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紫外可見分光光度計(jì)技術(shù)要求 光度計(jì)操作規(guī)程

時(shí)間:2020-06-21    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】1.?技術(shù)要求及配置 1.1主要功能及特點(diǎn):超低雜散光(0.010%T),超高掃描速度,光譜帶寬6擋可調(diào),可實(shí)現(xiàn)微量50ul樣品測(cè)定.操作完全由計(jì)算機(jī)控制,兼容WinXP,Win2000操作系統(tǒng),具

1.?技術(shù)要求及配置
1.1主要功能及特點(diǎn):超低雜散光(0.010%T),超高掃描速度,光譜帶寬6擋可調(diào),可實(shí)現(xiàn)微量50ul樣品測(cè)定.操作完全由計(jì)算機(jī)控制,兼容WinXP,Win2000操作系統(tǒng),具有光度測(cè)量,光譜/時(shí)間掃描,定量計(jì)算,蛋白質(zhì)核酸測(cè)量功能等。
2.技術(shù)指標(biāo)
2.1波長(zhǎng)范圍:190~900nm
2.2光譜帶寬:0.1,0.2,0.5,1,2,5nm(6檔自動(dòng)可調(diào))
2.3 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度:±0.3 nm
2.4波長(zhǎng)重復(fù)性:0.1 nm
2.5波長(zhǎng)調(diào)節(jié)量 0.01nm
2.6
光度值范圍:Abs:-4.000~5.000?%T:0~600%T?Conc:-9999~9999
E(S),E(R):0~600
2.7
光度值準(zhǔn)確性:
±0.002 Abs (0~0.5 Abs)
±0.004Abs(0.5~1.0 Abs)
±0.008Abs(1.0~2.0 Abs)
±0.3%T
2.8光度值重復(fù)性:
±0.001 Abs (0~0.5 Abs)
±0.002 Abs(0.5~1.0 Abs)
±0.004 Abs(1.0~2.0 Abs)
±0.15%T
2.9波長(zhǎng)掃描速度:
1 nm/min 、5nm/min 、20 nm/min 、120 nm/min 、
300 nm/min 、1000 nm/min 、1600 nm/min 、2000nm/min
2.10雜散光:小于0.010%T(220nm Nal,340nm、360nm NaNO2
2.11基線穩(wěn)定性:0.0004 Abs/h(500nm,2小時(shí)預(yù)熱以后)
2.12噪聲水平:
±0.0003 Abs (500nm)
2.13
基線平直度:±0.001 Abs (200~850nm)
2.14光源:WI燈,D2燈(進(jìn)口光源)
2.15光源切換:自動(dòng)切換,325~370nm 用戶自由選擇
2.16檢測(cè)器:光電倍增管
2.17 測(cè)光方式:雙光束
2.18可配50uL微量池
3.主機(jī)及軟件功能
3.1主機(jī)光路底座為鑄鋁底座
3.2 主機(jī)可選配內(nèi)置式自動(dòng)進(jìn)樣器
3.3高壓同步伺服功能
3.4測(cè)量功能:光譜掃描,時(shí)間掃描,定量分析,多譜圖測(cè)量,動(dòng)力學(xué)測(cè)試,核酸/蛋白專用軟件

3.5 控制功能:波長(zhǎng)移動(dòng),自動(dòng)校零,儀器自動(dòng)校正,自動(dòng)六連池和自動(dòng)吸樣器控制,光程校正
3.6 測(cè)量:開機(jī),測(cè)量條件的設(shè)定,輸出,存儲(chǔ)
3.7譜圖顯示 :光譜,時(shí)間及數(shù)據(jù)顯示
3.8定量方式:多波長(zhǎng)定量,常數(shù)輸入法和標(biāo)準(zhǔn)曲線法(1次.2次.3次函數(shù)及折線擬合)定量
3.9數(shù)據(jù)處理:微分,導(dǎo)數(shù),平滑,運(yùn)算(圖譜與圖譜,圖譜與數(shù)值),動(dòng)力學(xué)活性值計(jì)算 ,平均值,標(biāo)準(zhǔn)偏差及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差自動(dòng)計(jì)算

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相關(guān)熱詞:

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紫外可見分光光度計(jì)是如何工作的

    紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。

    由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同;

    因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。

 

    分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團(tuán)的信息??梢杂脴?biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。

    根據(jù)Lambert-Beer定律說(shuō)明光的吸收與吸收層厚度成正比,比耳定律說(shuō)明光的吸收與溶液濃度成正比;如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響,即得朗伯-比耳定律。

    即A=εbc,(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù),b為液池厚度,c為溶液濃度)就可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。

    將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測(cè)定紫外可見吸收光譜。

    若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣,也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確,精密度高,且測(cè)定條件要相同。

    實(shí)驗(yàn)證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同,這可以利用紫外光譜來(lái)判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度,以確定選擇哪一種溶劑。

    應(yīng)用:

    在水和廢水監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用,對(duì)于一個(gè)水系的監(jiān)測(cè)分析和綜合評(píng)價(jià),一般包括水相(溶液本身)、固相(懸浮物、底質(zhì))、生物相(水生生物)。

    在水質(zhì)的常規(guī)監(jiān)測(cè)中,紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復(fù)雜多變,待測(cè)物的濃度和干擾物的濃度差別很大,在具體分析時(shí)必須選擇好分析方法。

    在農(nóng)產(chǎn)品和食品分析中可用于檢測(cè)的組分或成分有蛋白質(zhì)、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、砷、汞等;

    在植物生化分析中可用于檢測(cè)葉綠素、全氮和酶的活力等;

    在飼料分析中可用于檢測(cè)煙酸、棉酚、磷化氫和甲酯等。

標(biāo)簽: 紫外可見分光光度計(jì)
紫外可見分光光度計(jì) 紫外可見分光光度計(jì)是如何工作的_紫外可見分光光度計(jì)

分光光度計(jì),又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長(zhǎng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計(jì)的光源。
光度定義
分光光度法是在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。常用的波長(zhǎng)范圍為:(1)200~380nm的紫外光區(qū),(2)380~780nm的可見光區(qū),(3)2.5~25μm(按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見光分光光度計(jì)(或比色計(jì))、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測(cè)量的精密度和準(zhǔn)確度,所有儀器應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定,定期進(jìn)行校正檢定。
儀器組成
分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。

儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器、信號(hào)處理器和顯示與存儲(chǔ)系統(tǒng)組成。
原理
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光線透過(guò)測(cè)試的樣品后,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過(guò)被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí),被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長(zhǎng)度)成正比,其關(guān)系如下式:

A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度;

I。為入射的單色光強(qiáng)度;

I 為透射的單色光強(qiáng)度;

T 為物質(zhì)的透射率;

k 為摩爾吸收系數(shù);

L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長(zhǎng);

c 為物質(zhì)的濃度;

物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長(zhǎng),以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測(cè)定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過(guò)處理使其顯色后再測(cè)定,故又稱比色分析。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測(cè)定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作。




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