美國(guó)nanodrop one光度計(jì)使用
Nanodrop是實(shí)驗(yàn)室中常見(jiàn)的分光光度計(jì)。與傳統(tǒng)需要比色皿的分光光度計(jì)相比,Nanodrop所需樣品的體積大大減少,只需要2 μL,同時(shí)也大大降低了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備以及清洗的時(shí)間。這些優(yōu)勢(shì)使得科研人員能夠在一分鐘內(nèi)檢測(cè)多個(gè)樣品。當(dāng)然如果你有更多的樣品,還嫌效率不夠高,你可以選擇應(yīng)用Nanodrop 8000系統(tǒng),它能夠同時(shí)檢測(cè)8個(gè)樣品。
Nanodrop能夠在包括紫外及可見(jiàn)光區(qū)域在內(nèi)的光譜范圍內(nèi)檢測(cè)樣品的吸光度信號(hào)。在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,需要在儀器的軟件內(nèi)設(shè)置檢測(cè)樣品的種類(lèi),包括蛋白質(zhì),DNA, RNA等。根據(jù)吸光度,能夠計(jì)算樣品的濃度。DNA及RNA 在260 nm處有吸收度,蛋白質(zhì)在280 nm處有吸收峰值。濃度與吸光度的對(duì)應(yīng)關(guān)系見(jiàn)下表。當(dāng)然表中濃度與吸光度對(duì)應(yīng)關(guān)系成立的前提是樣品必須具有很高的純度。樣品純度可以通過(guò)A260/280判定,其臨界值可參考下表。 大家可能注意到,RNA的A260/280比值要比DNA的值高一些,這是因?yàn)閴A基U的A260/280的比值要比堿基T的A260/280比值更高。
吸光度 | 樣品 | 樣品濃度 | 高純度樣品標(biāo)準(zhǔn)(A260/280 ) |
A260 =1 | 雙鏈DNA | 50 μg/ml | <1.8 |
單鏈DNA | 33 μg/ml | ||
單鏈RNA | 40 μg/ml | >2.0 | |
A280 = 1 | 蛋白質(zhì) | 1 mg/ml | <0.6 |
對(duì)Nanodrop檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生直接影響的因素就是樣品的純度。A260/280是檢測(cè)樣品純度的一個(gè)指標(biāo),但這個(gè)參數(shù)只衡量了蛋白質(zhì)與核酸之間相互污染的情況。沒(méi)有考慮DNA與RNA之間彼此污染以及其他物質(zhì)污染的情況,比如苯酚在270 nm附近具有較大的吸光值。
因此在利用Nanodrop檢測(cè)核酸濃度的時(shí)候,除了A260/280外,A260/230也是檢測(cè)樣品純度的一個(gè)指標(biāo),高純度DNA和RNA的兩個(gè)臨界值同樣是1.8以及2.0。A260/230在2.0-2.2之間是合理的數(shù)值。對(duì)于純的核酸,A260/230的值通常大于A(yíng)260/280的值。核酸提取過(guò)程中殘留的有機(jī)物通常會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。如果檢測(cè)結(jié)果顯示230nm處具有很大的吸光值,樣品很有可能被EDTA,碳水化合物或者硫氰酸胍等物質(zhì)污染了。
Nanodrop的檢測(cè)范圍。對(duì)于核酸來(lái)說(shuō),Nanodrop的檢測(cè)濃度范圍在2ng-15μg/μL之間。所以當(dāng)樣品的濃度很低時(shí),比如從單個(gè)或少量細(xì)胞中提取的DNA或RNA,利用Nanodrop來(lái)測(cè)量濃度可能就不適合了。這時(shí)需要考慮其他的核酸定量方法比如熒光染料的方法。
此款符合人體工程學(xué)的獨(dú)立式分光光度計(jì)具有高分辨率和觸摸屏界面設(shè)計(jì),使您離研究目標(biāo)更進(jìn)一步。 強(qiáng)大的自動(dòng)調(diào) 節(jié)光程技術(shù)有助于準(zhǔn)確測(cè)量濃縮樣品而無(wú)需稀釋。
Acclaro 樣品智能技術(shù)
Acclaro 技術(shù)可以在提供準(zhǔn)確的定量測(cè)定的同時(shí),增強(qiáng)用戶(hù)對(duì)樣品質(zhì)量的了解。 對(duì)污染物的早期鑒別能夠避免下游應(yīng)用的失敗,從而節(jié)省故障排除的時(shí)間。
在數(shù)秒內(nèi)驗(yàn)證樣品結(jié)果 - 鑒別樣品污染物并獲得矯正的濃度結(jié)果。
通過(guò)警報(bào)獲取信息 – 通過(guò)提供相應(yīng)的技術(shù)支持和解決問(wèn)題向?qū)В瑥亩@得樣品質(zhì)量的即時(shí)反饋。
依靠準(zhǔn)確結(jié)果——采用嵌入式傳感器和數(shù)字影像分析技術(shù),確保測(cè)量完整性。
NanoDrop One/NanoDrop OneC 特點(diǎn)
同時(shí)包含基座和比色皿檢測(cè)模塊,以擴(kuò)展實(shí)驗(yàn)靈活性和擴(kuò)大動(dòng)態(tài)范圍。
