問題1:在使用過程中,出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零,同時伴有圖線記錄基線位置偏高。
可能原因:
①光電倍增等老化,性能降低;
②信號處理板可能發(fā)生故障;
③前置放大版出現(xiàn)故障,引起反饋量增大。
解決辦法:
①開機通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對照,找出異同點,并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規(guī)格的新光電倍增管替換機上的光電管,再開機實驗,結(jié)果記錄出來的圖線并沒有什么變化,由此證明光電倍增管沒有老化變質(zhì)。
②進一步檢查信號處理板,未發(fā)現(xiàn)信號處理板各元器件損壞,對影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測,結(jié)果測得數(shù)據(jù)正常,這說明信號處理板沒有故障。
③由于對以上分析,故障發(fā)生在前置級放大板可能性很大。應(yīng)采用模擬測試對前置放大板進行測量,先利用直流穩(wěn)壓電源,把各供電電源加上,使其電路單獨工作,用信號發(fā)生器發(fā)出的信號加到輸入端。再用示波器接在輸出端測量輸出信號,將輸入信號與輸出信號對比,結(jié)果波形相同,說明電路沒有故障。用相同方法對一個帶驅(qū)動器的開關(guān)管測量,輸入端加入信號后,用示波器未能測出輸出端信號,判斷開關(guān)管壞,換上同一型號規(guī)格的開關(guān)管,恢復(fù)正常。
問題2:儀器掃描樣品時,顯示一條直線。
可能原因:軟件出現(xiàn)故障。
解決辦法:退出操作系統(tǒng),重新啟動計算機,再次掃描。
問題3:紫外/可見分光光度計接通電源后,光源不亮。
可能原因:
①光源燈泡已損壞;
②保險管燒壞。
解決辦法:更換氘燈或鎢燈;更換保險管。
問題4:儀器噪音比較大
可能原因:光源燈泡使用時間超過壽命期。
解決辦法:更換光源燈泡。
問題5:基線的某一段噪音特別高。
可能原因:波長段相應(yīng)的濾光片受潮發(fā)霉,嚴(yán)重?fù)p失光的能量。
排除方法:更換相應(yīng)的濾光片。
問題6:儀器自檢時提示通訊錯誤。
可能原因:儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒有連接好。
解決辦法:連接好數(shù)據(jù)線,重新打開儀器和軟件,重新自檢。
問題7:自檢時提示波長自檢出錯。
可能原因:自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。
解決辦法:關(guān)上儀器樣品室蓋子,重新自檢。
問題8:測試過程中提示能量太低。
可能原因:
? ①光源燈泡使用時間超過壽命期;
? ②樣池中有不透光的東西擋住了光。
解決辦法:更換光源燈泡;拿走擋光的物品
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紫外分光光度計一般都隨機附有一只塑料布罩,不使用時用其罩住整個儀器,這是很好的防塵手段。但發(fā)現(xiàn)很多實驗室里不用附來塑料布罩,而是自己用一塊普通布或做成布罩來覆蓋儀器,防塵效果不如塑料布罩理想。另外,在塑料布罩只放入數(shù)袋防潮硅膠,也能更好起到延長防潮的功效。在防潮時,如果紫外分光光度計設(shè)有防潮干燥筒的,應(yīng)經(jīng)常檢查,發(fā)現(xiàn)變色立即更換新的或加以烘干再用?! ¢L期停用的紫外分光光度計,要定期開機除潮,如每隔一個月通電預(yù)熱半小時,以保持整機呈干燥狀態(tài),并且維持電子元件的性能?! ∽贤夥止夤舛扔媽θ芤哼M行測定時,首先需要選擇合適的測量波長。選擇的依據(jù)是該被測溶液的吸收曲線。在一般情況下,我們總是選擇最大吸收波長作為測量波長,這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下最大吸收峰很尖銳、吸收過大或附近有干擾存在,就不能選最大吸收波長,而必須在保證有一定靈敏度的情況下,選擇吸收曲線中的其它波長進行測定(曲線較平坦處對應(yīng)的波長),以消除干擾。繪制吸收曲線是正確選擇波長的有效手段和方法。 吸光度范圍: 試樣在不同吸光度時,濃度的相對誤差不同,一般選擇0.2一0.8之間,濃度相對誤差較小,可以通過改變吸收池厚度、檢測波長或待測溶液濃度,使吸光度讀數(shù)在適宜范圍內(nèi)?! —M縫寬度: 狹縫寬度不僅影響光譜的純度,也影響吸光度值,在定量分析時,為了得到足夠的測量信號,應(yīng)采用較大狹縫。在定性分析時,為了提高分辨率,應(yīng)采用較小狹縫,以獲得精細(xì)的光譜結(jié)構(gòu)。
在紫外分光光度計的測試指標(biāo)中準(zhǔn)確度是至關(guān)重要的,只有保證了準(zhǔn)確度才能保證樣品數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和真實性。
影響紫外可見分光光度計準(zhǔn)確度的因素有:
(1)波長準(zhǔn)確度。波長準(zhǔn)確度在確保紫外可見分光光度計的準(zhǔn)確度中起著十分重要的作用。因為測試樣品物質(zhì)不同,那么它對不同波長的光有著不同的摩爾吸光系數(shù)。由朗伯比爾定律可知,不同的摩爾吸光系數(shù)所對應(yīng)的吸光度會有差異,由此就會產(chǎn)生不一致的分析誤差。
?。?)雜散光。雜散光是準(zhǔn)確度分析誤差的一個重要來源,直接影響著樣品物質(zhì)在測試時所能配制的最大濃度。有研究結(jié)果表明,越高濃度的測試樣品雜散光的影響越大,如果是在一個比較大的濃度下,雜散光增強,吸光度和濃度成比例的范圍縮小。
?。?)噪聲。影響紫外可見分光光度計光度準(zhǔn)確度的噪聲包括光噪聲和電噪聲。其中光噪聲是由光源產(chǎn)生的,具體來說就是光源的發(fā)光強度分布因子導(dǎo)致光噪聲的出現(xiàn)。電噪聲的來源是光電倍增管、各種電源以及放大器等。作為紫外可見分光光度計光度準(zhǔn)確度最關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù)之一,噪聲是分析測試中主要誤差源頭,它是影響紫外可見分光光度計光度準(zhǔn)確度檢測下限的因素。
?。?)基線平直度?;€平直度是全波段內(nèi)每個波長上的噪聲體現(xiàn),基線平直度直接影響紫外可見分光光度計光度準(zhǔn)確度的靈敏度以及影響檢測下限或使用范圍,是紫外可見分光光度計中一個十分重要的技術(shù)參數(shù)。購買者和使用者在選購和使用紫外可見分光光度計的時候,對基線平直度會有這特別的重視程度,會作為選購和使用的重要技術(shù)指標(biāo)。但是相對于其他影響紫外可見分光光度計光度準(zhǔn)確度的因素來說,基線平直度是受到目前國內(nèi)外研究工作者重視程度遠遠不夠的技術(shù)指標(biāo)。
?。?)光譜帶寬。光譜帶寬是影響紫外可見分光光度計光度準(zhǔn)確度的一個十分重要的因素。當(dāng)光譜帶寬不同時,測試得到的數(shù)據(jù)就會不同,因而不同光譜帶寬下的分析誤差也大相徑庭。
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