在細(xì)菌學(xué)診斷工作中,常需要從被檢材料中分離細(xì)菌,并獲得純培養(yǎng)(即單獨(dú)一種細(xì)菌的培養(yǎng)物)。因此,通常要用到離心機(jī)對樣品進(jìn)行離心分離,細(xì)菌的離心機(jī)分離培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)菌學(xué)診斷中的一項重要基本操作。
分離細(xì)菌的方法很多,常用的有以下幾種。
將被檢材料接種于適宜培養(yǎng)基,再于固體培養(yǎng)基表面生長的菌落中,選樣欲分離菌的單個菌落,移種于另一適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng)。因為一個菌落通常由一個細(xì)菌生長繁殖所形成,故培養(yǎng)出的細(xì)菌是單一的種類,即純培養(yǎng)。
用特殊的培養(yǎng)環(huán)境(如厭氧、二氧化碳環(huán)境等)分離細(xì)菌。
將被檢材料接種子易感動物體內(nèi),使病原菌在動物體內(nèi)繁殖,然后從動物體內(nèi)取材料利用離心機(jī)進(jìn)行離心分離出需要的成分后培養(yǎng)。利用某些細(xì)菌對一些理化因素有特殊抵抗力,用理化方法處理接種材料,殺死其他微生物而保存需要的細(xì)菌,再分離培養(yǎng)。
一般情況下,被檢材料用前兩種方法分離培養(yǎng)即可。如披撿材料污染嚴(yán)重,可先用后兩種方法處理,再用前兩種方法獲得純培養(yǎng)。
在分離培養(yǎng)操作中,嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。所有用具、培養(yǎng)基、試劑都要經(jīng)過滅菌,而且不能長時間暴露于空氣中。禁止用手接觸或用口吹已滅菌的器皿內(nèi)部。
根據(jù)被檢材料中可能存在的病原苗的特性,選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件:(溫度、氣體環(huán)境等)。進(jìn)行未知菌的初次分離,可以多用幾種培養(yǎng)基,如肉湯、鮮血瓊脂、麥康克瓊脂等,每種培養(yǎng)基接種數(shù)管,分別放在普通環(huán)境和厭氧環(huán)境中培養(yǎng)。一般經(jīng)過24—78小時觀察結(jié)果,但也有一些病原菌,需要培養(yǎng)校長時間才能生長。
被檢材料一般不需要處理,直接按種于培養(yǎng)基上。當(dāng)懷疑為有芽腦的病原苗時,可將被檢材料加生理鹽水磨碎,作成1:10乳劑(液體材料不必稀釋),置60-80℃水浴中20—30分鐘,以殺死無芽胞的雜菌,然后再接種于培養(yǎng)基中。
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一、離心機(jī)有電源、電機(jī)轉(zhuǎn)速異常故障檢修方式
軸承損壞或轉(zhuǎn)動受阻,軸承內(nèi)缺油或軸承內(nèi)有污垢較多而引起摩擦阻力增大,電機(jī)達(dá)不到額定轉(zhuǎn)速,應(yīng)及時清洗或更換軸承。整流子表面有一層氧化物,甚至燒成凹凸不平或電刷與整流子外緣不吻合也可使轉(zhuǎn)速下降,應(yīng)清理整流子及電刷,使其接觸良好。如轉(zhuǎn)子線圈中短路或斷路,可用萬用表檢查,重新繞制線圈。轉(zhuǎn)子在使用時可因金屬疲勞、超速、過應(yīng)力、化學(xué)腐蝕、選擇不當(dāng)、使用中轉(zhuǎn)頭不平衡及溫度失控等原因而導(dǎo)致離心管破裂,樣品滲漏,轉(zhuǎn)子損壞。對于以上情況主要要求操作者熟練掌握操作程序,正確選用合適的離心管和離心轉(zhuǎn)子,注意嚴(yán)格控制每一步操作操序,盡量減少人為的不必要的損傷,在轉(zhuǎn)子的安全系數(shù)及保證期內(nèi)使用。
二、離心機(jī)有電源、但電機(jī)不能起動的故障現(xiàn)象排除方式
在使用過程中經(jīng)常出現(xiàn)電機(jī)不能起動的現(xiàn)象,如主電源指示燈亮,這時應(yīng)檢查炭刷磨損程度,如炭刷磨損超過總量的三分之一,應(yīng)及時更換新的炭刷。主電源指示燈不亮?xí)r,檢查指示燈保險絲及室內(nèi)配電板保險絲是否熔斷,同時檢查電源線是否接觸良好,如保險絲斷則應(yīng)更換保險絲并保持電路暢通。還應(yīng)檢查真空泵表及油壓指示值,如油壓過高而主機(jī)也不能啟動,必須檢查各油路是否堵塞,特別是節(jié)流小孔是否暢通,如不暢通應(yīng)清洗使之暢通。
三、冷凍離心機(jī)冷凍效果異常故障現(xiàn)象排除方式
電源不通是導(dǎo)致冷凍機(jī)啟動及制冷效果差的原因之一,與電機(jī)不轉(zhuǎn)的故障相同,應(yīng)分別檢查電源及保險絲。電壓過低,安全裝置故障也可使冷凍機(jī)不能啟動,電壓過低可能是電網(wǎng)電壓低;配電板配線過多;電源線過長(理想長度為3米)等。電源線容量不夠,不僅使電壓降低,還會造成意外事故。當(dāng)電源電壓降到180—190VJ時,冷凍機(jī)不能啟動,影響制冷效果。通風(fēng)性能不好,如儀器安裝在日光直射或通風(fēng)不良處,散熱器效果差,或散熱器蓋滿灰塵,也中會影響制冷效果。離心管重量不平衡,放置不對稱;轉(zhuǎn)子孔內(nèi)有異物,使負(fù)荷不平衡;轉(zhuǎn)軸上端固定螺帽松動,轉(zhuǎn)軸磨擦或彎曲;電機(jī)轉(zhuǎn)子不在磁場中心會產(chǎn)生噪音;轉(zhuǎn)子本身損傷等都可導(dǎo)致機(jī)體震動劇烈、響聲異常。
