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設(shè)定培養(yǎng)細(xì)胞離心機(jī)的離心力 離心機(jī)操作規(guī)程

時(shí)間:2020-06-21    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】離心機(jī)是借離心力分離液相非均一體系的設(shè)備。根據(jù)物質(zhì)的沉降系數(shù)、質(zhì)量、密度等的不同,應(yīng)用強(qiáng)大的離心力使物質(zhì)分離、濃縮和提純的方法稱為離心。一般說(shuō),? 離心機(jī)轉(zhuǎn)速在20000r/min以上的稱為超速離

離心機(jī)是借離心力分離液相非均一體系的設(shè)備。根據(jù)物質(zhì)的沉降系數(shù)、質(zhì)量、密度等的不同,應(yīng)用強(qiáng)大的離心力使物質(zhì)分離、濃縮和提純的方法稱為離心。一般說(shuō),? 離心機(jī)轉(zhuǎn)速在20000r/min以上的稱為超速離心機(jī)。離心技術(shù),特別是超速離心技術(shù)是分子生物學(xué)、生物化學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中不可缺少的手段。

1924年T.Svedberg和Rinde研制出世界上第一臺(tái)渦輪超速離心機(jī)以來(lái),發(fā)展非常迅速,現(xiàn)在已廣泛地應(yīng)用到科學(xué)研究和生產(chǎn)的各個(gè)領(lǐng)域?,F(xiàn)在離心機(jī)轉(zhuǎn)頭最高轉(zhuǎn)速已達(dá)100000r/min,最大離心力達(dá)700000g。

離心機(jī)作為一種手段,具有許多優(yōu)點(diǎn)。例如,超速離心機(jī)可在低溫下操作,保護(hù)了生物大分子的活性。制備型的離心機(jī)負(fù)載量大,一次可分離提純幾克樣品,比層析、

電泳上的樣品量大得多。分析離心機(jī)不僅可測(cè)物質(zhì)的分子量,還可檢驗(yàn)物質(zhì)的純度、構(gòu)象、沉降系數(shù)等。因此離心技術(shù)在生物學(xué)研究中占有重要的地位,是分離、純

化細(xì)胞、病毒、蛋白、核酸和酶的方便比較為有效的工具。

(二)離心機(jī)原理

當(dāng)含有細(xì)小顆粒的懸浮液靜置不動(dòng)時(shí),由于重力場(chǎng)的作用使得懸浮的顆粒逐漸下沉。粒子越重,下沉越快,反之密度比液體小的粒子就會(huì)上浮。微粒在重力場(chǎng)下移

動(dòng)的速度與微粒的大小、形態(tài)和密度有關(guān),并且又與重力場(chǎng)的強(qiáng)度及液體的粘度有關(guān)。象紅血球大小的顆粒,直徑為數(shù)微米,就可以在通常重力作用下觀察到它們的

沉降過(guò)程。

此外,物質(zhì)在介質(zhì)中沉降時(shí)還伴隨有擴(kuò)散現(xiàn)象。擴(kuò)散是無(wú)條件的絕對(duì)的。擴(kuò)散與物質(zhì)的質(zhì)量成反比,顆粒越小擴(kuò)散越嚴(yán)重。而沉降是相對(duì)的,有條件的,要受到外力

才能運(yùn)動(dòng)。沉降與物體重量成正比,顆粒越大沉降越快。對(duì)小于幾微米的微粒如病毒或蛋白質(zhì)等,它們?cè)谌芤褐谐赡z體或半膠體狀態(tài),僅僅利用重力是不可能觀察到

沉降過(guò)程的。因?yàn)轭w粒越小沉降越慢,而擴(kuò)散現(xiàn)象則越嚴(yán)重。所以需要利用離心機(jī)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力,才能迫使這些微??朔U(kuò)散產(chǎn)生沉降運(yùn)動(dòng)。

離心就是利用離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大的離心力,加快液體中顆粒的沉降速度,把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開。離心力(F)的大小取決于離心轉(zhuǎn)頭的角速度(ω,r/min)和物質(zhì)顆粒距離心軸的距離(r,cm)。它們的關(guān)系是:F=ω2R

為方便起見(jiàn),F(xiàn)常用相對(duì)離心力也就是地心引力的倍數(shù)表示。即把F值除以重力加速度g(約等于9.8m/s2.)得到離心力是重力的多少倍,稱作多少個(gè)g。例如離心機(jī)轉(zhuǎn)頭平均半徑是6cm,當(dāng)轉(zhuǎn)速是60000

r/min時(shí),離心力是240000×g,表示此時(shí)作用在被離心物質(zhì)上的離心力是日常地心引力的24萬(wàn)倍。

因此,轉(zhuǎn)速r/min和離心力g值之間并不是成正比關(guān)系,還和半徑有關(guān)。同樣的轉(zhuǎn)速,半徑大一倍,離心力(g值)也大一倍。轉(zhuǎn)速(r/min)和離心力(g值)之間的關(guān)系可用下式換算:

式中:r為半徑(cm),g為離心力(g值)

(三)超速離心機(jī)的離心方法

用離心方法分離生物大分子和亞細(xì)胞物質(zhì)的基本原理是根據(jù)它們?cè)谝后w介質(zhì)中或者沉降速度不同而形成不同的區(qū)帶,或者它們的密度不同而停留在液體介質(zhì)中不同的位置而把它們一一分開。前者是沉降速度法,應(yīng)用該法時(shí)液體介質(zhì)的最大密度要小于樣品中最小顆粒的密度,離心時(shí)選用高轉(zhuǎn)速和短時(shí)間;后者是沉降平衡法,應(yīng)用該法時(shí)液體介質(zhì)的最大密度要大于樣品中最小顆粒的密度,離心時(shí)選用較低轉(zhuǎn)速和較長(zhǎng)時(shí)間。實(shí)際操作有幾種形式:

