紫外分光光度計(jì)是一種常用的分光計(jì)產(chǎn)品,是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段,產(chǎn)品被廣泛用于多個(gè)領(lǐng)域中。
紫外分光光度計(jì)的操作要點(diǎn):
啟動(dòng)儀器之前,一定要把樣品室內(nèi)存放的防潮劑拿出,儀器進(jìn)行正常運(yùn)轉(zhuǎn)檢查的時(shí)候,千萬不能開啟樣品室蓋;要求比色皿當(dāng)中的液體占總體積的66%-80%較好,千萬不能讓液體太多,以致于液體外泄腐蝕儀器;正常檢測(cè)的時(shí)候,需要保證比色皿干凈,內(nèi)壁上液滴需要使用專業(yè)的紙進(jìn)行擦拭,千萬不能使用手進(jìn)行直接的擦拭,容易對(duì)使用人員的手造成傷害,相信沒有人希望這樣的事情發(fā)生。
在正常運(yùn)轉(zhuǎn)的時(shí)候,嚴(yán)禁把液體溶劑放置于儀器的表層上,如果出現(xiàn)液體外泄的情況,一定要保證進(jìn)行及時(shí)的清潔處理。當(dāng)檢測(cè)完畢之后,需要及時(shí)將比色皿內(nèi)的液體處理掉,使用蒸餾水將其清理干凈,同時(shí)倒置進(jìn)行晾干處理。最后需要將儀器的電源關(guān)閉,把防潮劑放入到樣品室內(nèi),做好防塵處理,等到管理人員同意方可離去。
紫外可見光譜儀涉及的波長范圍在有機(jī)化學(xué)研究中得到廣泛的應(yīng)用。通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查,有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的研究。
在定量方面,可測(cè)定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量,也可以測(cè)定物質(zhì)的離解常數(shù),絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù),物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在高效液相色譜中作檢測(cè)器等。
基本工作原理:
紫外分光光度計(jì)基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機(jī)物質(zhì),引起分子中價(jià)電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。
一組吸收隨波長而變化的光譜,反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi),對(duì)于一個(gè)特定的波長,吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測(cè)量光譜可以進(jìn)行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較,還能進(jìn)行定量分析。
分光光度計(jì)的使用方法:
(1)接通電源;(2)使用前預(yù)熱15min;(3)選擇波長;(4)選擇檢測(cè)器;(5)如果可能的話,選擇正確的縫寬;
(6)插入適當(dāng)?shù)目瞻讓?duì)照;(7)調(diào)解到0%的透過率;(8)將吸光值調(diào)到零;(9)分析樣品;(10)每測(cè)量10個(gè)樣品后,用空白對(duì)照校驗(yàn)零刻度;(11)檢測(cè)儀器的可重復(fù)性。
紫外分光光度計(jì)應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水,飲用水,加工過程用水,地表水,冷卻水和鍋爐補(bǔ)給水等。
是實(shí)驗(yàn)室普及率較高的一種光譜儀器了,由于靈敏度高、選擇性好、準(zhǔn)確度高、適用濃度范圍廣,比較重要是分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速得到廣泛的應(yīng)用,長期在分析領(lǐng)域扮演很重要的角色。但是常常會(huì)聽某些同學(xué)為啥時(shí)候更換光源而煩惱,每次數(shù)據(jù)有差別,都覺得是光源惹得禍。
紫外分光光度計(jì)信號(hào)部分:
(1)紫外分光光度計(jì)樣品信號(hào)重現(xiàn)性不良;
原因:排除儀器本身的原因外,最大的可能是樣品溶液不均勻所致;在簡(jiǎn)易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時(shí)重復(fù)推拉不在同一個(gè)位置上;
檢查:更換一種穩(wěn)定的試樣判定;
解決辦法:采取正確的試樣配置手段;修理推拉式樣品架的定位碰珠;
(2)紫外分光光度計(jì)做基線掃描或樣品掃描時(shí),基線或信號(hào)有一個(gè)大的負(fù)脈沖;
原因:掃描速度設(shè)置得過快,信號(hào)在讀取時(shí),誤將濾光片或光源鏡的切換當(dāng)做信號(hào)讀取了;
檢查:改變掃描速度;
(3)紫外分光光度計(jì)做基線掃描或樣品掃描時(shí),基線或信號(hào)有一個(gè)長時(shí)間段的負(fù)值或滿屏大噪聲;
原因:濾光片飼服電機(jī)“失步”,造成檔位錯(cuò)位,國產(chǎn)電機(jī)尤甚;
檢查:重新開機(jī)有可能回復(fù),或打開單色器對(duì)照波長與濾光片的相對(duì)位置來檢查(注意:打開單色器時(shí)要保護(hù)檢測(cè)器不被強(qiáng)光刺激);
解決辦法:更換飼服電機(jī);
(4)紫外分光光度計(jì)樣品出峰位置不對(duì);
原因:波長傳動(dòng)機(jī)構(gòu)產(chǎn)生位移;
檢查:通過氘燈的656.1nm的特征譜線來判斷波長是否準(zhǔn)確;
解決辦法:對(duì)于高檔儀器而言處理手段相對(duì)簡(jiǎn)單,使用儀器固有的自動(dòng)校正功能即可;而對(duì)于相對(duì)簡(jiǎn)單的儀器,這種調(diào)整則需要專業(yè)人員來進(jìn)行了;
(5)紫外分光光度計(jì)信號(hào)的分辨率不夠,具體表現(xiàn)是:本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無法觀察到;
原因:狹縫設(shè)置過窄而掃描速度過快,造成檢測(cè)器響應(yīng)速度跟不上,從而失去應(yīng)測(cè)到的信號(hào);按常理,一定的狹縫寬度要對(duì)應(yīng)一定范圍的掃描速度;或者狹縫設(shè)置得過寬,使儀器的分辨率下降,將小峰融合在大峰里了。
檢查:放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄;
解決辦法:將掃描速度、狹縫寬窄、時(shí)間常數(shù)三者擬合成一個(gè)優(yōu)化的條件;
(6)當(dāng)紫外分光光度計(jì)波長固定在某個(gè)波長下時(shí),吸光值信號(hào)上下擺動(dòng),特別是測(cè)量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器;
原因:開關(guān)觸點(diǎn)因長期氧化所致造成接觸不良;
檢查:用手加重力量按琴鍵時(shí),吸光值隨之變化;
解決辦法:用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可;