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陽離子色譜柱的進(jìn)樣系統(tǒng)介紹 色譜柱工作原理

時(shí)間:2020-05-25    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
陽離子色譜柱是液相色譜的一種,是分析陰陽離子的一種液相色譜方法,該方法具有選擇性好、靈敏、快速、簡便等優(yōu)點(diǎn),并且可以同時(shí)測定多種組分。
 
陽離子色譜柱的進(jìn)樣系統(tǒng)
    離子色譜的進(jìn)樣主要分為3種類型:即氣動(dòng)、手動(dòng)和自動(dòng)進(jìn)樣方式。
一、手動(dòng)進(jìn)樣閥
    手動(dòng)進(jìn)樣采用六通閥,其工作原理與HPLC相同,但其進(jìn)樣量比HPLC要大,一般為50μL。樣品首先以低壓狀態(tài)布滿定量管,當(dāng)閥沿順時(shí)針方向旋至另一位置時(shí),即將貯存于定量管中固定體積的樣品送進(jìn)分離系統(tǒng)。
 
二、氣動(dòng)進(jìn)樣閥
    氣動(dòng)閥采用一定氦氣或氮?dú)鈿鈮鹤鲃?dòng)力,通過兩路四通加載定量管后,進(jìn)行取樣和進(jìn)樣,它有效地減少了手動(dòng)進(jìn)樣因動(dòng)作不同所帶來的誤差。
 
三、自動(dòng)進(jìn)樣
    自動(dòng)進(jìn)樣器是在色譜工作站控制下,自動(dòng)進(jìn)行取樣、進(jìn)樣、清洗等一系列操縱,操縱者只須將樣品按順序裝進(jìn)貯樣機(jī)中。圓盤式自動(dòng)進(jìn)樣的工作步驟如下:
(1)電機(jī)帶動(dòng)貯樣盤旋轉(zhuǎn),待分析樣品置于取樣針正下方。
(2)電機(jī)正轉(zhuǎn),絲桿帶動(dòng)滑塊向下移,把取樣針插進(jìn)樣品塑料蓋,滑塊繼續(xù)下移,將瓶蓋推進(jìn)瓶內(nèi),在瓶蓋擠壓下樣品經(jīng)管道流進(jìn)進(jìn)樣閥定量管,完成取樣動(dòng)作。
(3)進(jìn)樣閥切換,完成進(jìn)樣。
(4)電機(jī)反轉(zhuǎn),絲桿帶動(dòng)滑塊上移,取樣針恢復(fù)原位。
自動(dòng)進(jìn)樣可以達(dá)到很寬的樣品進(jìn)樣量范圍的目的。

關(guān)于液相色譜柱的選擇

    液相色譜柱,是一種用于液體色譜分析儀器的部件。那么我們該如何的去選擇液相色譜柱呢?

    下面我們就一起來看看吧。

    在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等,液相色譜柱決定最終分離效果,所以在選擇色譜柱時(shí)候有必要考慮清楚自己的需求。

    首先液相色譜柱目前來說分為正反相色譜柱,正相有SI等,反相有C18等。正相主要分離極性物質(zhì),反相主要分離非極性物質(zhì),氨基柱等主要分離二者之間的。

    明確了色譜柱大概功能之后,確認(rèn)下自己樣品信息,基本就有點(diǎn)眉目了,方向?qū)α?,剩下的事情就是?xì)節(jié)了如:鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量等

    1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱

    2.如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長;

    對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對(duì)試劑很難洗下來,基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))

    3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等);

    他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留

    4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡單;

    缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用;

    這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點(diǎn)是不能用來分析其它樣品,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。

標(biāo)簽: 液相色譜柱
液相色譜柱標(biāo)簽: 關(guān)于液相色譜柱的選擇_液相色譜柱組合標(biāo)題:

色譜柱種類介紹

  色譜柱色譜儀器中重要組成部分之一,它是分離不可缺少的一部分。因此不同的樣品分類,用到不同的色譜柱。

  色譜柱可簡單分為以下幾類:

  a、根據(jù)分離方式分為:

  (1)正相色譜柱:SIL--磷脂、NH--糖、維生素E,CN--甾類激素。

  (2)反相色譜柱:ODS(C18)、(C8CNTMSPheny1)低分子量化合物。

  (3)離子交換色譜柱等。

  b、根據(jù)所有的擔(dān)體材料分為三種:

  (1)硅膠型:機(jī)械強(qiáng)度高,易制成小顆粒,理論塔板數(shù)高。

  (2)聚合物型:在廣泛的PH值范圍內(nèi)穩(wěn)定。

  (3)羥基磷灰石型:對(duì)蛋白質(zhì)等生物高分子樣品有特殊的選擇性。

標(biāo)簽: 色譜柱
色譜柱 色譜柱種類介紹_色譜柱

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