可見分光光度計(又名可見光度計、分光光度計)是可見光分光光度法是采用新的單片機(jī)技術(shù),開發(fā)出能夠進(jìn)行定量測量(標(biāo)準(zhǔn)曲線測量,可對物質(zhì)進(jìn)行濃度直讀);OD值直接測量(吸光度、透過率和能量等直讀);動力學(xué)測試(測出物質(zhì)濃度隨時間變化OD值的變化);光譜掃描(可以對某一種物質(zhì)進(jìn)行全波段掃描,分析物質(zhì)的特征波長,判斷實驗過程的誤差);多波長測試(可以對物質(zhì)同時進(jìn)行多個波長的測試,分析物質(zhì)的相關(guān)特性);還有可以進(jìn)行DNA/蛋白質(zhì)測試、總磷總氮測試、重金屬測試、農(nóng)藥殘留測試、食品安全檢測、熱力發(fā)電金屬離子測試等等,廣泛應(yīng)用于食品、藥品、電力、生物研究、教學(xué)科研、化學(xué)化工、質(zhì)量監(jiān)督、水質(zhì)環(huán)保和商檢等各大領(lǐng)域。
1、開機(jī)前,檢查電源插座是否接上;
2、啟動電源開關(guān),儀器顯示"723C"
3、儀器經(jīng)自測后,按"MODE"鍵后再按"2"鍵,儀器顯示"DATA"
1、按"GO TO λ"鍵,輸入設(shè)定波長;
2、四個比色皿,其中R位置放置參比試樣,其余三個放入待測試樣。將比色皿放入樣品池內(nèi)的比色皿架中,蓋上樣品池蓋;
3、將參比試樣推入光路,按"ABS%"鍵,使儀器自動調(diào)零和置滿度;
4、然后將待測試樣推入光路,顯示試樣的吸光度值;
5、如果要想將待測試樣的數(shù)據(jù)打印出,只需按"START/STOP"鍵即可。
注意事項
1、每天使用結(jié)束后,應(yīng)仔細(xì)檢查樣品室內(nèi)是否有溶液溢出,若有溢出必須隨時用濾紙吸干;
2、儀器使用完畢,用防塵套罩住。
紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。
由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同;
因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團(tuán)的信息??梢杂脴?biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。
根據(jù)Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比,比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比;如果同時考慮吸收層厚度和溶液濃度對光吸收率的影響,即得朗伯-比耳定律。
即A=εbc,(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù),b為液池厚度,c為溶液濃度)就可以對溶液進(jìn)行定量分析。
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。
若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣,也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確,精密度高,且測定條件要相同。
實驗證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度,以確定選擇哪一種溶劑。
應(yīng)用:
在水和廢水監(jiān)測中的應(yīng)用,對于一個水系的監(jiān)測分析和綜合評價,一般包括水相(溶液本身)、固相(懸浮物、底質(zhì))、生物相(水生生物)。
在水質(zhì)的常規(guī)監(jiān)測中,紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復(fù)雜多變,待測物的濃度和干擾物的濃度差別很大,在具體分析時必須選擇好分析方法。
在農(nóng)產(chǎn)品和食品分析中可用于檢測的組分或成分有蛋白質(zhì)、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于檢測葉綠素、全氮和酶的活力等;
在飼料分析中可用于檢測煙酸、棉酚、磷化氫和甲酯等。
紫外分光光度計就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。
1、儀器使用一定周期后,內(nèi)部會積累一定量的塵埃,可以由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進(jìn)行除塵工作,同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固,對光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔,必要時對光路進(jìn)行校準(zhǔn),對機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤滑,最后,恢復(fù)原狀,再進(jìn)行一些必要的檢測、調(diào)校與記錄
2、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性,也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一.因此必須定期清潔,保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件,防塵
3、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素.他們可以引起機(jī)械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降;造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕
4、產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等,甚至儀器停止工作,從而影響儀器壽命.維護(hù)保養(yǎng)時應(yīng)定期加以校正,應(yīng)具備四季恒濕的儀器室,配置恒溫設(shè)備,特別是地處南方地區(qū)的實驗室.!