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紫外分光光度計(jì)的選擇 光度計(jì)技術(shù)指標(biāo)

時(shí)間:2020-07-06    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】在選擇各種儀器時(shí),都有一定的標(biāo)準(zhǔn),如測(cè)量精度、或者測(cè)量范圍。而在選擇紫外分光光度計(jì)時(shí),我們考慮的是光學(xué)構(gòu)造、光譜范圍、樣品類型和分析工具。 光學(xué)構(gòu)造主



    在選擇各種儀器時(shí),都有一定的標(biāo)準(zhǔn),如測(cè)量精度、或者測(cè)量范圍。而在選擇紫外分光光度計(jì)時(shí),我們考慮的是光學(xué)構(gòu)造、光譜范圍、樣品類型和分析工具。


    光學(xué)構(gòu)造主要是指紫外分光光度計(jì)給出的光是單光束還是雙光束。


    單光束是通過單束光進(jìn)行測(cè)量,在測(cè)量過程中給定波長(zhǎng),然后通過被測(cè)物和對(duì)照物得到吸光結(jié)果。而雙光束是通過一個(gè)斬光輪將光束一分為二。


    光源包括紅外線、紫外線和可見光。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分(大約380 nm 到800 nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。


    分光光度計(jì)通常使用光電倍增管和光敏二極管來測(cè)量吸光值。


    在大部分的樣品類型中,分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。


    大部分單機(jī)型的分光光度計(jì)包含了驅(qū)動(dòng)儀器運(yùn)行和管理數(shù)據(jù)的軟件。


    高性能的儀器,通常與PC機(jī)一起聯(lián)用,需要從制造商提供額外的軟件。同時(shí)用戶也可以選擇升級(jí)軟件以滿足他們的需要。





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紫外可見分光光度計(jì)在生命科學(xué)中的應(yīng)用

  目前,紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用主要是在定量分析方面。先從生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用來介紹。紫外可見分光光度計(jì)在生命科學(xué)中應(yīng)用非常廣泛。最主要的是以下5個(gè)方面。

  1.蛋白質(zhì)分析工作中

  紫外可見分光光度計(jì)在蛋白質(zhì)的分析中,最主要的是作蛋白質(zhì)含量檢測(cè);一般是在蛋白質(zhì)的吸收峰上作吸光度測(cè)定。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)對(duì)紫外光的主要吸收波長(zhǎng)為280nm,所以,采用光度測(cè)量模式,將儀器的波長(zhǎng)GOTO到蛋白質(zhì)的最大吸收峰波長(zhǎng)280nm上,測(cè)試其吸光度大小,就可完成對(duì)蛋白質(zhì)的定量檢測(cè)。

  2.核酸分析工作中

  紫外可見分光光度計(jì)在核酸分析中的應(yīng)用,主要是用來對(duì)核酸的定量檢測(cè);因?yàn)楹怂岬奈辗逶?60nm。我們只要采用光度測(cè)量模式,將紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)GOTO到核酸的最大吸收峰260nm上,測(cè)試其吸光度大小就是了。

  3.氨基酸分析工作中

  紫外可見分光光度計(jì)在氨基酸分析中的應(yīng)用,主要是用來對(duì)氨基酸的定量檢測(cè)。因?yàn)榘被釋?duì)紫外光的主要吸收波長(zhǎng)為230nm,所以,我們只要采用光度測(cè)量模式,將紫外可見分光光度計(jì)儀器的波長(zhǎng)GOTO到氨基酸的最大吸收峰230nm上,就可測(cè)試其吸光度大小,從而計(jì)算出氨基酸的含量。但是,因?yàn)榘被岱治鰰r(shí),一般是將它溶解在水中,而水在230nm附近有很多干擾吸收線,所以,在用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)氨基酸分析檢測(cè)時(shí),要注意防止干擾的問題。此外,還需注意:只有少數(shù)氨基酸有紫外吸收,多數(shù)氨基酸無紫外吸收或很弱,測(cè)定時(shí)要衍生化后再測(cè)。

