微量移液器是進(jìn)行生化試驗(yàn)或分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的必備工具。它是一種在一定容量范圍內(nèi)可隨意調(diào)節(jié)的精密取液裝置,基本原理是依靠裝置內(nèi)活塞的上下移動(dòng),推動(dòng)按鈕帶動(dòng)推動(dòng)桿使活塞向下移動(dòng),排除活塞腔內(nèi)的氣體。松手后,活塞在復(fù)位彈簧的作用下恢復(fù)原位,從而完成一次吸液過程。
微量移液器的使用方法:
1、保持微量移液器垂直,將按鈕壓至段;
2、微量移液器頭浸入溶液,緩慢釋放按鈕;
3、保持微量移液器垂直,將微量移液器頭與容器壁接觸,慢慢壓下按鈕至段;
4、壓至第二段把溶液完全釋放出;
5、釋放按鈕回原狀。
微量移液器使用的注意事項(xiàng):
1、勿將微量移液器本體浸入溶液中。
2、吸取黏度高的試液,請先將微量移液器頭以刀片或剪刀將出口切大,并先行預(yù)潤后再吸取。
3、吸取酸液或具腐蝕性溶液后,請將微量移液器拆解開,各部位零件以蒸餾水沖洗干凈,擦干后再正確組合回復(fù)原狀。
4、微量移液器的任何部份切勿用火燒烤,亦不可吸取溫度高于70℃的溶液,避免蒸氣侵入腐蝕活塞。
5、套有微量移液器頭的微量移液器,無論微量移液器頭中是否有溶液,均不可平放,需直立架好。
6、若不小心使溶液進(jìn)入吸管柱內(nèi)時(shí),應(yīng)予以拆解,將活塞組件、吸管柱、O-ring、鐵氟龍墊等各部位以清水沖洗干凈后,再以酒精擦拭,擦干后再正確組合回復(fù)原狀。
7、定期自行以天平檢查準(zhǔn)確度,若有任何問題請送廠維修。
微量移液器的使用方法:
1、保持微量移液器垂直,將按鈕壓至段;
2、微量移液器頭浸入溶液,緩慢釋放按鈕;
3、保持微量移液器垂直,將微量移液器頭與容器壁接觸,慢慢壓下按鈕至段;
4、壓至第二段把溶液完全釋放出;
5、釋放按鈕回原狀。
微量移液器使用的注意事項(xiàng):
1、勿將微量移液器本體浸入溶液中。
2、吸取黏度高的試液,請先將微量移液器頭以刀片或剪刀將出口切大,并先行預(yù)潤后再吸取。
3、吸取酸液或具腐蝕性溶液后,請將微量移液器拆解開,各部位零件以蒸餾水沖洗干凈,擦干后再正確組合回復(fù)原狀。
4、微量移液器的任何部份切勿用火燒烤,亦不可吸取溫度高于70℃的溶液,避免蒸氣侵入腐蝕活塞。
5、套有微量移液器頭的微量移液器,無論微量移液器頭中是否有溶液,均不可平放,需直立架好。
6、若不小心使溶液進(jìn)入吸管柱內(nèi)時(shí),應(yīng)予以拆解,將活塞組件、吸管柱、O-ring、鐵氟龍墊等各部位以清水沖洗干凈后,再以酒精擦拭,擦干后再正確組合回復(fù)原狀。
7、定期自行以天平檢查準(zhǔn)確度,若有任何問題請送廠維修。
為了確保移液器的準(zhǔn)確度和精確度,應(yīng)根據(jù)具體使用情況進(jìn)行定期保養(yǎng)。特別是在使用腐蝕性溶劑后,應(yīng)該對移液器進(jìn)行清潔。通過這些簡單的清潔和保養(yǎng)方法,可適當(dāng)?shù)匮娱L移液器的使用壽命。
l、外部清洗
方法:根據(jù)使用情況,可以用洗潔精清洗,或用60%異丙醇消毒,然后用雙蒸水淋洗,晾干。
2、內(nèi)部清洗
一般密封圈無需維護(hù),活塞清洗或更換后需要涂上薄薄一層硅酮油脂移液器每日用完后,應(yīng)旋轉(zhuǎn)到最大刻度,讓彈簧恢復(fù)原形,有助于保持彈簧彈性。針對不同性質(zhì)的液體,有不同的清洗和保養(yǎng)方法。
水溶液和緩沖液用蒸餾水校準(zhǔn)移液器,結(jié)果非常準(zhǔn)確打開移液器,用雙蒸水沖洗污染的部分,可以在干燥箱中干燥,溫度不超過60~C。給活塞涂抹少量潤滑油潤滑油
無機(jī)酸/堿如果經(jīng)常移取高濃度的酸/堿液,可以偶爾用雙蒸水清洗移液器的下半支。可以使用帶有濾芯的吸嘴移液器中使用的塑料材料和陶質(zhì)活塞大都是耐酸耐堿材料(除了氫氟酸)。但酸/堿液的蒸氣可能會(huì)進(jìn)入移液器的下部,影響其性能,清潔方法同“水溶液”部分
具有潛在傳染性的液體為了避免污染,應(yīng)該使用帶有濾芯的吸嘴?;蛘呤褂谜蛑脫Q方法移取對污染的部分進(jìn)行121~C、20min高壓滅菌,或者將移液器下部浸入實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的消毒劑中。隨后用雙蒸水清洗,并用上述方法進(jìn)行干燥
細(xì)胞培養(yǎng)物為了保證無菌,應(yīng)使用帶有濾芯的吸嘴參照“具有潛在傳染性的液體”的清潔方法
有機(jī)溶劑密度與水不同,不許調(diào)節(jié)移液器;由于蒸汽壓高和濕潤行為的變化,應(yīng)快速移液;移液結(jié)束后,拆開移液器,讓液體揮發(fā)通常對于蒸氣壓高的液體,任其自然揮發(fā)的過程就足夠了,或者將下部浸人消毒劑中(確保浸人的液面不要超過密封圈彈簧位置,以避免受到液體腐蝕)。用雙蒸水清洗,并用上述干燥方法將其干燥
