實驗室分光光度計是利用分光光度法,通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進行定性和定量分析。
不同種類的分光光度計的基本原理相似,都是利用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,通過測量樣品的吸光值,經(jīng)過計算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
實驗室分光光度計的使用方法
①首先接通電源,打開電源開關1,指示燈亮,打開比色皿暗箱蓋8,預熱20分鐘。
②波長選擇旋鈕6,選擇所需的單色光波長,用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。
③放入比色皿,旋轉(zhuǎn)零位旋鈕5調(diào)零,將比色皿暗箱蓋合上,推進比色皿拉桿3,使參比比色皿處于空白校正位置,使光電管見光,旋轉(zhuǎn)透光率調(diào)節(jié)旋鈕4,使微安表9指針準確處于100%。按上述方法連續(xù)幾次調(diào)整零位和100%位,即可進行測定工作。
實驗室分光光度計使用和維護中應注意事項:
①連續(xù)使用儀器的時間不應超過2小時,*好是間歇0.5小時后,再繼續(xù)使用。
②比色皿每次使用完畢后,要用去離子水洗凈并倒置晾干后,存放在比色皿盒內(nèi)。在日常使用中應注意保護比色皿的透光面,使其不受損壞或產(chǎn)生劃痕,以免影響透光率。
③儀器不能受潮。在日常使用中,應經(jīng)常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部)是否變色,如硅膠的顏色已變紅,應立即取出烘干或更換。
④在托運或移動儀器時,應注意小心輕放。
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以下優(yōu)點使得原子熒光光度計在冶金、地質(zhì)、石油、農(nóng)行、地球化學、材料科學、環(huán)境科學、高純物質(zhì)、水質(zhì)監(jiān)控、生物制品和醫(yī)學分析等各個領域內(nèi)獲得了相當廣泛的應用。
原子熒光光度計有哪些優(yōu)點?
熒光類型
a)共振熒光----原子吸收的逆過程, 吸收的能量和釋放的能量相等。E=hv=hc/λ
b)非共振熒光----能量不相等,非共振熒光線
熒光猝滅,使用氬氣做載氣和屏蔽氣,氬氣作用:
a)載氣(內(nèi)氣:包括產(chǎn)生的氫化物蒸汽、氫氣)
b)屏蔽氣(防止氫化物被氧化、抑制熒光猝滅、穩(wěn)定原子化環(huán)境)
優(yōu)點
非色散系統(tǒng)、光程短、能量損失少
結構簡單,故障率低
靈敏度高,檢出限低,與激發(fā)光源強度成正比
接收多條熒光譜線
適合于多元素分析
采用日盲管檢測器,降低火焰噪聲
線性范圍寬,3個量級
原子化效率高,理論上可達到100%
沒有基體干擾
可做價態(tài)分析
只使用氬氣,運行成本低
采用氬氫焰,紫外透射強,背景干擾小
原子熒光光度計工作原理
將樣品溶液中的待分析元素還原為揮發(fā)性共價氣態(tài)氫化物(或原子蒸汽),然后借助載氣將其導入原子化器,在氬-氫火焰中原子化而形成基態(tài)原子。
基態(tài)原子吸收光源的能量而變成激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)原子在去活化過程中將吸收的能量以熒光的形式釋放出來,此熒光信號的強弱與樣品中待測元素的含量成線性關系,因此通過測量熒光強度就可以確定樣品中被測元素的含量。
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紅外光譜儀一般都有記錄儀自動記錄譜圖。新型的儀器還配有微處理機,以控制儀器的操作、譜圖中各種參數(shù)、譜圖的檢索等?! 〖t外分光光度計在有機分析方面的應用 1、化合物中各原子團組合排列情況,是同紅外光譜中出現(xiàn)的特征官能團來確定的?! ?)溴化四氯化對位甲酚的結構,過去實驗認為它有三種可能的結構,但未能鑒別確定,現(xiàn)經(jīng)過紅外光譜證實只有一種結構。 2)二分子醛縮合醇酮,應為(I)式。若(I)式R換成吡啶基,則化學性質(zhì)和(I)卻不相同了,它具有烯二醇式的反應如(II)式??墒窃跇O烯的溶液中,也看不到自由羥基的3700cm(-1)-譜帶,卻在2750cm(-1)有締全氫鍵出現(xiàn)??芍研纬闪朔肿觾?nèi)氫鍵。(I)羥酮式(II)烯二醇式 2、異構體的測定——可鑒定立體異構體和同分異構體 1)順反異體的測定——順反異構體原子團排列順序因無對稱中心,故C=C雙鍵在1630cm(-1),724cm(-1),而反式的C=C在較高頻率?! ?)同分異構體的鑒定——紅外光譜900~660cm(-1)區(qū)內(nèi)可看到苯環(huán)取代位置不同的同分體。 如二甲苯三個異構體的吸收譜帶很不相同。鄰位在742cm(-1),間位在770cm(-1),對位在800cm(-1),且因?qū)Χ妆綄ΨQ性強,它的C=C雙鍵(苯骨架)在1500cm(-1)變小,并且600cm(-1)譜帶消失?! ∮秩缯?、異丙基、叔丁基由紅外光譜中的甲基彎曲振動可以看出。在1375cm(-1)只出現(xiàn)一個吸收帶,則表示為正丙基;若在1375cm(-1)出現(xiàn)相等強度的雙峰,則為異丙基;若在`1390cm(-1)及1365cm(-1)出現(xiàn)一強一弱譜帶,則為叔丁基?! ∫掖己图酌训姆肿邮酵耆嗤珻2H6O,乙醇有羥基吸收帶在3500cm(-1),C-0伸縮振動在1050~1250cm(-1),羥基彎曲振動在950cm(-1)。甲醚在3500cm(-1)無羥基吸收。它的第一強1150~1250cm(-1),這兩個同分異構體很容易區(qū)別?! ?、化學反應的檢查——一個化學反應是否已進行完全,可用紅外光譜檢查,這是因原料和預期的產(chǎn)品都有其特征吸收帶。例如氧化仲醇為酮時,原料仲醇的羥基吸收應消失,酮的羰基171cm(-1)應在產(chǎn)物中出現(xiàn)才反應進行完全?! ?、未知物剖析——可先將未知物分離提純,作元素分析,寫出分子式,計算不飽和度。從紅外光譜可得到此未知物主要官能團的信息,確定它是屬于哪種化合物。結合紫外、核磁等可鑒定此化合物的結構。
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