  4.糖類分析測(cè)試工作中

  紫外可見分光光度計(jì)在糖的分析中,主要是作定量檢測(cè)。因?yàn)樘菍?duì)紫外光的主要吸收波長(zhǎng)為218nm,所以,對(duì)糖類進(jìn)行分析時(shí),只要采用光度測(cè)量模式,將紫外可見分光光度計(jì)儀器的波長(zhǎng)GOTO到氨基酸的最大吸收峰218nm上,就可測(cè)試其吸光度大小,從而計(jì)算出糖的含量。

  5.多糖分析測(cè)試工作中

  紫外可見分光光度計(jì)在多糖的分析中,主要也是作定量檢測(cè)。因?yàn)槎嗵菍?duì)紫外光的主要吸收波長(zhǎng)為206nm,所以,我們只要采用光度測(cè)量模式,將紫外可見分光光度計(jì)儀器的波長(zhǎng)GOTO到多糖的最大吸收峰206nm上,就可測(cè)試其吸光度大小,從而計(jì)算出多糖的含量。

  但是多糖的分析難度很大。因?yàn)?在206nm處的時(shí)候,光源(氘燈)的能量已經(jīng)很弱,儀器光學(xué)系統(tǒng)的能量輸出也很低,光電倍增管的靈敏度也很低,206nm左右的干擾也很大。所以,用紫外可見分光光度計(jì)作多糖的分析是很難的事,目前許多科學(xué)家正在研究中。

標(biāo)簽: 紫外可見分光光度計(jì)
紫外可見分光光度計(jì) 紫外可見分光光度計(jì)在生命科學(xué)中的應(yīng)用_紫外可見分光光度計(jì)
  【中國(guó)儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】火焰光度計(jì)是以發(fā)射光譜為基本原理的一種分析儀器,主要用于水泥、玻璃、陶瓷、耐火材料等建材的測(cè)試;肥料、土壤的測(cè)試;礦山、石油、冶金、化工產(chǎn)品的測(cè)試;科研、衛(wèi)生、教學(xué)等領(lǐng)域各類實(shí)驗(yàn)的測(cè)試等。
 
  它利用火焰本身提供的熱能,激發(fā)堿土金屬中的部分原子,使這些原子吸收能量后躍遷至上一個(gè)能量級(jí),當(dāng)它回到正常能量級(jí)時(shí),就要釋放能量,這個(gè)釋放的能量具有光譜特征,即在一定的波長(zhǎng)范圍。例如,將食鹽置于火中,火焰呈黃色,就是因?yàn)殁c原子在火焰回落到正常能量級(jí)時(shí)釋放的能量的光譜是黃色的。人們常稱此為焰色反應(yīng)。不同堿金屬或堿土金屬在火焰中的顏色不同的,配上不同的濾光片,就可以進(jìn)行定性測(cè)試。而焰色的強(qiáng)度又正比于溶液中所含原子的溶度,這就構(gòu)成了定量測(cè)試的基礎(chǔ)。這個(gè)方法通常稱為火焰光度法,這類儀器通常稱為火焰光度計(jì)。
 
  火焰光度計(jì)由光學(xué)與電子線路組成測(cè)量裝置。光學(xué)部分由保護(hù)玻璃和干涉濾光片組成。保護(hù)玻璃可防止煙囪對(duì)于干涉濾光片沾污和火焰熱量的燒灼,延長(zhǎng)干涉濾光片的壽命。測(cè)試不同的金屬原子,應(yīng)選用其對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)。本文以實(shí)驗(yàn)室常用的 火焰光度計(jì)為例,就火焰光度計(jì)在使用過程中出現(xiàn)的常見故障進(jìn)行分析并提出相應(yīng)的故障處理辦法及預(yù)防措施。
 
