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等電聚焦電泳色譜儀的檢測(cè)方法 色譜儀操作規(guī)程

時(shí)間:2020-06-20    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子的等電點(diǎn)不同,在一個(gè)穩(wěn)定、連續(xù)和線性的pH梯度中進(jìn)行分離,檢測(cè)方法有染色法、掃描法和其它檢測(cè)方法。一、染



    等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子的等電點(diǎn)不同,在一個(gè)穩(wěn)定、連續(xù)和線性的pH梯度中進(jìn)行分離,檢測(cè)方法有染色法、掃描法和其它檢測(cè)方法。

    一、染色法:

    1、考馬斯亮藍(lán)染色法。

    2、銀染色法。

    3、同工酶染色法。

    4、專一蛋白染色法。

    5、熒光標(biāo)記以及免疫法。

    二、掃描法:

    激光光源強(qiáng)度大,單色性好,掃描IEFE區(qū)帶比較合適。

    操作程序和條件必須嚴(yán)格相同。

    三、其它檢測(cè)方法:

    1、電泳轉(zhuǎn)移法。

    2、雙向電泳法。

    3、滴定曲線分析法。






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等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。

  【中國(guó)儀器網(wǎng) 維修保養(yǎng)】長(zhǎng)假歸來(lái),不僅人員忙碌起來(lái),實(shí)驗(yàn)室中zui常用的色譜儀器也要進(jìn)入高強(qiáng)度的工作狀態(tài),在長(zhǎng)假開(kāi)始之時(shí)您是否做好了關(guān)機(jī)前的維護(hù)保養(yǎng)呢?如果沒(méi)有按照規(guī)范做好長(zhǎng)假前的關(guān)機(jī)維護(hù),就可能會(huì)導(dǎo)致儀器在節(jié)后伊始出現(xiàn)“長(zhǎng)假綜合癥”。做好了這些節(jié)前的維護(hù)工作,我們?cè)诠?jié)后將會(huì)省去許多煩心事,但是對(duì)于色譜儀,我們?nèi)匀灰凑找韵乱髞?lái)進(jìn)行節(jié)后的儀器開(kāi)機(jī)。
 
  液相色譜儀
 
  開(kāi)機(jī)順序:
 
  1.檢查溶劑托盤(pán)托盤(pán)上的溶劑是否足量,以溶劑液面超過(guò)過(guò)輸液管過(guò)濾頭5厘米以上為宜。
 
  2.檢查輸液管內(nèi)部有否氣泡,若有,應(yīng)及時(shí)通過(guò)排液閥排出。
 
  3.對(duì)溶劑(針對(duì)第1項(xiàng)看是否需要補(bǔ)充溶劑)和樣品進(jìn)行處理,過(guò)濾,脫氣。
 
  4.打開(kāi)主機(jī)電源,依次打開(kāi)檢測(cè)器,泵A,泵B,柱箱的電源。
 
  5.打開(kāi)電腦,開(kāi)啟色譜工作站。
 
  6.先在工作站中開(kāi)啟活塞泵,以所需的流動(dòng)相平衡系統(tǒng)(約需30min)。
 
  7.打開(kāi)氘燈,等待系統(tǒng)基線走穩(wěn),開(kāi)始進(jìn)樣檢測(cè)。
 
  離子色譜儀
 
  開(kāi)機(jī)順序:
 
  1、打開(kāi)氮?dú)饪傞y,將分壓調(diào)至0.2Mpa,再調(diào)節(jié)離子色譜儀上的減壓表指針為3~6 psi。
 
  2、打開(kāi)儀器電源。
 
  3、打開(kāi)AS-DV或AS-AP電源。
 
  4、開(kāi)啟電腦,啟動(dòng)儀器控制器。
 
  5、雙擊桌面上的變色龍圖標(biāo)進(jìn)入軟件。
 
  6、確認(rèn)儀器聯(lián)機(jī)狀態(tài)是否正常。
 
  氣相色譜儀
 
  開(kāi)機(jī)順序:
 
  1、開(kāi)機(jī)前要先打開(kāi)載氣、氦氣、空氣總閥的開(kāi)關(guān),檢查二次表的壓力一般都在0.6MPa(氦氣在0.2MPa)。
 
  2、儀器電源開(kāi)啟后要先通過(guò)自檢再打開(kāi)工作站,確認(rèn)每根柱子都要有流量之后再升溫做樣。
 
  3、氣密性檢查,如果氣路泄露,會(huì)導(dǎo)致儀器工作不穩(wěn)定或靈敏度下降甚至可能發(fā)生爆炸。
 
  4、檢測(cè)器:FID和TCD的檢測(cè),溫度要控制在室溫10℃到339℃,控溫溫度在±0.1℃。
 
  5、在主機(jī)控制面板上設(shè)定檢測(cè)器溫度、汽化室溫度、柱箱溫度,被測(cè)物各組分沸點(diǎn)范圍較寬時(shí),還需設(shè)定程序升溫速率,確認(rèn)無(wú)誤后保存參數(shù),開(kāi)始升溫。
 
  6、打開(kāi)氫氣發(fā)生器和純凈空氣泵的閥門(mén),氫氣壓力調(diào)至0.3~0.4Mpa,空氣壓力調(diào)至0.3~0.5Mpa,在主機(jī)氣體流量控制面板上調(diào)節(jié)氣體流量至實(shí)驗(yàn)要求;當(dāng)檢測(cè)器溫度大于100℃時(shí),按《點(diǎn)火》按鈕點(diǎn)火,并檢查點(diǎn)火是否成功,點(diǎn)火成功后,待基線走穩(wěn),即可進(jìn)樣。
 