放射性溶液為了避免污染,應(yīng)該使用帶有濾芯的吸嘴,或者使用正向置換方法拆開移液器,將污染部分浸入復(fù)合溶液或?qū)S玫那鍧嵢芤?,用雙蒸水清洗,并用上述干燥方法將其干燥
核酸/蛋白質(zhì)溶液為了避免污染,應(yīng)該使用帶有濾芯的吸嘴,或者使用正向置換方法蛋白質(zhì):拆開移液儀,用去污劑清洗,清洗和干燥方法如上所述核酸:在氨基乙酸/鹽酸緩沖液(pH2.0)中煮沸10min(確保瓊脂糖凝膠電泳檢測不到DNA殘留),用雙蒸水清洗干凈,并用上述的干燥方法干燥,同時(shí)給活塞涂抹少量潤滑油
3、消毒
包括紫外消毒、高壓消毒。若移液器采用抗紫外線的高質(zhì)量材料做成,可以采用紫外消毒。高壓消毒分為整支移液器高壓滅菌消毒和半支高壓消毒。整支高壓滅菌消毒前需旋松連接部位,進(jìn)行部分拆卸和半支高壓消毒;下半支可以拆卸,進(jìn)行高壓消毒(121℃、20min),如有必要,將消毒部件在室溫下晾干,等到溫度徹底降低后再安裝。
4.從四個(gè)方面認(rèn)識(shí)微量移液器性能校驗(yàn)
微量移液器是一種移取微量液體的新型實(shí)驗(yàn)工具,是進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的必備工具。微量移液器主要包括手動(dòng)移液器和電子移液器兩種。微量移液器的容量規(guī)格范圍為0.1uL~5mL,滿足液體的取樣和轉(zhuǎn)移的需要。
微量移液器的性能校驗(yàn)一般有以下幾方面:
(一)氣密性檢測
移液器吸滿液體后,手持垂直放置15s,檢查吸嘴的尖頭有無液滴,如有,則說明漏氣。
(二)準(zhǔn)確性檢測
1.量程小于1uL,建議使用分光光度法檢測。將移液器調(diào)至目標(biāo)體積,然后移取染料溶液,加入一定體積的蒸餾水中,測定溶液的稀釋度(334nm或340nm),重復(fù)幾次移液操作,計(jì)算移液器的度。
2.量程大于1uL,可以用稱重法檢測。通過對水的稱重,轉(zhuǎn)換成體積(體積=質(zhì)量/密度),鑒別移液器的準(zhǔn)確性。由水的密度是隨著溫度交化而變化,且稱量天平本身度不符合檢測要求,檢測又大多在一個(gè)開放式空間操作,偏差在所難免。因面,此種稱量只能現(xiàn)場粗略地判斷移液器的確性進(jìn)一步的校準(zhǔn)必須在專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室操作進(jìn)行。
注意:稱重法實(shí)驗(yàn)室必備條件是高度靈做的分析天平(定期校準(zhǔn))、雙蒸水和稱量容器。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度(20℃時(shí)水的密度為0.0982g/cm3)。
(三)專業(yè)校準(zhǔn)
移液器經(jīng)過長期使用,彈簧的彈力會(huì)發(fā)生變形,加之本身又是塑料材質(zhì)不耐磨擦,因而就會(huì)產(chǎn)生誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準(zhǔn)確性,必須對移液器進(jìn)行定期校準(zhǔn)。為了更好地發(fā)揮該類計(jì)量儀器的作用,對新購進(jìn)的儀器要進(jìn)行校準(zhǔn)后才能使用:對正在使用的計(jì)量儀器,由于長期使用會(huì)造成示值與度量對象的誤差,這種誤差若不及時(shí)校正,必定會(huì)影響測試和科研工作,因此,對使用的移液器要定期檢定、校正,并建立檔案,只有這樣才能使移液器在日常工作中更好的發(fā)揮作用。
目前,在許多實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行的常規(guī)檢測并不能完全取代專業(yè)的校準(zhǔn)工作,因?yàn)樾?zhǔn)對于外部環(huán)境、工作條件及使用的精密儀器具有較高的技術(shù)要求,而這些條件往往是大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室無法提供的?,F(xiàn)在一些大型的移液器制造商均采用全球統(tǒng)一的移液器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范,通過計(jì)算機(jī)對分析天平的測量,數(shù)據(jù)采集、計(jì)算、結(jié)果評價(jià)等環(huán)節(jié)進(jìn)行在線控制,即利用專業(yè)軟件校正控制系統(tǒng)完成。也就是說所有的人為操作都被計(jì)算機(jī)記錄并隨報(bào)告打印出來,而電腦對數(shù)據(jù)的評估認(rèn)證也是在同期進(jìn)行并完成的,完全排除了人為操縱校準(zhǔn)結(jié)果的可能性。
(四)微量移液器的標(biāo)定
合格的移液器在使用一段時(shí)間后,由于敲打、磨損或液體吸入吸管柱內(nèi)等原因均有可能導(dǎo)致其度下降,因此需進(jìn)行標(biāo)定。移液器1年至少標(biāo)定1次。蒸餾水稱量法標(biāo)定移液器則是常用的方法。