紫外可見分光光度計(jì)來自于美國，產(chǎn)品包含光源，單色器，吸收池，檢測器和顯 示器等，它是一款對物質(zhì)進(jìn)行定性，定量以及結(jié)構(gòu)分析的儀器。這款儀器和人們常 用的可見光光度計(jì)有有很大的區(qū)別，除了波長范圍，使用光源都不一樣等，價(jià)格也 是后者要要貴一些；平時(shí)的使用和注意事項(xiàng)不一樣的，今天就先來學(xué)習(xí)一下紫外可見分光光度計(jì)使用方法：
    1.試驗(yàn)中所用的量瓶、移液管均應(yīng)經(jīng)檢定校正、洗凈后使用。
    2.使用的石英吸收池必須潔凈。用于盛裝樣品、參比及空內(nèi)溶液的吸收池，當(dāng)裝 入同一溶劑時(shí)，在規(guī)定波長測定吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配 對使用，否則必須加以校正。
    3.取吸收池時(shí)，手指拿毛玻璃面的兩側(cè)。裝盛樣品溶液以池休積的4/5為度，使用 揮發(fā)性溶液吋應(yīng)加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無殘留溶劑。 為防止溶劑揮發(fā)后溶質(zhì)殘留在池子的透光面，可先用蘸有空白溶劑的擦鏡紙擦拭， 然后再用干擦鏡紙拭凈。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意每次放入方向相同。使用后用 洗液及水沖洗干凈，晾干防塵保存，吸收池發(fā)現(xiàn)污染不易洗凈時(shí)可用硫酸發(fā)煙硝酸(3 ：1V/V)混合液稍加浸泡后，洗凈備用。如用重鉻酸鉀清潔液清洗時(shí)，吸收池不貧在 清潔液中長時(shí)間浸泡，否則清潔液中的重鉻酸鉀結(jié)晶會(huì)損壞吸收池的光學(xué)表面，并 應(yīng)充分甩水沖洗，以防重鉻酸鉀吸附于吸收池表面。
    4.測定前應(yīng)先檢查所用的溶劑在測定供試品所用的波長附近是否符合要求，可用 lcm石英吸收池盛溶劑以空氣為空白（即參比光路中不放置任何物質(zhì))測定其吸收度 ，應(yīng)符合規(guī)定。
    5.稱量應(yīng)按藥典規(guī)定要求。配制測定溶液時(shí)稀釋轉(zhuǎn)移次數(shù)應(yīng)盡可能少，轉(zhuǎn)移稀釋 時(shí)所取容積一般應(yīng)不少于5cm。含量測定供試品應(yīng)稱取2份，如為對照品比較法，對 照品一般也應(yīng)稱取2份。吸收系數(shù)檢查也應(yīng)稱取供試品2份，平行操作，每份結(jié)果對 平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。作鑒別或檢查可取樣品1份。
    6.供試品測定溶液的濃度，除各該品種項(xiàng)下已有注明者外，供試品溶液的吸收度 以在0.3~0.7之間為宜，吸收度讀數(shù)在此范圍誤差較小，并應(yīng)結(jié)合所用儀器吸收度線 性范圍，配制合適的讀數(shù)濃度。
    7.選用儀器的狹縫譜帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度值 會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減小狹縫寬度吋供試品的吸收度不揮增加為準(zhǔn)，對于 紫外測定的部分品種，可以使用2nm縫寬，但對某些品種如青霉素鉀及鈉的吸收度 檢查則需用lnm縫寬或更窄，否則其264nm的吸收度會(huì)偏低。
    8.測定時(shí)除另有規(guī)定者外，應(yīng)在規(guī)定的吸收峰±2nm處，再測幾點(diǎn)的吸收度，以核 對供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度最大的波長作為測定波長，除另有規(guī) 定外吸收度最大波長應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長±lnm以內(nèi)，否則應(yīng)考慮試樣的同一 性、純度以及儀器波長的準(zhǔn)確度
    9.除另有規(guī)定外，比色法所用的空內(nèi)系指用同休積的溶劑代替對照品或供試品溶 液，然后依次加入等量的相應(yīng)試劑，并用同樣方法處理。
    10.當(dāng)吸收度和濃度關(guān)系不呈線性關(guān)系時(shí)，應(yīng)取數(shù)份梯度量的對照濃度，用溶劑補(bǔ) 充至同一休積，顯色后測定各份溶液的吸收度，然后以吸收度與相應(yīng)的濃度繪制標(biāo) 準(zhǔn)曲線，再根據(jù)供試品的吸收度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出其含量。