  1、火焰光度計(jì)在使用過程中常見的故障
 
  常見的故障有:無放電、有放電聲無火花、燃燒室有液化氣味點(diǎn)不著火、燃燒室無液化氣味、火焰不穩(wěn)、空氣壓力不能調(diào)節(jié)、不進(jìn)樣、顯示屏不亮等。
 
  (1)儀器使用時(shí),壓力表指示應(yīng)在 0.12-0.15mpa 之間,準(zhǔn)備就緒后輕按點(diǎn)火按鈕,聽不到放電聲,觀察玻璃窗,沒有火花,不放電。處理方法:打開儀器上蓋,檢查電源電路板,輸出至點(diǎn)火器是否有 5V 電壓。若無,需檢查主控電源電路板上變壓器輸出,多見于此故障,更換變壓器即可;若有 5V 電壓,則需檢查脈沖發(fā)生器是否損壞,更換即可解決此故障。
 
  (2)在點(diǎn)火過程中,可聽到“噠噠噠”聲,觀察玻璃窗,沒有火花。處理方法:點(diǎn)火時(shí)有放電聲無火花,大多是放電回路故障。拆下玻璃防風(fēng)罩,檢查點(diǎn)火觸頭與燃燒頭的距離,并清洗燃燒頭,在不通燃?xì)獾那闆r下點(diǎn)火,看是否有電?。蝗鐩]有,需檢查接地線,并檢查點(diǎn)火線是否斷路。排除以上故障后,如點(diǎn)火仍沒有火花,只能更換點(diǎn)火器排除故障。
 
  (3)儀器開機(jī),空壓機(jī)工作正常,壓力表指示正常,打開燃?xì)忾y及進(jìn)樣開關(guān),可以聞到液化氣味,按下點(diǎn)火開關(guān),點(diǎn)不著火。處理方法:首先考慮燃?xì)庹{(diào)節(jié)是否合適,燃?xì)庹{(diào)節(jié)閥有小至大順時(shí)針旋轉(zhuǎn),一般在旋轉(zhuǎn)2 至 3 圈左右位置即可。燃?xì)鉂舛冗^低或過高都可能導(dǎo)致打不著火。調(diào)節(jié)后如果還點(diǎn)不著,則須立即關(guān)閉進(jìn)樣閥及燃?xì)忾y,拆下燃燒池的玻璃防風(fēng)罩,調(diào)整點(diǎn)火頭與燃燒頭的位置,即可排除此故障。
 
  (4)儀器開機(jī),空壓機(jī)工作正常,壓力表指示正常,打開燃?xì)忾y及進(jìn)樣開關(guān),聞不到液化氣味,按下點(diǎn)火開關(guān),點(diǎn)不著火。處理方法:此故障表明無液化氣送到燃燒頭,需檢查液化氣氣路。從液化氣罐開始,一次檢查減壓閥、燃?xì)忾y、霧化器、燃燒頭,常見燃燒頭阻塞,需要進(jìn)行清洗工作。
 
  (5)儀器通電后,開機(jī)、打開進(jìn)樣開關(guān)及燃?xì)忾_關(guān),點(diǎn)火后有火焰,但是火焰不穩(wěn)。處理方法:點(diǎn)火后火焰不穩(wěn),一般情況先調(diào)節(jié)燃?xì)忾y大小,通過觀察窗觀察,火焰高度好控制在 2-3cm,在進(jìn)空氣樣時(shí)火焰應(yīng)為藍(lán)色。如通過調(diào)節(jié)燃?xì)忾y仍不能控制火焰,則需考慮燃?xì)忾y中電磁閥沒打開,試著通過調(diào)節(jié)熱電偶靠近火苗,觀察火焰變化情況,如不行,考慮熱電偶是否損壞,更換后應(yīng)該能排除此故障。
 
