一、開機
開機前將樣品室內的干燥劑取出，確認電源是否連接。打開儀器電源開關，等待儀器自檢通過，自檢過程中禁止打開樣品室。
二、使用
儀器自檢結束后(7個自檢項目均出現(xiàn)OK字樣)，按[MAINMENU]鍵(主菜單)，屏幕顯示如下5個功能項：
1、Phtometry(定量運算);
2、WavelengthScan(波長掃描模式);
3、TimeScan(時間曲線掃描);
4、System(系統(tǒng)校正);5、Datadisplay(光度直接測量模式)。按相應選項前的數(shù)字鍵，即可進入該選項的下一級子菜單。
1、Phtometry(定量運算)
1)按[MAINMENU]鍵，再按數(shù)字[1]鍵進入Phtometry子菜單下，選中對應的數(shù)字來選擇所需的測定方式：
①%T/ABS(透過率/吸光度測定模式);
②Ratio(比例測定模式);
③Concentration(濃度測定模式或標準曲線模式);
2)按數(shù)字[1]鍵進入%T/ABS(透過率/吸光度測定)子菜單，選中對應的數(shù)字鍵來設定測定條件：①NUMWL(設定測試波長的數(shù)目，較多可設定6個不同波長);
②WLSetting(設定測試波長具體數(shù)值)③DataMode(選擇測定吸光度或透光率)，設定完畢后點擊[Enter]鍵確定，所有項目設定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定，等待儀器調整至準備狀態(tài)，此時屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO，將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中，按[Start/Stop]鍵進行零點的自動調整，自動調零完成后，將樣品置于光路中，再按[Start/Stop]鍵進行測量，儀器的顯示屏自動給出對應波長的數(shù)值。
3)按數(shù)字[3]鍵進入③Concentration(濃度測定模式或標準曲線模式)，選中對應的數(shù)字來設定條件(波長數(shù)目，波長數(shù)值，標準溶液數(shù)目及濃度)，設定完畢后點擊[Enter]鍵確定，所有項目設定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定，等待儀器調整至準備狀態(tài)，此時屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO，將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中，按[Start/Stop]鍵進行零點的自動調整，自動調零完成后，將標準溶液置于光路中，按照濃度從低到高順序依次按[Start/Stop]鍵進行測量，測量完畢后儀器將自動給出標準曲線，標準曲線下方有三項供選擇：①Process(更改標準曲線的坐標和觀察濃度回歸曲線的數(shù)據);②Measure(直接進入樣品的測量);③Print(打印濃度回歸曲線譜圖和數(shù)據)，選中對應的數(shù)字就可執(zhí)行相應的功能。
4)如果希望返回上一級菜單，按[CLEARRETURN]鍵返回，返回主菜單直接按[MAINMENU]鍵。
2、WavelengthScan(波長掃描模式)
1)參數(shù)修改：按[MAINMENU]鍵，再按數(shù)字[2]鍵進入②WavelengthScan(波長掃描模式)子菜單下，選中對應的數(shù)字來選擇所需修改的內容，修改掃描的起始波長，測量模式，圖譜坐標的上下限，掃描速度等等。修改完畢按數(shù)字[0]鍵確定。
2)波長掃描：分別將兩個比色皿裝上空白溶液和樣品溶液，放入比色槽中，按[Start/Stop]鍵進行譜圖掃描(如想終止掃描再次按按[Start/Stop]鍵)，待儀器自動進行基線校正，提示拉入樣品自動測試，測試完畢后有掃描圖譜出現(xiàn)，下方有相應的數(shù)據處理選項①Process②Baseline③Print;
3)數(shù)據處理：按數(shù)字[1]鍵進入①Process(數(shù)據處理)，可以讀峰谷值，修改坐標，顯示所有數(shù)據，求一階倒數(shù)等等功能。
3、TimeScan(時間曲線掃描)
同上(二)操作。
4、System(系統(tǒng)校正)
一般不做。
5、Datadisplay(光度直接測量模式)
同上(二)操作。
三、關機
將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈;關電源將干燥劑放入樣品室內，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理人員認可方可離開。
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除了核酸濃度，分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度，如A260/A280的比值，用于評估樣品的純度，因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。A320檢測溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品，A320一般是0。
