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色譜柱的相關(guān)知識(shí)簡介 色譜柱常見問題解決方法

時(shí)間:2020-07-08    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  1.色譜柱的構(gòu)成
  
  色譜柱是實(shí)現(xiàn)分離的核心部件,要求柱效高、柱容量大和性能穩(wěn)定。柱性能與柱結(jié)構(gòu)、填料特性、填充質(zhì)量和使用條件有關(guān)。
  
  色譜填料:經(jīng)過制備處理后,用于填充色譜柱的物質(zhì)顆粒,通常是5-10粒徑的球形顆粒。
  
  色譜柱管:內(nèi)部拋光的不銹鋼管。典型的液相色譜分析柱尺寸是內(nèi)徑4.6mm,長250mm。
  
  色譜柱:也稱固定相,是將色譜填料填充到色譜柱管中所構(gòu)成的。
  
  2.色譜柱的填充
  
  干法填充:在硬臺(tái)面上鋪上軟墊,將空柱管上端打開垂直放在軟墊上,用漏斗每次灌入50-100mg填料,然后垂直臺(tái)面墩10-20次。
  
  濕法填充:又稱淤漿填充法,使用專門的填充裝置。
  
  3.填料的結(jié)構(gòu)
  
  色譜填料是由基質(zhì)和功能層兩部分構(gòu)成。
  
  基質(zhì):又常稱作載體或擔(dān)體,通常制備成數(shù)微米至數(shù)十微米粒徑的球形顆粒,它具有一定的剛性,能承受一定的壓力,對分離不起明顯的作用,只是作為功能基團(tuán)的載體。常用來作基質(zhì)的有硅膠和有機(jī)高分子聚合物微球。
  
  功能層:是通過化學(xué)或物理的方法固定在基質(zhì)表面的、對樣品分子的保留起實(shí)質(zhì)作用的有機(jī)分子或
  
  功能團(tuán)。硅膠基質(zhì)的冠醚大分子固定相的結(jié)構(gòu)示意圖,功能層冠醚分子吸附或鍵合在硅膠基質(zhì)的表面。
  
  填料的物理結(jié)構(gòu):分為微孔型(或凝膠型)、大孔型(全多孔型)、薄殼型和表面多孔型四種類型

固定相
等同產(chǎn)品
應(yīng)用
使用溫度
BP1AC1 100%二甲基聚硅氧烷OV-1,OV101,SE-30DB-1,HP-1,Rtx-1,Ultra-1SPB-1,CP-SiL5CB 常規(guī)使用,碳?xì)浠衔铮枷慊衔?,農(nóng)藥,酚類,除草劑,胺脂肪酸甲酯,GC/MS應(yīng)用 0.1μm-1.0μm-60℃-340℃/360℃>1.0μm,-60℃-280℃/300℃
BP5AC5 5%苯基95%二甲基聚硅氧烷SE-54,DB-5,Rtx-5,CP-Sil8CB,SPB-5,HP-5,Ultra-2,PTE-5 芳香化合物,農(nóng)藥,除草劑,濫用藥物,碳?xì)浠衔?/td> 0.1μm-1.0μm-60℃-340℃/360℃>1.0μm,-60℃-280℃/300℃
BP10AC10 14%氰丙苯基聚硅氧烷OV17,OV1701,DB-1701,Rtx-1701,SPB-1701,HP1701,CP-Sill9CB 農(nóng)藥,除草劑,藥物,環(huán)境樣品 0.25μm-1.0μm-20℃-280℃/300℃
BP20AC20 聚乙二醇DB-Wax,HP20M,StabilwaxSupelcowax-10,AT-WaxNakol,CP Wax52CB 醇類,游離酸,脂肪酸甲酯,芳香化合物,溶劑,香精油 0.25μm-1.0μm20℃-280℃/300℃>1.0μm,20℃-240℃/260℃
BP21 聚乙二醇(TPA處理)FFAP,DB-FFAP,HP-FFAP,Stabilax-DA,Cpwax-DA,Cpwax-58CB 揮發(fā)性游離酸,脂肪酸甲酯,醇,醛,丙烯酸酯,酮類 0.25μm-0.5μm20℃-240℃/260℃
BP225 50%氰丙苯基聚硅氧烷HP-225,DB-225,Rtx-225 脂肪酸甲酯,碳水化合物,中性固醇 0.25μm-0.5μm40℃-220℃/240℃
BPX608 DB-608,Rtx-35,SPB-608 有機(jī)氯農(nóng)藥/除草劑 0.4μm0℃-360℃/370℃
BP624 DB-624,Rtx-VolatilesVOCOL EPA方法624,飲用水中的揮發(fā)物鹵代烴,溶劑 1.2μm-1.3μm30℃-260℃/280℃
CYDEX-B Cyclodex-B,Rt-BDEXm 天然產(chǎn)物的對映異構(gòu)體 0.25μm-0.5μm0℃-230℃/240℃
HT5- 模擬蒸餾MXT-1,SimDist,DistCB HT-Sim模擬蒸餾 聚亞酰胺涂層柱0.5μm-20℃-380℃/400℃2.0μm,-20℃-370℃/380℃鍍鋁涂層柱0.75μm-0.15μm,-20℃-460℃/480℃
BP1-PONA PetrocolDH,DB-Petro1100 石油烴,汔油等組份,MTBE 0.5μm,-60℃-280℃/300℃
BP-Xylene 二甲苯異構(gòu)體拆分 -20℃-240℃/260℃
OV1701-MTBE MTBE分析 -10℃-120℃/140℃
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  通用型反相色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。但要留意: 液相色譜柱柱性能可能由于所使用的樣品、活動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是zui佳條件),只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。


  樣品的前處理:


  a、使用活動(dòng)相溶解樣品。


  b、使用予處理柱除往樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。


  c、使用0.45μm的過濾膜過濾除往微粒雜質(zhì)。


  通用型反相色譜柱的保養(yǎng)


  通用型反相色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為評價(jià)柱性能變化的參考。


  但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是zui佳條件),只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。在對色譜柱使用前進(jìn)行測試以后,要根據(jù)不同的情況對色譜柱進(jìn)行保養(yǎng):


  ①通用型反相色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相,實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。


  注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。


 ?、陂L期保存色譜柱:如色譜柱要長時(shí)間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲(chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲(chǔ)存于水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上。儲(chǔ)存的溫度是室溫。

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