1、建議檢測前樣品和流動相進行過濾；
2、建議每天做完樣品后及時進行清洗；
3、常規(guī)檢測
測試完后，直接把色譜柱反向連接采用90%有機相沖洗45min，后保存在純甲醇或純乙腈中；
4、使用緩沖鹽條件：
1）等度條件：使用緩沖鹽之前和之后都用過渡流動相以1ml/min流速沖洗45min；
2）梯度條件：使用緩沖鹽之前與初始流動相組成相同的過渡流動相以1ml/min流速沖洗45min；
注意：過渡流動相是指有機相和水相比例與分析流動相相同比例，只是不含有緩沖鹽；
3）緩沖鹽沖洗干凈后，采用90%有機相反向沖洗60min，后保存在純有機溶劑中；
注意：如果使用緩沖液不能存留色譜柱中過夜；
色譜柱的保存
1. 短時間內(nèi)色譜柱的保存
如果使用時間間隔不超過四天，則色譜柱無需特別的維護，只需根據(jù)后一次測試使用的流動相或樣品的性質(zhì)，在使用后用純甲醇、純水或甲醇與水的混合溶液進行淋洗，直至基線走平約半小時即可。
2. 長時間色譜柱的保存
如色譜柱長時間不用，則將其從HPLC儀中取下保存，取下前用合適的溶劑淋洗，洗去不適與保存色譜柱的洗脫液，如C18反相柱可以用純甲醇或乙腈作為保存的介質(zhì)，然后用塑料塞頭將其塞緊，以免色譜柱內(nèi)完全干燥。
色譜柱的平衡和使用
反向色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在甲醇(或乙睛)/水中的。請一定確保您所使用的流動相和甲醇（或乙睛）/水互溶。由于色譜柱在運輸過程中可能會干掉，因此在用流動相分析樣品之前，應(yīng)使用10-20倍的體積的甲醇或乙睛平衡色譜柱：如果您所使用的流動相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意用含水量很高（約95%）的流動相過渡，樣品分析完后，沖洗柱子是亦然。過去傳統(tǒng)的方法使用純水沖洗，對于非極性柱，如C8或C18，由于純水不能浸潤填料表面而沖倒碳鏈，造成柱效下降。另外，分析樣品時，由于純水在填料表面不能浸潤形成水膜，出現(xiàn)樣品不保留而分不開，重現(xiàn)性差，所以對一般的C18和C8，有機溶劑不能低于5%。硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水或甲醇或乙睛的流動相，請在使用流動相之前用乙醇或異丙醇平衡。
平衡過程中，將流速緩慢地提高用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對試劑濃度如果較低，則需要較長的時間平衡）
色譜柱的再生
建議用來沖洗的溶劑體積
?
| ?色譜柱規(guī)格 | 柱體積? | 溶劑體積? |
| ?150*4.6 | 2.50ml? | 50ml |
| ?250*4.6 | ?5.0ml | 100ml |
| ?250*10 | ?20ml | 400ml? |
?
請根據(jù)下表選擇您的再生方法：
極性固定相（如Si,NH2,Diol色譜填料）的再生：正庚烷-氯仿-乙酸乙酯-丙酮-乙醇-水
非極性固定相（如反向填料C18,C8等）的再生：水-乙睛-氯仿（或異丙醇）-乙睛-水
0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱
色譜柱的維護：
? 1、使用保護柱
? 2、大多數(shù)柱的PH穩(wěn)定范圍是2-7.5，盡可能在此范圍內(nèi)使用
? 3、避免流動相組成及極性有劇烈變化
? 4、流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理
? 5、如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，要在實驗完畢將柱子沖洗干凈
? 6、壓力升高時更換保護柱
?
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色譜柱都有一定的壽命，它與所分析的樣品狀況和維護情況有直接關(guān)系。柱壽命完結(jié)的主要標(biāo)志是固定液流失太多而失去了分離能力，柱管堵塞或斷裂也是導(dǎo)致柱失效的原因。有時只是因為一些高沸點的極性化合物的吸附而使色譜柱喪失分離能力，這時可對其進行清洗和修理。
1、在高溫下老化柱子，用載氣將污染物沖洗出來；若柱性能仍不能恢復(fù)，就從儀器上卸下柱子，將柱頭截去10cm或更長(柱頭是最容易被污染的)，再安裝上測試。這是常用的柱性能恢復(fù)措施。
2、如果還不起作用，可再反復(fù)注射溶劑進行清洗，常用的溶劑依次為丙酮、甲苯、乙醇、氯仿和二氯甲烷。每次可進樣5-10μl，這一辦法常常能奏效。
3、如果色譜柱性能還不好，就只有卸下柱子，用二氯甲烷或氯仿沖洗?？捎贸檎婵盏霓k法將溶劑從另一端吸入，也可用對溶劑瓶加壓的方法將溶劑壓入。溶劑用量依柱子的污染程度而定，一般20ml左右。如果這一方法仍不起作用，說明色譜柱應(yīng)該報廢了。需要說明，只有固定液交聯(lián)的色譜柱才可用此法清洗，否則會將固定液全部洗掉。
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