1.差速離心這種方法是選擇不同轉(zhuǎn)速的離心,分別分離各個(gè)不同組分。例如先用低速沉降大顆粒和上清液,在高速離心上清沉降中等顆粒,最后超速離心上清沉降小顆粒。采用逐級(jí)提高離心力分離上情液的方法,把不同大小的顆粒分開。

這種方法比較簡(jiǎn)單,方便。分離的組份沉到管底,因此可以迅速濃縮所要的組份,減少體積。但回收率和純度是有矛盾的,要提高回收率,勢(shì)必提高轉(zhuǎn)速或延長(zhǎng)離心時(shí)間,這樣大小相近的顆粒也會(huì)沉到管底。因此該法多用于粗提純或初步濃縮樣品。

2.速度區(qū)帶(或速度梯度)離心本法是將樣品放在一個(gè)連續(xù)的密度梯度液體上,通過(guò)離心,大顆粒沉降快,小顆粒沉降慢。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間,相同的顆粒就在同一深度

形成一條帶子,因此把各種組份分開來(lái)。它適用于分離密度相同、而大小不同的物質(zhì),如不同的蛋白質(zhì)組份密度都差不多,但分子量不一樣,用本法很容易將其分

開。但對(duì)密度不同、大小類似的物質(zhì)則不易分離。

蔗糖梯度是一種常用的介質(zhì)。用不同濃度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度,用于梯度離心。再分別進(jìn)行收集處于不同區(qū)帶里的各個(gè)組份。

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相關(guān)熱詞:

等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。

  【中國(guó)儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】離心機(jī)是利用離心力,分離液體與固體顆?;蛞后w與液體的混合物中各組分的機(jī)械。 離心機(jī)主要用于將懸浮液中的固體顆粒與液體分開;或?qū)⑷闈嵋褐袃煞N密度不同,又互不相溶的液體分開(例如從牛奶中分離出奶油);它也可用于排除濕固體中的液體,例如用洗衣機(jī)甩干濕衣服;特殊的超速管式分離機(jī)還可分離不同密度的氣體混合物;利用不同密度或粒度的固體顆粒在液體中沉降速度不同的特點(diǎn),有的沉降離心機(jī)還可對(duì)固體顆粒按密度或粒度進(jìn)行分級(jí)。離心機(jī)大量應(yīng)用于化工、石油、食品、制藥、選礦、煤炭、水處理和船舶等部門。
 


 

  離心機(jī)使用注意事項(xiàng)
 
  一.離心機(jī)在預(yù)冷狀態(tài)時(shí),離心機(jī)蓋必須關(guān)閉,離心結(jié)束后取出轉(zhuǎn)頭要倒置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,擦干腔內(nèi)余水,離心機(jī)蓋處于打開狀態(tài)。
 
  二.轉(zhuǎn)頭在預(yù)冷時(shí)轉(zhuǎn)頭蓋可擺放在離心機(jī)的平臺(tái)上,或擺放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,千萬(wàn)不可不擰緊浮放在轉(zhuǎn)頭上,因?yàn)橐坏┱`啟動(dòng),轉(zhuǎn)頭蓋就會(huì)飛出,造成事故!
 
  三.轉(zhuǎn)頭蓋在擰緊后一定要用手指觸摸轉(zhuǎn)頭與轉(zhuǎn)蓋之間有無(wú)縫隙,如有縫隙要擰開重新擰緊,直至確認(rèn)無(wú)縫隙方可啟動(dòng)離心機(jī)。
 
  四.在離心過(guò)程中,操作人員不得離開離心機(jī)室,一旦發(fā)生異常情況操作人員不能關(guān)電源POWER),要按STOP。在預(yù)冷前要填寫好離心機(jī)使用記錄。
 
  五.不得使用偽劣的離心管,不得使用老化、變形、有裂紋的離心管。
 
  六.在節(jié)假日和晚間zui后一個(gè)使用離心機(jī)例行安全檢查后方能離去。
 
  七.在儀器使用過(guò)程中發(fā)生機(jī)器故障,部件損壞情況時(shí)要及時(shí)與技術(shù)人員。



    細(xì)胞涂片離心機(jī)廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、醫(yī)學(xué)、電子化工、大專院校、農(nóng)牧林、生物制藥等科研單位對(duì)溶液中不同密度的粒子進(jìn)行分離。


    細(xì)胞涂片離心機(jī)的安裝要求:


    (1)臺(tái)面堅(jiān)實(shí)、平整,防止液基薄層細(xì)胞制片機(jī)在工作時(shí)產(chǎn)生振動(dòng)或儀器移動(dòng);


    (2)電源具有獨(dú)立地線,嚴(yán)禁零線與地線共用,防止電擊傷人;


    (3)液基薄層細(xì)胞制片機(jī)四周應(yīng)無(wú)腐蝕性氣體及電磁場(chǎng)干擾;


    防止儀器外表保護(hù)層過(guò)早失效和對(duì)電氣元件的干擾;


    (4)液基薄層細(xì)胞制片機(jī)放置水平,確保四個(gè)橡膠機(jī)腳均勻受力。


    細(xì)胞涂片離心機(jī)工作原理:


    在高速旋轉(zhuǎn)的過(guò)程中,由離心力所導(dǎo)致的運(yùn)動(dòng)使懸浮于液體中的固體物質(zhì)形成沉淀;


    也就是懸浮體液中質(zhì)量或體積較大的物體向轉(zhuǎn)頭半徑最大的方向移動(dòng);


    而質(zhì)量或體積較小的部分沉積在轉(zhuǎn)頭半徑較近的地方。







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