LC600高效液相色譜儀(等度配置)
P600寶石恒流泵1臺
UV600紫外檢測器1臺
7725i六通進樣閥1只
進口C18柱? 150x4.6 5u? 1根
WS600色譜工作站? 1套
液相色譜儀檢測分析脂肪酸案例配置：
樣? 品：未經(jīng)衍生處理的亞麻酸等6組分的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，四元梯度泵，色譜工作站
檢測器：500型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測器
漂移管溫度為65℃，氮氣流速為2.0L/min
色譜柱：AlltimaTM C18 ，5μm，柱長25cm，柱徑2.1mm
流動相：A為水，B為乙腈
梯? 度? 時間0min 10min 15min20min
A13%? 20%20%? 5%?
B77%? 80%80%? 95%
流? 速：0.4mL/min
進? 樣：20μL
結? 果：所有組分20min之內全部流出，各組分完全分離，組分流出順序為：峰1為亞麻酸，峰2為肉豆蔻酸，峰3為亞油酸，峰4為棕櫚酸，峰5為油酸，峰6為硬脂酸。
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相關熱詞：
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高效液相色譜儀的正確安裝事項如下：
1、要注意防止灰塵玷污光學元件
該儀器很多檢測器都是屬于光學類的分析儀器，這些光學元件很容易受到灰塵玷污，光學元件一旦被玷污，就會引起很多麻煩。與光學元件受潮后效果一樣，主要是使光學元件的反射率降低，從而影響儀器的靈敏度。另外，還會使得雜散光增大，噪聲增大，減低檢測器的靈敏度，使得分析測試的誤差增大。因此，安放本該儀器的房間要干凈、通風、防塵，同時還要注意防止震動。
2、要注意防止干擾
要注意防止電、磁場的干擾。電、磁場的干擾是影響高效液相色譜儀穩(wěn)定性的重要因素。一般來講，安放該儀器的房間，應該遠離電場、磁場干擾。
3、要注意防濕防潮
本儀器是光、機、電、計算機四位一體的、技術密集的高科技產(chǎn)品，它的每一個部分都不允許受潮。否則，將會使有關的元器件損壞或性能變壞，影響儀器的穩(wěn)定性。
注：使用高效液相色譜儀時，液體待檢測物被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動，由于被測物種不同物質與固定相的相互作用不同，不同的物質順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。高效液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛的應用于化學和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質的差別，它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相，適于分析高沸點不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機化合物。
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高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。與經(jīng)典的液相色譜相比，具有高效液相所用的固定相粒度?。?um-10um）、傳質快、柱效高的優(yōu)勢。近年來，在保健食品功效成分、營養(yǎng)強化劑、維生素類、蛋白質的分離測定等應用廣泛。世界上約有80％的有機化合物可以用HPLC來分析測定。
高效液相色譜的分離過程HPLC，借溶質在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質得以分離。
高效液相色譜儀操作步驟：
1)過濾流動相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
2)對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
3)打開HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀)，連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。
4)進入HPLC控制界面主菜單，點擊manual，進入手動菜單。
5)一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進樣閥，需要在manual菜單下，先點擊purge，再點擊start，沖洗時速度不要超過10ml/min。
6)調節(jié)流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點擊injure，選用合適的流速，點擊on，走基線，觀察基線的情況。
7)設計走樣方法。點擊file，選取selectusersandmethods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法，點擊newmethod。選取需要的配件，包括進樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括：a.進樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；b.基線歸零；c.進樣閥的loading-inject轉換；d.走樣時間，隨不同的樣品而不同。
8)進樣和進樣后操作。選定走樣方法，點擊start。進樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。
9)關機時，先關計算機，再關液相色譜。
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