  (6)儀器運(yùn)行過程中,空氣壓力應(yīng)該穩(wěn)定,一旦壓力不穩(wěn),會(huì)造成進(jìn)樣環(huán)節(jié)、霧化過程、燃燒火焰等影響,從而影響測(cè)定結(jié)果。處理方法:順著空壓機(jī)氣路一路排查,重點(diǎn)檢查空氣過濾器,是否有漏氣及堵塞。如果損壞須及時(shí)更換,排除故障。
 
  (7)儀器開機(jī)正常,點(diǎn)火也正常,壓力指示也正常,但是不進(jìn)樣。處理方法:進(jìn)樣針不進(jìn)樣,首先要檢查進(jìn)樣毛細(xì)管是否堵塞,疏通或更換。其次需要排除霧化器是否存在故障。霧化器霧化效果的好壞直接關(guān)系到測(cè)量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度??梢栽俅蜷_空壓機(jī)并關(guān)閉燃?xì)鈿饴返那闆r下,將霧化器拆下進(jìn)行調(diào)節(jié),通過調(diào)節(jié)噴氣發(fā)射件和進(jìn)樣管的位置,可以觀察進(jìn)樣時(shí)霧化效果。通過經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為進(jìn)樣管應(yīng)在噴氣嘴底部偏上 1/3 處左右慢慢調(diào)節(jié),后得到較好的霧化效果。
 
  2、火焰光度計(jì)使用時(shí)的注意事項(xiàng)
 
  (1)燃?xì)夂椭伎諝獗仨毷歉稍锏?,純凈而沒有污染的,不要在濕度很高、粉塵很多的環(huán)境中使用儀器。
 
  (2)儀器與鋼瓶周圍不能擺放易燃易爆物品。實(shí)驗(yàn)環(huán)境必須通風(fēng)良好,有條件的地方可設(shè)置強(qiáng)排風(fēng)裝置或在通風(fēng)櫥中操作儀器。
 
  (3)必須使用穩(wěn)定的 220V 的電源電壓,工作環(huán)境附近不能有功率較大、頻繁啟動(dòng)的電氣設(shè)備。接地線必須可靠接地,不能用零線代替接地線。
 
  (4)操作過程中,燃燒室與煙囪罩都是非常燙,不能將身體靠近或用手接觸。
 
  (5)從廢液杯流出的廢液要集中收集,不要隨意處置,適當(dāng)處理。
 
  (6)定期保養(yǎng),保持霧化室、燃燒頭的清潔。如果是測(cè)試高鹽樣品,測(cè)試完畢后,進(jìn)樣毛細(xì)管放在蒸餾水燃燒時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)。
 
  (7)在測(cè)試一些表面張力較大的樣品,需要加入適量的表面活性劑,同時(shí)注意在樣品、標(biāo)準(zhǔn)溶液和空白中都要加相同的量。
 
  (8)標(biāo)準(zhǔn)溶液必須配制,長(zhǎng)期保存要注意保存條件,并要加入適當(dāng)?shù)囊志鷦H魏螛悠凡荒軆?chǔ)存在鈉玻璃的器皿中。
 
  (9)樣品中不能含有顆粒狀物質(zhì),要過濾后才能測(cè)試,操作時(shí)經(jīng)常注意液面高度,進(jìn)樣時(shí)只吸取上層溶液。
 
  3、火焰光度計(jì)使用過程中的保養(yǎng)維護(hù)
 
  (1)壓縮機(jī)工作 100 小時(shí)左右,應(yīng)切斷電源擰下接頭倒出貯氣罐里的積水。環(huán)境潮濕時(shí)間適當(dāng)縮短。
 
  (2)在有壓力的狀態(tài)下,把過濾器下端頂針向上推,積水就會(huì)排出,好下面放抺布把水放在抺布上。排盡后手放掉,即復(fù)位。
 
  (3)每次測(cè)試完,應(yīng)有3~ 5 分鐘左右時(shí)間蒸餾水清洗。即進(jìn)樣毛細(xì)管放在蒸餾水中同正常工作一樣燃燒3~ 5 分鐘,循環(huán)清洗霧化室和燃燒頭。


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