臺式低速常溫離心機(jī)4-5N 一,產(chǎn)品概述 主要針對于生物化學(xué)科研,醫(yī)療檢驗,環(huán)保,質(zhì)量檢驗檢疫,食品藥品制造企業(yè)等領(lǐng)域設(shè)計并制造實驗儀器與部分生產(chǎn)用設(shè)備,以及相關(guān)器具與耗材產(chǎn)品。 二,產(chǎn)品特點: ◎微機(jī)控制、交流變頻電機(jī)驅(qū)動,運(yùn)行平穩(wěn),寧靜。 ◎大液晶顯示轉(zhuǎn)速、離心率、溫度與時間等參數(shù),運(yùn)行中可隨時更改參數(shù),無需停機(jī)。 ◎可分別設(shè)置離心力、RCF值,可相互換、可隨時觀察。 ◎設(shè)有短時離心專用點動鍵。 ◎10檔加減速控制,9檔自由停車時間可達(dá)540s以上,滿足特殊分離品使用要求. ◎時間小于一分鐘時以秒顯示。 ◎采用電子門鎖,全鋼制內(nèi)腔保護(hù)套。 ◎適用于放射免疫、生物化學(xué)、生物制藥、血液制品的分離與提純。 三,工作原理 離心機(jī)是利用離心力,分離液體與固體顆粒或液體與液體的混合物中各組分的機(jī)械。離心機(jī)主要用于將懸浮液中的固體顆粒與液體分開,或?qū)⑷闈嵋褐袃煞N密度不同,又互不相溶的液體分開(例如從牛奶中分離出奶油);它也可用于排除濕固體中的液體,例如用洗衣機(jī)甩干濕衣服;特殊的超速管式分離機(jī)還可分離不同密度的氣體混合物;利用不同密度或粒度的固體顆粒在液體中沉降速度不同的特點,有的沉降離心機(jī)還可對固體顆粒按密度或粒度進(jìn)行分級。 技術(shù)參數(shù): 型號 4-5N 高轉(zhuǎn)速 5500rpm 支持電源 AC 220±22V 50Hz 大相對離心力 5010×g 總功率 750W 大容量 4×750ml 整機(jī)噪聲 < 65dB(A) 定時范圍 1min~99min59sec 離心腔直徑 420mm 溫度設(shè)置范圍 / 外形尺寸 (長×寬×高) 540×460×400(mm) 溫度精度 / 外包裝尺寸 (長×寬×高) 640×560×500(mm) 短加/ 減速時間 30s/30s 凈重 50kg 轉(zhuǎn)速精度 ±20r/min 毛重 55kg 可選配轉(zhuǎn)子: 編號:角轉(zhuǎn)子AR0650/F 容量:6×50ml/尖底 轉(zhuǎn)速:5500rpm 離心力:5010×g 編號:水平轉(zhuǎn)子SR6250 容量:6×250ml 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:3500×g 編號:水平轉(zhuǎn)子SR4250 容量:4×250ml 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:3500×g 編號:水平轉(zhuǎn)子SR2296 容量:2×2×96孔 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:2300×g 編號:水平轉(zhuǎn)子SR4750 容量:4×750ml 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:3580×g 編號:SR4750/4296 容量:4×2×96孔 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:3550×g 編號:水平轉(zhuǎn)子SR4500 容量:4×500ml 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:3580×g 編號:SR4500/4245 容量:4×24×5ml管架 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:3580×g 編號:水平轉(zhuǎn)子SR3215 容量:32×15ml 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:2810×g 編號:SR3215/4100 容量:4×50/100ml 轉(zhuǎn)速:5000rpm 離心力:4390×g 編號:SR3215/850 容量:8×50ml 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:2810×g 編號:SR3215/725 容量:72×5ml 轉(zhuǎn)速:4000rpm 離心力:2830×g
由于樣品組分的密度和沉降系數(shù)不同,離心分離后的樣品沉淀物會形成層狀結(jié)構(gòu)。只需要通過上清液傾出就可以實現(xiàn)離心過程。離心設(shè)備實驗室離心機(jī)8000轉(zhuǎn)每分鐘。近些年出現(xiàn)的超速離心是超過萬轉(zhuǎn)/分鐘,它們被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)研究(醫(yī)用離心機(jī))、實驗室研究(實驗室離心機(jī))、化驗室研究(化驗室離心機(jī))、血液分離測試(血液離心機(jī)),可以從血漿中的分離出紅細(xì)胞和白細(xì)胞。
離心機(jī)在高速旋轉(zhuǎn)的過程中,由離心力所導(dǎo)致的運(yùn)動使懸浮于液體中的固體物質(zhì)形成沉淀,也就是懸浮體液中質(zhì)量或體積較大的物體向轉(zhuǎn)頭半徑大的方向移動,而質(zhì)量或體積較小的部分沉積在轉(zhuǎn)頭半徑較近的地方。在離心過程中,乳濁液或懸浮液樣品被放置在一個厚壁離心管中,而離心管放置在離心機(jī)轉(zhuǎn)子上。其特征在于通過轉(zhuǎn)子帶動離心管快速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力的作用,樣品中的密度較高的成分會加速向離心管的底部沉降。
離心管成對放置,且容量不超過一半左右。這可以防止形成不平衡和樣品溢出。
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