  不同儀器有不同的開(kāi)機(jī)注意事項(xiàng),長(zhǎng)假歸來(lái)的實(shí)驗(yàn)室工作人員一定要詳細(xì)了解之后再去為色譜儀開(kāi)機(jī),不過(guò)相信在看過(guò)這篇文章之后,您將對(duì)如何為色譜儀開(kāi)機(jī)有了直觀的了解。

我們不應(yīng)該在儀器有故障反映時(shí)才想到應(yīng)該對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù),不僅要定期有目的地做,還要樹(shù)立一個(gè)觀念 , 維護(hù)與保養(yǎng)的一個(gè)重要作用就是保障保證一個(gè)良好的檢測(cè)狀態(tài),確保得到準(zhǔn)確的檢測(cè)數(shù)據(jù) , 影響分析儀器的可持續(xù)運(yùn)行有因素主要有:

  1.易損件清理更換不及時(shí);

  2.硬件使用不科學(xué);

  3.儀器本身選購(gòu)及配置不當(dāng);

  各種分析儀器從結(jié)構(gòu)、功能、應(yīng)用各方面差別極大,但是經(jīng)常出的問(wèn)題以及維護(hù)保養(yǎng)的方向還是有一定的共性。這種共性就是:“儀器本身各個(gè)固定部件很少出問(wèn)題,只有使用者經(jīng)常接觸到的地方才容易出故障”。

  下面分別就氣相色譜儀的常見(jiàn)故障及常用維護(hù):

安捷倫氣相色譜儀7890B

  部分:氣相色譜儀

  在使用氣相色譜儀時(shí)(以下主要以配有分流進(jìn)樣口和氫火焰檢測(cè)器的氣相色譜儀為例),使用者經(jīng)常做的對(duì)儀器結(jié)構(gòu)有改變的行為莫過(guò)于換柱了,雖然換柱和扎針一樣,都是氣相色譜工作者的基本功,但是,至少有一半的問(wèn)題與之相關(guān)。

  問(wèn)題1:漏氣

  進(jìn)樣墊漏氣,接柱的固定螺絲漏氣,尤其是使用填充柱而又采用硅石墨墊更會(huì)如此。如果用橡膠圈好些,但是不需用,需要定期更換。毛細(xì)柱由于采用石墨墊圈則漏氣問(wèn)題相對(duì)好些。

  問(wèn)題2:固定位置不準(zhǔn):

  這是制約靈敏度的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。填充柱由于是剛性的,尺寸形狀固定,在換裝時(shí),一般容易掌握。常出問(wèn)題的是毛細(xì)柱,由于其本身柔性,在進(jìn)樣口和檢測(cè)器內(nèi)的長(zhǎng)度完全由使用者個(gè)人掌握,如果把握不準(zhǔn),會(huì)成為制約實(shí)驗(yàn)效果的一個(gè)重要因素。不同公司儀器的裝柱尺寸是不同的,在使用不同襯管時(shí)也有很大區(qū)別。有些儀器提供了專用的測(cè)量工具,有些則沒(méi)有。

  問(wèn)題3:清理更換不及時(shí):

  這是硬件無(wú)故障而檢測(cè)狀態(tài)不好的主要原因,其具體表現(xiàn)就是污染,如,進(jìn)樣口襯管及玻璃棉污染,柱內(nèi)污染,檢測(cè)器污染,如果不及時(shí)更換或清洗,會(huì)造成基線不穩(wěn),靈敏度下降等現(xiàn)象。

  氣相色譜儀維修對(duì)策:

  定期清洗,定期更換,用檢漏液測(cè)漏,是常用但不是的處理方法。我覺(jué)得,的方法是狀態(tài)監(jiān)控,時(shí)刻觀察系統(tǒng)狀態(tài),發(fā)現(xiàn)問(wèn)題馬上判斷問(wèn)題再處理問(wèn)題。同一臺(tái)機(jī),同一根柱,在同流量,同柱頭壓下,應(yīng)該有基本一致的信號(hào)基線和差不多的穩(wěn)定時(shí)間,儀器狀態(tài)的不同問(wèn)題會(huì)有各種不同的反映。

  例 1 : 裝柱后,通上一定的流量,柱頭壓和平時(shí)不一樣。如果柱頭壓明顯比平時(shí)高,可能是柱頭堵塞。如果低,可能是漏氣或柱斷裂,漏氣可以在關(guān)閉柱箱風(fēng)扇后應(yīng)該能聽(tīng)到聲音,柱斷裂可以很容易看出來(lái)。

  例 2: 流量正常,柱頭壓正常,但基線信號(hào)明顯地低且穩(wěn)定奇快。這種現(xiàn)象在使用毛細(xì)柱時(shí)常發(fā)生,原因多半就是噴嘴堵塞。確定是否這個(gè)原因的方法就是進(jìn)空白溶劑,如果信號(hào)比平時(shí)低了很多,而且出峰時(shí)間又晚了一些,就基本就是這個(gè)原因,這時(shí)只能關(guān)機(jī)清洗。

  例 3 : 流量正常,柱頭壓正常,在三溫(OVEN,INJ,DET)到達(dá)設(shè)定值后,但基線信號(hào)明顯地偏高且不穩(wěn)定。這種情況多是污染。污染又分:進(jìn)樣口污染,柱污染,檢測(cè)器污染。確定是哪一種故障并不容易(有時(shí)還是交叉反應(yīng)),但是處理方法卻一致:停機(jī)-清洗-升溫烤。我建議每次清洗把檢測(cè)器和進(jìn)樣口都處理一下,畢竟耗時(shí)間的是降溫升溫。



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