高效液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等，它是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。

    由于液相色譜分析技術(shù)涉及的樣品種類(lèi)繁多、樣品組成及其濃度復(fù)雜，樣品物理形態(tài)多變，對(duì)液相色譜儀的正常分析測(cè)定造成一些干擾因素，如果不注意儀器的維護(hù)和保養(yǎng)，會(huì)對(duì)日常的分析測(cè)定帶采不便，所以需要對(duì)儀器的使用以及維護(hù)要做一些了解才能熟練掌握這種分析技術(shù)。

    高效液相色譜儀的操作過(guò)程：

    1、翻開(kāi)HPLC工作站（包含計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀），銜接好活動(dòng)相管道，銜接檢測(cè)體系。

    2、對(duì)抽濾后的活動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。

    3、過(guò)濾活動(dòng)相，根據(jù)需求挑選不一樣的濾膜。

    4進(jìn)入HPLC操控界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。

    5、有一段時(shí)刻沒(méi)用，或許換了新的活動(dòng)相，需求先沖刷泵和進(jìn)樣閥。沖刷泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖刷進(jìn)樣閥，需求在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖刷時(shí)速度不要超越10ml/min。

    6、調(diào)理流量，初度運(yùn)用新的活動(dòng)相，能夠先試一下壓力，流速越大，壓力越大，通常不要超越2000。點(diǎn)擊injure，選用適宜的流速，點(diǎn)擊on，走基線，調(diào)查基線的狀況。

    7、規(guī)劃走樣辦法。點(diǎn)擊file，選擇select?users?and?methods，能夠選擇現(xiàn)有的各種走樣辦法。若需樹(shù)立一個(gè)新的辦法，點(diǎn)擊new?method。選擇需求的配件，包含進(jìn)樣閥，泵，檢測(cè)器等，根據(jù)需求而不一樣。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣辦法需求包含：a、進(jìn)樣前的穩(wěn)流，通常2-5分鐘；b、基線歸零；c、進(jìn)樣閥的loading-inject變換；d、走樣時(shí)刻，隨不一樣的樣品而不一樣。

    8、進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣辦法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，一切的樣品均需過(guò)濾。辦法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記載數(shù)據(jù)和做符號(hào)等。悉數(shù)樣品走完后，再用上面的辦法走一段基線，洗掉剩余物。

    9、關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜儀。