金相顯微鏡常用的照明技術(shù)有以下幾種:
1、直接照明:光直接射向物體,得到清楚的影像。當我們需要得到高對比高度物體的時候,這種類型的光很有效。但是當我們用它照在光亮或反射的物體上時,會引起鏡面的反光。
2、暗視場:光是按一個角度投射到物體表面,其結(jié)果是傾斜的散光進行到相機,在一個暗的背景或視場上創(chuàng)造了明亮的點。用這種照射方法,如果物體表面沒有色差的話,通過視覺系統(tǒng)什么也看不到。這兩種觀察方法通常都是在金相顯微鏡中配備的。
3、背面照明:從物體背面射過來均勻視場的光,通過相機可以看到物體面的側(cè)面輪廓。背面照明常于測量物體的尺寸和定物體方向。
4、散射照明:反射照明,提供一個無方向,像刺眼的陰影樣柔和的光,這種光適合高反射物體。因這種照明的效果我們將這種光比作在陰天里平和,無方向的光。
5、同軸照明:同軸光的形成一垂直方向發(fā)射的均勻面光源,通過一片45度角的半透光反鏡,使光源以垂直向下的方式照射物體表面。這種類型的光源對檢測高反射的平面物體特別有幫助。
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倒置熒光顯微鏡是指與一般顯微鏡相比,其物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過來,由熒光附件與顯微鏡有機結(jié)合構(gòu)成的顯微鏡。
激發(fā)光從物鏡向下落射到標本表面,被反射到物鏡中并聚集在樣品上,樣品所產(chǎn)生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發(fā)光同時進入物鏡,經(jīng)雙色束分離器使激發(fā)光和熒光分開而成像。
物鏡和聚光鏡的工作距離很長,能直接對培養(yǎng)皿中的被檢物體進行顯微觀察和研究。
適用于土壤微生物培養(yǎng)實驗,具有在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)進行顯微觀察的特點,可以觀察不經(jīng)染色的透明活體。
特別適用于對活體細胞和細胞離體培養(yǎng)等顯微觀察。
高信噪比(S/N),能夠捕獲極弱熒光
光學(xué)品質(zhì)--對現(xiàn)代生命科學(xué)研究至關(guān)重要
熒光觀察的理想情況是采用最低量的激發(fā)光照射捕獲高對比度的圖像,由此將細胞受損及熒光衰減的機會降至最小。
對UIS2系統(tǒng)的物鏡進行精密的設(shè)計,使用微弱的激發(fā)光即可捕獲明亮的熒光圖像。光透過率進步的同時也提高了UIS2光學(xué)系統(tǒng)的信噪比。
干涉鍍膜熒光激發(fā)塊的性能改進熒光激發(fā)塊的干涉膜采用了新型鍍膜技術(shù),激發(fā)帶寬(BP)以及熒光帶寬(BA)比傳統(tǒng)譜線縮短了6nm,使信噪比更進一步得到提高。
熒光激發(fā)塊采用硬鍍膜技術(shù),大大延長了激發(fā)塊的使用壽命,提高了在潮濕環(huán)境中的使用性能。
熒光蛋白專用高質(zhì)量熒光激發(fā)塊
BX2系列HQ型熒光激發(fā)塊轉(zhuǎn)為適宜的波長是ECFP/EFP/EYFP/DsRed。高銳化鍍膜以及高透過率(90%-95%)可有效地透過熒光蛋白所發(fā)射的熒光。
這樣,即使采用微弱的激發(fā)光仍可觀察到明亮的圖像,同時,防止熒光衰減,并將細胞受損的可能減至最小。
減少雜散光的功能
當在分光鏡對激發(fā)光進行反射時,雜散光的微量透射就可造成噪聲上升。
熒光激發(fā)塊經(jīng)由其獨特的光吸收涂層可吸收99%以上的雜散光,減少信號干擾,獲得高質(zhì)量圖像。
熒光成像用高數(shù)值孔徑物鏡
BX2系列具有新研制的PLAPON60XO物鏡的特點,提供了當今普通觀察方法用物鏡最高的數(shù)值孔徑(N.A.:1.42),用于熒光成像,同時具有先進的通用特性。
除了其突出的熒光信噪比之外,也可進行紫外激發(fā),這在以前的普通顯微鏡是不能做到的。
UPLSAPO100×O物鏡在340nm處(紫外)仍然維持著高透過率。
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