雜散光是紫外可見分光光度計(jì)非常重要的關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)。它是紫外可見分光光度計(jì)分析誤差的主要來(lái)源, 它直接限制被分析測(cè)試樣品濃度的上限。當(dāng)一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)的雜散光一定時(shí), 被分析的試樣濃度越大, 其分析誤差就越大。“雜散光可能是光譜測(cè)量中主要誤差的來(lái)源。尤其對(duì)高濃度的分析測(cè)試時(shí), 雜散光更加重要”。有文獻(xiàn)報(bào)道, 在紫外可見光區(qū)的吸收光譜分析中, 若儀器有1%的雜散光, 則對(duì)2. 0a 的樣品測(cè)試時(shí), 會(huì)引起2%的分析誤差時(shí), 說(shuō)明儀器中有這種雜散光存在。但必須注意, 當(dāng)儀器存在零點(diǎn)誤差時(shí), 有可能造成混淆。如果在不透明的樣品上涂上白色, 則可增加樣品本身反射和散射的效果, 可以提高測(cè)量靈敏度。第二種形式是指測(cè)試波長(zhǎng)以外的、偏離正常光路而到達(dá)光電轉(zhuǎn)換器的光線。它通常是由光學(xué)系統(tǒng)的某些缺陷所引起的。如光學(xué)元件的表面被擦傷、儀器的光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計(jì)不好、機(jī)械零部件加工不良, 使光路位置錯(cuò)移等。
目前,國(guó)際上許多紫外可見分光光度計(jì)的雜散光都在0. 01% 以下。因此,我國(guó)的紫外可見分光光度計(jì)還需繼續(xù)努力。雜散光對(duì)分析測(cè)試結(jié)果的誤差影響是隨著吸光度值增大而增大的。因此,吸光度值越大, 對(duì)誤差的影響也越大。
眾所周知, 紫外可見分光光度計(jì)在制藥行業(yè)中使用較多。并且各國(guó)的藥典都明確要求許多藥品一定要用紫外可見分光光度計(jì)來(lái)分析測(cè)試。我國(guó)的藥典規(guī)定對(duì)人用藥品的檢測(cè)時(shí), 許多藥品的相對(duì)測(cè)試誤差都不能超過1%。如假設(shè)使用的紫外可見分光光度計(jì)的雜散光為0. 5% ,如果被檢測(cè)藥品的吸光度大于0. 5bs , 若為0. 8ab s , 則測(cè)量誤差就大于1% , 達(dá)到1. 42% , 就不符合我國(guó)藥典規(guī)定的相對(duì)誤差為1%的要求, 即不合格。由此可見, 不管是制造者還是使用者, 都必須高度重視對(duì)儀器雜散光的控制和選擇。
紫外可見分光光度計(jì)的日常維護(hù)和對(duì)主要技術(shù)指標(biāo)的簡(jiǎn)易測(cè)試方法,經(jīng)常對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)和測(cè)試,以保證儀器工作在較佳狀態(tài)。
一、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。
他們可以引起機(jī)械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降;造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕,產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等,甚至儀器停止工作,從而影響儀器壽命。維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正。應(yīng)具備四季恒濕的儀器室,配置恒溫設(shè)備,特別是地處南方地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室。
二、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也會(huì)影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性,也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔,保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件,防塵等。
三、紫外可見分光光度計(jì)使用一定周期后,內(nèi)部會(huì)積累一定量的塵埃,可以由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對(duì)內(nèi)部進(jìn)行除塵工作,同時(shí)將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固,對(duì)光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔,必要時(shí)對(duì)光路進(jìn)行校準(zhǔn),對(duì)機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤(rùn)滑,最后,恢復(fù)原狀,再進(jìn)行一些必要的檢測(cè)、調(diào)校與記錄。
紫外可見分光光度計(jì)注意事項(xiàng)和問題處理
1.開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
2.比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔,池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí),需選用石英比色皿。
3.測(cè)定時(shí),禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上,紫外可見分光光度計(jì)如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K,要盡可能及時(shí)清理干凈。
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理老師認(rèn)可方可離開。
紫外可見分光光度計(jì)問題處理:
1、如果儀器不能初始化,關(guān)機(jī)重啟。
2、紫外可見分光光度計(jì)如果吸收值異常,依次檢查:波長(zhǎng)設(shè)置是否正確(重新調(diào)整波長(zhǎng),并重新調(diào)零)、測(cè)量時(shí)是否調(diào)零(如被誤操作,重新調(diào)零)、比色皿是否用錯(cuò)(測(cè)定紫外波段時(shí),要用石英比色皿)、樣品準(zhǔn)備是否有誤(如有誤,重新準(zhǔn)備樣品)
可見分光光度計(jì)(又名可見光度計(jì)、分光光度計(jì))是可見光分光光度法是上海美析儀器采用較新的單片機(jī)技術(shù),開發(fā)出能夠進(jìn)行定量測(cè)量(標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)量,可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行濃度直讀);OD值直接測(cè)量(吸光度、透過率和能量等直讀);動(dòng)力學(xué)測(cè)試(測(cè)出物質(zhì)濃度隨時(shí)間變化OD值的變化);光譜掃描(可以對(duì)某一種物質(zhì)進(jìn)行全波段掃描,分析物質(zhì)的特征波長(zhǎng),判斷實(shí)驗(yàn)過程的誤差);多波長(zhǎng)測(cè)試(可以對(duì)物質(zhì)同時(shí)進(jìn)行多個(gè)波長(zhǎng)的測(cè)試,分析物質(zhì)的相關(guān)特性);還有可以進(jìn)行DNA/蛋白質(zhì)測(cè)試、總磷總氮測(cè)試、重金屬測(cè)試、農(nóng)藥殘留測(cè)試、食品安全檢測(cè)、熱力發(fā)電金屬離子測(cè)試等等,廣泛應(yīng)用于食品、藥品、電力、生物研究、教學(xué)科研、化學(xué)化工、質(zhì)量監(jiān)督、水質(zhì)環(huán)保和商檢等各大領(lǐng)域。V-1500PC型可見分光光度計(jì),波長(zhǎng)范圍:320nm-1100nm,能滿足不同物質(zhì)的測(cè)試。
可見分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng):
一、把電源線連接好,可以使儀器的電源具備接地功能;
二、接通電源后,按動(dòng)開機(jī)開關(guān),然后讓儀器預(yù)熱至少20分鐘,儀器會(huì)自動(dòng)校正,然后顯示546.0nm 0.000A說(shuō)明自檢結(jié)束,就可以開始測(cè)試;
三、使用“方式”鍵測(cè)試的方式,再根據(jù)自己要測(cè)量的結(jié)果選透光率、吸光度、和濃度的測(cè)試;
四、要對(duì)波長(zhǎng)進(jìn)行分析,選擇按鍵6,然后按提示依次進(jìn)行;
五、把樣品溶液和要測(cè)定的溶液各自倒入比色皿中后,然后打開樣品蓋,把盛著溶液的比色皿插入另一個(gè)比色皿中,最后蓋好樣品蓋;
六、把參比的溶液拉到光路中按住“OABS/100%T”鍵,這時(shí)的顯示器會(huì)顯示出BLANKING,,直到最后顯示出“100%T”或者是“0.000A”為止;
七、最后儀器顯示出“100%T”或者是“0.000A”即可結(jié)束測(cè)試。這時(shí)被測(cè)樣品的透光度、吸光度等參數(shù)就可直接讀出;
八、可見分光光度計(jì)使用完畢,關(guān)上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈。