵。
6、轉(zhuǎn)動粗細調(diào)比鋁調(diào)焦時，動作要緩慢，不要壓碎蓋被片，以防接物鏡和集光器受控擊而損壞。
7、使用油鏡后，須將鏡頭上的香柏油拭探干凈（可用擦鏡紙蘸少許二甲苯拭擦，但注怠二甲苯不能滲入鏡頭內(nèi)部，否則二甲苯溶解透鏡之間的粘合劑，可使鏡片脫落）。
8、反光鏡鏡面要保護清潔，不要使水、二甲苯或香柏油透入，以免反光鏡的水銀脫落。
9、加機械部分不靈活，可用細綢布蘸二甲苯少鈞：拭去銹和油膩（不得用乙醇，因為這些溶劑會侵蝕油漆），再用少許液體石服潤滑；旋扭過緊不要強行扭動，以免損壞。
10、有時在生物顯微鏡的視野中發(fā)現(xiàn)有污點或異物，可先轉(zhuǎn)動目鏡，如果這些污點跟著旋轉(zhuǎn)，則可確定污點是在目鏡上；否則，可移動標本片，如污點跟著移動，則污點是在標本片上。如果兩者都不是，則污點是在物鏡上，可先撿食物鏡的前鏡頭，然后檢查后鏡頭。根據(jù)不問情況進行清潔處理。
有時視野的一部分不清晰，這可能是物鏡或目鏡的前透鏡表面有指印或灰塵，也可能是標本片做得不好或顯微鏡用法不當，如照明系統(tǒng)末調(diào)好等原因，應查明情況，分別解決。
11、生物顯微鏡用畢后，應將各部分擦拭干凈，格接物鏡轉(zhuǎn)成八字形，然后將鏡筒和集光器下降固定，再將反光鏡的鏡面置垂直的位置。
熒光的原理是某些物質(zhì)會在高強度的短波長光線照射下，會發(fā)出波長稍長的發(fā)射光（熒光）。而我們一般都是觀察被激發(fā)熒光基團所發(fā)射出來的波長稍長的發(fā)射光（熒光）。
但是激發(fā)的光會很強，所以我們就需要把激發(fā)的光全部濾去，這樣才可以看到熒光基團的發(fā)射光（熒光）。
熒光顯微鏡一般都用高強度的汞燈做激發(fā)光源。使用濾色片把不需要的光濾去，只留下激發(fā)熒光集團的高強度很純的光線。這個單色的光線通過物鏡照射到樣本上之后，樣本會被激發(fā)出發(fā)射光（熒光），熒光和激發(fā)光都會沿著物鏡光路返回，這樣的話，就需要用一個二相色鏡把激發(fā)光濾去，只讓我們需要看到的熒光透過。
這個熒光沿著顯微鏡的光路最后到達目鏡下，然后進入我們的眼睛，我們就可以看到熒光基團所發(fā)出來的熒光了。
熒光顯微鏡的預檢查和調(diào)節(jié)：
(1)每次進行熒光觀測前，必須例行檢查熒光裝置的燈絲對中、光路對焦、孔徑光闌、視場光闌設置等狀況。
(2)所需要的熒光激發(fā)/發(fā)射濾光片組件是否已裝在轉(zhuǎn)換器中，熒光顯微鏡物鏡配置是否得當，除去物鏡前透鏡的油漬和灰塵。
(3)如同時進行透射光相差觀察，要檢查聚光鏡對中心及相差環(huán)與物鏡相反的共軛情況。
(4)檢查樣品載體(載玻片、蓋玻片和其他器皿)有否掛有液體、灰塵，厚度是否在物鏡標定的工作距離范圍內(nèi)。切片樣品不能太厚，約≤10μm為宜。
(5)因照明光源含有紫外線，在載物臺前上方放一塊棕色遮光板，以防紫外線損傷視網(wǎng)膜。
(6)電壓不穩(wěn)會降低高壓汞燈的使用壽命，光源電源加配穩(wěn)壓器。
(7)為延長汞燈壽命，在開啟后15min方可關閉；汞燈熒光電源一旦關閉，再次啟動至少需等待10min，以使水銀蒸汽冷卻復至原態(tài)，否則會影響燈的壽命。
熒光顯微鏡的像觀察：
(1)在開啟熒光燈源后約5～10min激發(fā)光強度趨于穩(wěn)定，裝載樣品進行觀察；為防止在調(diào)焦和尋找物像過程中過度激發(fā)光照會造成樣品熒光淬滅，先通過縮小熒光顯微鏡的孔徑光闌或加ND濾光片將激發(fā)光調(diào)節(jié)到適度強度，有規(guī)律地移動樣品臺，待確定鏡像后，在調(diào)節(jié)到熒光狀態(tài)用于拍攝記錄。
(2)鏡像質(zhì)量不佳的調(diào)整。排除樣品制備因素外，可進行的必要調(diào)節(jié)措施是：
①排除成像光路中的遮光或限光器件，如DIC附件、ND濾光片等。
②重新調(diào)節(jié)熒光顯微鏡的收光器對焦和孔徑光闌大小。
?、奂毿恼{(diào)節(jié)熒光顯微鏡物鏡覆蓋差校正環(huán)。
熒光顯微鏡的應用要點
熒光顯微鏡是利用“光化熒光”成像，如果所選激發(fā)波長在肉眼所看不見的近紫外光區(qū)(320～400nm)，熒光的發(fā)射光譜也較普通光鏡光源的平均波長短，光學分辨率提高。高能量的光子與電子碰撞，使得電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。激發(fā)態(tài)的電子很不穩(wěn)定，會重新回落到基態(tài)，這個過程中會消耗部分熱能，并發(fā)出新的光子。新的光子能量比起初的光子能量低，因此波長更長。由于新的光子波長區(qū)別于入射光的光子波長，通過一定的光學處理方法將兩束不同波長的光分開，從而使我們只看到發(fā)射出來的新光子（熒光信號），也就是熒光顯微鏡看到的熒光圖像。
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