蛋白質的直接定量(UV法)
這種方法是在280nm波長，直接測試蛋白。選擇Warburg公式，光度計可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應的換算方法，將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單，先測試空白液，然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質，一般要消除320nm的“背景”信息，設定此功能“開”。與測試核酸類似，要求A280的吸光值至少大于0.1A，較佳的線性范圍在1.0-1.5之間。實驗中選擇Warburg公式顯示樣品濃度時，發(fā)現(xiàn)讀數(shù)“漂移”。這是一個正常的現(xiàn)象。事實上，只要觀察A280的吸光值的變化范圍不超過1%，表明結果非常穩(wěn)定。漂移的原因是因為Warburg公式吸光值換算成濃度，乘以一定的系數(shù)，只要吸光值有少許改變，濃度就會被放大，從而顯得結果很不穩(wěn)定。蛋白質直接定量方法，適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質。紫外直接定量法相對于比色法來說，速度快，操作簡單;但是容易受到平行物質的干擾，如DNA的干擾;另外敏感度低，要求蛋白的濃度較高。
比色法蛋白質定量
蛋白質通常是多種蛋白質的混合物，比色法測定的基礎是蛋白質構成成分：氨基酸(如酪氨酸，絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應，產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數(shù)目直接相關，從而反應蛋白質濃度。
原子吸收分光光度計將在上述領域的科研、生產工作中起到人們意想不到的巨大作用。但是，要用好原子吸收分光 光度計并不是一件容易的事。
主要是因為影響原子吸收分光光度計分析誤差的因素太多。本文將根據筆者的使用實踐，并結合有關文獻，從zui常用的火焰法和石墨爐法兩個方面來討論影響原子吸收分光光度計分析誤差的主要因素和如何用好原子吸收分光光度計等問題。
火焰法
影響火焰法原子吸收分光光度計分析誤差的主要因素，歸納起來大約有36個以上：
1、火焰高度;2、吸收線(靈敏線和次靈敏線);3、火焰溫度;4、火焰穩(wěn)定性;5、燃氣和助燃氣的質量;6、助燃比;7、霧化率;8、氣體流量大小;9、氣體流量穩(wěn)定性;10、試樣的吸噴量;11、原子化效率;12、扣背景方式;13、扣背景水平;14、光源強度;15、光源的熱穩(wěn)定性;16、光源的電源穩(wěn)定性;17、燈電流大小;
18、邊緣能量;19、波長范圍;20、波長準確度;21、波長重復性;22、雜散光;23、透鏡的色差;24、透鏡的透過率;25、光柵的閃耀波長;26、光柵的反射率;27、單色器中反射鏡的反射率;28、光譜帶寬(sbw);29、光電倍增管(pmt);30、pmt高壓;31、放大器的噪聲;32、放大器的漂移;33、數(shù)據處理方法(計算方法);34、環(huán)境(電、磁場)干擾;35、環(huán)境溫度;36、整機供電電源等。
石墨爐法
影響石墨爐法原子吸收分光光度計分析誤差的主要因素，歸納起來大約有49個以上：
1、光源強度;2、吸收線(靈敏線和次靈敏線);3、光源燈泡穩(wěn)定性(熱穩(wěn)定性);4、光源電流穩(wěn)定性(紋波、漂移等);5、石墨管結構(平臺、普通);6、石墨管加熱方式(縱向、橫向);7、石墨管溫度穩(wěn)定性;8、原子化效率;9、扣背景方式(氘燈、自吸、塞曼);10、扣背景能力;11、升溫速度;12、加溫方式;13、干燥溫度;14、干燥時間;15、灰化溫度;16、灰化時間;17、原子化溫度;18、原子化溫度保持時間;
19、清洗溫度;20、清洗時間;21、邊緣能量;22、波長范圍;23、波長準確度;24、波長重復性;25、雜散光大小;26、透鏡的色差;27、透鏡的透過率;28、光柵的閃耀波長;29、光柵的反射率;30、單色器中反射鏡的反射率;31、sbw;32、pmt(id;gan);33、pmt高壓(i0;sd;sr);34、放大器增益;35、放大器漂移;36、電子學系統(tǒng)的噪聲;
37、數(shù)據處理(計算方法);38、進樣技術(手動);39、環(huán)境中電、磁場干擾;40、環(huán)境溫度;41、環(huán)境中振動源干擾;42、供電電源(電流;電壓);43、保護氣種類;44、保護氣質量;45、保護氣流速;46、內氣和外氣比例的選擇;47、計算公式(非線性擬合方程);48、標準溶液是否標準(制備方法、濃度大小);49、空白溶液的選擇(火焰時，空白溶液不能為0，否則不穩(wěn);測量rsd時，一般空白溶液為0.5%的硝酸)等。
以上49個因素中，只要有一個不好，就不可能得到好的分析結果，就將嚴重影響分析測試結果的可靠性。這些因素都是研制者(或生產者)如何保證石墨爐原子吸收分光光度計質量、使用者如何選擇和用好石墨爐原子吸收分光光度計時應高度重視的問題。
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