高效液相色譜法有“三高一廣一快”的特點(diǎn)：
①高壓：流動(dòng)相為液體，流經(jīng)色譜柱時(shí)，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對(duì)載液加高壓。
②高效：分離效能高?？蛇x擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到較佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
③高靈敏度：紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)。
④應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢(shì)。
⑤分析速度快、載液流速快：較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個(gè)樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時(shí)。
此外高效液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜相比各有所長(zhǎng)，相互補(bǔ)充。高效液相色譜的缺點(diǎn)是有“柱外效應(yīng)”。在從進(jìn)樣到檢測(cè)器之間，除了柱子以外的任何死空間（進(jìn)樣器、柱接頭、連接管和檢測(cè)池等）中，如果流動(dòng)相的流型有變化，被分離物質(zhì)的任何擴(kuò)散和滯留都會(huì)顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬，柱效率降低。高效液相色譜檢測(cè)器的靈敏度不及氣相色譜。
儀器網(wǎng)-專業(yè)分析儀器服務(wù)平臺(tái),實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備交易網(wǎng),儀器行業(yè)專業(yè)網(wǎng)絡(luò)宣傳媒體。
相關(guān)熱詞：
等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。
色譜分析是以假定給定組分的保留值在分離條件不變時(shí)保留值恒定為基礎(chǔ)的。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的液相色譜程序而言，每個(gè)峰都對(duì)應(yīng)于一個(gè)組分，以標(biāo)準(zhǔn)品與樣品中組分的保留時(shí)間相對(duì)應(yīng)進(jìn)行鑒別。恒定的保留時(shí)間對(duì)分析設(shè)計(jì)排列的樣品很重要。
在液相色譜儀分析中常涉及到組分的保留值。保留值發(fā)生改變可使已建立的方法不能繼續(xù)進(jìn)行下去，或引起分析周期太長(zhǎng)，或者峰分不開。應(yīng)該找出引起保留值變化的原因。
除上述條件之外，引起保留變化的原因主要包括下列3種：
1.柱-柱之間；
2.日-日或日內(nèi)：保留時(shí)間可能隨時(shí)間而變化，如溫度、柱溫、pH值等對(duì)柱性能有影響，通常是所有的峰提前或延遲。
3.樣品-樣品間：偶爾也有樣品與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間不同，可能是樣品介質(zhì)的影響。
以下重點(diǎn)討論造成日-日間和日內(nèi)保留時(shí)間變化的影響因素，它們主要是：
a.分離條件控制差
除了色譜柱外，保留是溫度、流動(dòng)相組成和流速的綜合體現(xiàn)，如果有一個(gè)條件變化，保留時(shí)間也會(huì)隨之發(fā)生變化。
b.柱平衡慢
流動(dòng)相組成或溫度變化時(shí)，柱在新條件下再平衡需要一定的時(shí)間，在柱達(dá)到完全平衡錢不應(yīng)進(jìn)樣。
c.柱鈍化
長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)樣，柱會(huì)退化，強(qiáng)保留組分被柱不可逆的保留，導(dǎo)致所有組分保留減少。鍵合相層從填料微粒上剝落下來，會(huì)導(dǎo)致某些組分的保留增加，而另一組分的保留減少。
d.柱過載和樣品介質(zhì)相互作用
過大的樣品量超出柱的線性范圍，使保留減少。也可能是樣品本身過載，從其它方面影響保留。
高效液相色譜儀是由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、查看器、記錄儀等幾有些構(gòu)成。儲(chǔ)液器中的活動(dòng)相被高壓泵打入體系，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入活動(dòng)相，被活動(dòng)相載入色譜柱（固定相、內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不一樣的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過重復(fù)屢次的吸附-解吸的分配進(jìn)程，各組分在移動(dòng)速度上發(fā)生較大的不一樣，被別離成單個(gè)組分順次從柱內(nèi)流出，經(jīng)過查看器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜方式打印出來。 高效液相色譜儀常見故障解決方法： 故障1 活動(dòng)相內(nèi)有氣泡，封閉泵，翻開泄壓閥，翻開purge鍵，清潔脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進(jìn)入活動(dòng)相，不管翻開purge鍵幾回，都無法清除不斷發(fā)生的氣泡。 因素過濾器長(zhǎng)時(shí)刻沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過濾器內(nèi)部由于霉菌的成長(zhǎng)繁衍，構(gòu)成菌團(tuán)，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地經(jīng)過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入活動(dòng)相。 處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清潔幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時(shí)，悄悄震蕩幾回，再將過濾器用純水清潔幾回，翻開泄壓閥，翻開purge鍵，清潔脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，持續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出，闡明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸損壞，活動(dòng)相能夠流暢地經(jīng)過過濾器。翻開泄壓閥，翻開泵，流速調(diào)至1.0～3.0ml/min，純水沖刷過濾器1小時(shí)擺布。即可將過濾器清潔潔凈。封閉泄壓閥，純甲醇沖刷半小時(shí)即可。 故障2 柱壓高因素：緩沖液鹽分如（乙酸銨等）堆積于柱內(nèi)；樣品污染堆積。 處理關(guān)于第一種狀況先用40～50℃的純水,低速正向沖刷柱子，待柱壓逐步降低后，相應(yīng)進(jìn)步流速?zèng)_刷，柱壓大幅度降低后，用常溫純水沖刷，之后用純甲醇沖刷柱子30分鐘；關(guān)于第二種狀況，由樣品的堆積導(dǎo)致污染的C18柱，和純水反向沖刷柱子，然后換成甲醇沖刷，接著用甲醇+異丙醇（4+6）沖刷柱子（沖刷時(shí)刻的長(zhǎng)短由樣品污染的狀況而定），再用換成甲醇沖刷，然后用純水沖刷，最終甲醇沖刷正向沖刷柱子30分鐘以上。 故障3 既無壓力指示，又無液體流過[1>；。 泵密封墊圈磨損；很多氣泡進(jìn)入泵體。 處理關(guān)于第一種狀況，替換密封墊圈；關(guān)于第二種狀況，在泵作用的一起，用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處協(xié)助抽出空氣。 故障4 壓力動(dòng)搖大，流量不穩(wěn)定. 因素體系中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。 處理作業(yè)中留意調(diào)查活動(dòng)相的量，確保不銹鋼濾器沉入儲(chǔ)液器瓶底，防止吸入空氣，活動(dòng)相要充沛脫氣[2>；。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清潔. 故障5 出峰欠安，峰分叉。 因素色譜柱被污染；柱頭填料陷落。 處理關(guān)于第一種狀況，先用純水反向沖刷柱子，然后換成甲醇沖刷，接著用甲醇+異丙醇（4+6）沖刷柱子（沖刷時(shí)刻的長(zhǎng)短由樣品污染的狀況而定），再換成甲醇沖刷，然后用純水沖刷，最終甲醇沖刷正向沖刷柱子30分鐘以上。如沖刷后仍然出峰欠安，則考慮第二種狀況。關(guān)于第二種狀況,擰開柱頭，查看柱填料是不是硬結(jié)或陷落。去掉硬結(jié)有些(污染的填料），裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內(nèi)徑一樣的頂端滑潤(rùn)的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊重復(fù)幾回，直至裝滿填平；。柱頭用甲醇沖刷潔凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖刷30分鐘以上。高效液相色譜儀常見故障解決方法
449717568
