?、傧冉油娫?，打開電源開關(guān)1，指示燈亮，打開比色皿暗箱蓋8，預(yù)熱20分鐘。
?、诓ㄩL選擇旋鈕6，選擇所需的單色光波長，用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。
?、鄯湃氡壬?，旋轉(zhuǎn)零位旋鈕5調(diào)零，將比色皿暗箱蓋合上，推進(jìn)比色皿拉桿3，使參比比色皿處于空白校正位置，使光電管見光，旋轉(zhuǎn)透光率調(diào)節(jié)旋鈕4，使微安表9指針準(zhǔn)確處于。按上述方法連續(xù)幾次調(diào)整零位和位，即可進(jìn)行測(cè)定工作(儀器面板見 圖5-6) 。
實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)使用和維護(hù)中應(yīng)注意事項(xiàng)：
?、龠B續(xù)使用儀器的時(shí)間不應(yīng)超過2小時(shí)，*好是間歇0.5小時(shí)后，再繼續(xù)使用。
?、诒壬竺看问褂猛戤吅?，要用去離子水洗凈并倒置晾干后，存放在比色皿盒內(nèi)。在日常使用中應(yīng)注意保護(hù)比色皿的透光面，使其不受損壞或產(chǎn)生劃痕，以免影響透光率。
?、蹆x器不能受潮。在日常使用中，應(yīng)經(jīng)常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部) 是否變色，如硅膠的顏色已變紅，應(yīng)立即取出烘干或更換。
④在托運(yùn)或移動(dòng)儀器時(shí)，應(yīng)注意小心輕放
三大注意事項(xiàng)
1.分光光度計(jì)應(yīng)放在干燥的房間內(nèi)，使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上，室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
2.分光光度計(jì)使用前，使用者應(yīng)該先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理，以及各個(gè)操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應(yīng)該對(duì)儀器的安全性能進(jìn)行檢查，電源接線應(yīng)牢固，通電也要良好，各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再按通電源開關(guān)。
3.分光光度計(jì)在儀器尚未接通電源時(shí)，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調(diào)節(jié)。
分光光度計(jì)作為一種精密儀器，在運(yùn)行工作過程中由于工作環(huán)境，操作方法等種種原因，其技術(shù)狀況必然會(huì)發(fā)生某些變化，可能影響設(shè)備的性能，甚至誘發(fā)設(shè)備故障及事故。因此，分析工作者必須了解分光光度計(jì)的基本原理和使用說明，并能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和排除這些隱患，對(duì)已產(chǎn)生的故障及時(shí)維修才能保證儀器設(shè)備的正常運(yùn)行。北京中兆國儀科技有限公司給大家分享維護(hù)和保養(yǎng)：
1)若大幅度改變測(cè)試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。
2)指針式儀器在未接通電源時(shí)，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
3)比色皿使用完畢后，請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5)1900型等分光光度計(jì)，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大，因而可以用于檢測(cè)微弱光電信號(hào)，而不能用來檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移，靈敏度下降。針對(duì)其上述特點(diǎn)，在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長時(shí)間暴露于光下，因此在預(yù)熱時(shí)，應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。
6)放大器靈敏度換擋后，必須重新調(diào)零。
7)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用，否則將使測(cè)試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測(cè)試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下；分別向被測(cè)的兩只杯子里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長處，石英比色杯；220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色杯：700nm處裝蒸餾水，將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%，測(cè)量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用，若超出此范圍應(yīng)考慮其對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。
紫外可見分光光度計(jì)對(duì)于我們來說熟悉卻也比較難讀懂理解的。
天天有人提起他的名字卻沒多少人知道他的工作原理。
下面我們來淺談一下。
光譜工作原理：
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。
由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同；
因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線；
可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息。可以用標(biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。
根據(jù)Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比；
如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。
即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測(cè)定紫外可見吸收光譜。
若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。
如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較。
這種方法要求儀器準(zhǔn)確，精密度高，且測(cè)定條件要相同。
實(shí)驗(yàn)證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同;
這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑。
紫外可見分光光度計(jì)的工作環(huán)境：
1）分光光度計(jì)安放在干燥的房間內(nèi)，使用溫度為5-35℃，相對(duì)濕度不超過85%
2）儀器應(yīng)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上，且避免強(qiáng)烈的震動(dòng)或持續(xù)的震動(dòng)
3）室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)，且應(yīng)避免直射日光的照射
4）電扇不宜直接向儀器吹風(fēng)，以防止光源燈因發(fā)光不穩(wěn)定而影響儀器的正常使用
5）盡量遠(yuǎn)離高強(qiáng)度的磁場(chǎng)、電場(chǎng)及發(fā)生高頻波的電氣設(shè)備
6）避免在有硫化氫等腐蝕性氣體的場(chǎng)所使用
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