?實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)分離方法不一,適用場(chǎng)合也不盡相同。目前主流的離心分離方法主要是差速離心法和區(qū)帶離心法,其實(shí)在實(shí)驗(yàn)室離心技術(shù)制備超離心法一文中有提及兩種離心方法,今天筆者對(duì)這兩種方法的原理及應(yīng)用介紹進(jìn)行補(bǔ)充和完善。
1. 差速離心法:許多具有生物活性的生物大分子和亞細(xì)胞器是不穩(wěn)定的,需要低溫高速離心,常用的是差速離心法。通過離心后倒出上清液和沉淀分開,把分離出來的上清液再增大轉(zhuǎn)速離心,分離出第二部分沉淀,這樣不斷增大轉(zhuǎn)速,逐級(jí)分離出所需要的物質(zhì)。利用這種方法可以有效地分離大小上差別較大的顆粒,但不能分離大小相似的顆粒,而且所分離出來的組分往往是不均一的,雜有其他種類的顆粒。
2.區(qū)帶離心法:其中又可以分為兩種:速率區(qū)帶離心和等密度速率區(qū)帶離心。
1) 速率區(qū)帶離心法:這是將小量懸液放在一平緩的密度梯度液上,用此梯度液來穩(wěn)定顆粒的沉降。由于離心,顆粒離開起始區(qū)帶而移動(dòng),移動(dòng)的速度是由顆粒的大小、形狀和它們所受實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的離心力來決定的。離心一段時(shí)間歷,各種穎粒將按照它們的相對(duì)速度移動(dòng)而各個(gè)分開,成為一系列區(qū)帶。用這種方法我們可以將沉降速度差為20%或者更大的顆粒。
2)等密度區(qū)帶離心法:這是將要分離的顆粒懸液放至密度梯度液上,或者實(shí)際上將顆粒溶于制作梯度的溶液中。通過離心,顆?;蛘呱细』蛘呦鲁?,達(dá)到與它們自己密度相同的液體處在這里它們沒有重量,不管離心多長(zhǎng)時(shí)間,它們?cè)僖膊灰苿?dòng)了。這些顆??沙蔀橐幌盗袇^(qū)帶,每種顆粒在它自己的密度區(qū)。所以,這是一種利用顆粒浮密度的大小分離顆粒大小的方法。使用的介質(zhì)通常是氯化銫(Cscl)和硫酸銫(Cs2SO4)。前者適合于DNA分離,后者適合于RNA分離。這種方法與速率區(qū)帶離心法相比,它有一個(gè)主要的缺點(diǎn)是在離心期間,顆粒不可避免地暴露在高濃度的梯度溶液中,會(huì)引起顆粒的部分損傷,并可能出現(xiàn)相當(dāng)于損傷顆粒的一些額外的區(qū)帶。
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等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。
很多購買實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的客戶第一次使用后都會(huì)反映一個(gè)問題那就是噪音過大的問題,關(guān)于這個(gè)問題大部分不是實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)質(zhì)量的問題造成的,具體有哪些原因造成實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)噪音過大呢?下面我們一起來分一下實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)使用中噪音過大的原因和實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)使用中噪音過大的解決辦法;
1)轉(zhuǎn)子沒有安裝好,一般小的機(jī)器都是廠家在出廠前安裝和調(diào)試好的沒有問題才發(fā)貨的,但是在運(yùn)輸過程中有可能造成轉(zhuǎn)子的活動(dòng)和輕度的移位,有可能造成使用過程中噪音過大,解決辦法是重新安裝轉(zhuǎn)子或者電話聯(lián)系廠家指導(dǎo)安裝;
2)轉(zhuǎn)子里的試管等沒有配平,特別是水平專子,一定要配平使用,不然也沒有可能造成不平的噪音過大;
3)位置沒有擺放好,有的離心機(jī)放置的桌子或者固定的位置高低不平,可能不是很明顯,但是稍微有點(diǎn)的話在高速轉(zhuǎn)動(dòng)下都會(huì)出現(xiàn)聲音增大的現(xiàn)象,所以可以的放置離心機(jī)的桌面上在放離心機(jī)之前底下放置一層厚厚的墊子這樣會(huì)減少很多的不平造成的噪音;
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離心機(jī)是利用離心力,分離液體與固體顆粒或液體與液體的混合物中各組分的機(jī)械。
離心機(jī)主要用于將懸浮液中的固體顆粒與液體分開,或?qū)⑷闈嵋褐袃煞N密度不同,又互不相溶的液體分開(例如從牛奶中分離出奶油);
它也可用于排除濕固體中的液體,例如用洗衣機(jī)甩干濕衣服;特殊的超速管式分離機(jī)還可分離不同密度的氣體混合物;
利用不同密度或粒度的固體顆粒在液體中沉降速度不同的特點(diǎn),有的沉降離心機(jī)還可對(duì)固體顆粒按密度或粒度進(jìn)行分級(jí)。
由于樣品組分的密度和沉降系數(shù)不同,離心分離后的樣品沉淀物會(huì)形成層狀結(jié)構(gòu)。只需要通過上清液傾出就可以實(shí)現(xiàn)離心過程。
離心設(shè)備實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)8000轉(zhuǎn)每分鐘。近些年出現(xiàn)的超速離心是超過萬轉(zhuǎn)/分鐘,它們被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)研究(醫(yī)用離心機(jī))、實(shí)驗(yàn)室研究(實(shí)驗(yàn)室離心機(jī))、化驗(yàn)室研究(化驗(yàn)室離心機(jī))、血液分離測(cè)試(血液離心機(jī)),可以從血漿中的分離出紅細(xì)胞和白細(xì)胞。
離心機(jī)在高速旋轉(zhuǎn)的過程中,由離心力所導(dǎo)致的運(yùn)動(dòng)使懸浮于液體中的固體物質(zhì)形成沉淀,也就是懸浮體液中質(zhì)量或體積較大的物體向轉(zhuǎn)頭半徑最大的方向移動(dòng),而質(zhì)量或體積較小的部分沉積在轉(zhuǎn)頭半徑較近的地方。
在離心過程中,乳濁液或懸浮液樣品被放置在一個(gè)厚壁離心管中,而離心管放置在離心機(jī)轉(zhuǎn)子上。
其特征在于通過轉(zhuǎn)子帶動(dòng)離心管快速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力的作用,樣品中的密度較高的成分會(huì)加速向離心管的底部沉降。
離心管成對(duì)放置,且容量不超過一半左右。這可以防止形成不平衡和樣品溢出。
上面我們提到了離心力這個(gè)概念。離心機(jī)就是一個(gè)產(chǎn)生離心力的機(jī)器,離心力與轉(zhuǎn)子半徑、轉(zhuǎn)速及樣品質(zhì)量有關(guān):
即F=Rmω2(F:離心力:R:半徑:m:樣品質(zhì)量:to:轉(zhuǎn)速),離心力是衡量離心機(jī)重要的參數(shù)之一,也是離心機(jī)檔次的區(qū)別標(biāo)準(zhǔn)之一, 離心機(jī)在出廠的時(shí)候都會(huì)給出該離心機(jī)的最大離心力。
我們都知道,轉(zhuǎn)子的半徑和樣品質(zhì)量在運(yùn)轉(zhuǎn)的時(shí)候是不變的,只有轉(zhuǎn)速可以通過控制發(fā)生變化,因此我們往往習(xí)慣用轉(zhuǎn)速來描述一個(gè)離心機(jī)。如:高速離心機(jī),超高速離心機(jī),低速離心機(jī)。