測(cè)量稀釋樣品,執(zhí)行動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)并獲取細(xì)菌培養(yǎng)物的光密度測(cè)量結(jié)果。
比色皿檢測(cè)模塊包括溫度控制和攪拌區(qū)域。
1、工作環(huán)境檢查:
1)放置要求:儀器應(yīng)平穩(wěn)的擺放在水平固定的桌面上。(因?yàn)榉止夤舛扔?jì)為精密光學(xué)儀器,在運(yùn)行的過(guò)程中如果桌面不穩(wěn),會(huì)影響其工作狀態(tài),且儀器處在工作狀態(tài)時(shí),燈絲處于高溫狀態(tài),此時(shí)如果有劇烈的震動(dòng)會(huì)導(dǎo)致燈絲折斷。)
2)溫度要求:工作環(huán)境的溫度在5-35度之間。(儀器在工作狀態(tài)時(shí)內(nèi)部較熱需要用儀器自身的散熱風(fēng)扇與外界空氣進(jìn)行熱交換散熱,如果外界溫度過(guò)高,會(huì)導(dǎo)致儀器內(nèi)部溫度過(guò)高,從而加速儀器電器件與燈的老化速度,從而影響儀器的使用壽命。)
3)濕度要求:工作環(huán)境的相對(duì)濕度不超過(guò)85%。(儀器內(nèi)部有很多電器元件與光學(xué)件,在濕度太高的情況下,電器件容易老化或燒壞,光學(xué)件表面的鍍鋁膜也容易發(fā)霉。)
4)空氣狀況:空氣中不應(yīng)有足以引起腐蝕的有害氣體和過(guò)多的塵土存在。
2、樣品室檢查:
1)在開(kāi)機(jī)之前,先要檢查樣品室中是否有比色皿或其他物品,因?yàn)閮x器在開(kāi)機(jī)后要進(jìn)行一系列的功能自檢,如果有物品放在樣品室中會(huì)導(dǎo)致自檢出錯(cuò)。
2)每次使用后應(yīng)檢查樣品室是否積存有溢出溶液,須經(jīng)常擦拭樣品室,以防止廢液對(duì)部件或光路系統(tǒng)的腐蝕。
3)在測(cè)試完成后,請(qǐng)及時(shí)將樣品從樣品室中取出,否則,液體揮發(fā)會(huì)導(dǎo)致鏡片發(fā)霉。對(duì)易揮發(fā)和腐蝕性的液體,尤其要注意!如果樣品室中有漏液,請(qǐng)及時(shí)擦拭干凈,否則會(huì)引起樣品室內(nèi)的部件腐蝕和螺釘生銹。
3、儀器的表面清潔:
儀器外殼表面經(jīng)過(guò)噴漆工藝處理過(guò),如果不小心將溶液漏灑在外殼上,請(qǐng)立即用濕毛巾擦拭干凈,杜絕使用有機(jī)溶液擦拭。如果長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí),請(qǐng)注意及時(shí)清理儀器表面的灰塵。
4、比色皿清洗:
在每次測(cè)量結(jié)束或溶液更換時(shí),您需要對(duì)比色皿進(jìn)行及時(shí)清洗,然后放在低濃度酸性溶液里浸泡,浸泡后用蒸餾水沖洗比色皿的內(nèi)外壁,否則比色皿壁上的殘留溶液會(huì)引起測(cè)量誤差。
5、電源檢查:
1)插電源插座時(shí),請(qǐng)檢查當(dāng)前電壓是否與儀器標(biāo)識(shí)的電壓一致。
2)因?yàn)楦鱾€(gè)地區(qū)電網(wǎng)的質(zhì)量差異很大,所以為了使儀器運(yùn)行得更穩(wěn)定和更可靠,建議給儀器外配一個(gè)穩(wěn)壓器。
3)儀器不用時(shí)請(qǐng)關(guān)機(jī),并拔掉電源插頭,以防止實(shí)驗(yàn)室的電源地線(xiàn)不好,而導(dǎo)致在雷雨天氣時(shí)損壞儀器。
6、提示:
為縮短自檢時(shí)間,儀器在開(kāi)機(jī)時(shí)所進(jìn)行的自檢只是對(duì)一些常規(guī)的項(xiàng)目進(jìn)行檢查。而儀器在運(yùn)輸、搬運(yùn)與使用一段時(shí)間后(一般一個(gè)月)會(huì)導(dǎo)致結(jié)構(gòu)件累計(jì)誤差的產(chǎn)生,所以我們建議用戶(hù)在出現(xiàn)上述情況或感覺(jué)儀器測(cè)試數(shù)據(jù)與經(jīng)驗(yàn)值相差較大時(shí),應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行一次波長(zhǎng)校正和暗電流校正。(具體操作方法見(jiàn)本手冊(cè)中的“系統(tǒng)應(yīng)用”一節(jié))
熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域。 可見(jiàn)分光光度計(jì)具有透射比,吸光度,濃度直接測(cè)定,有自動(dòng)調(diào)0%τ,100%τ功能.能選配5cm光徑比色架及2.3.5cm矩形比色皿擴(kuò)大測(cè)定范圍.可選配PC軟件包,經(jīng)RS232C聯(lián)結(jié)PC機(jī),打印機(jī)實(shí)施功能擴(kuò)大.廣泛應(yīng)用于治金、治藥、食品工業(yè)、醫(yī)藥,衛(wèi)生,化工,學(xué)校,生物化學(xué),石油化工,質(zhì)量控制,環(huán)境保護(hù)及科研實(shí)驗(yàn)室等化學(xué)分析等 原子吸收分光光度計(jì)為冶金、地質(zhì)環(huán)保、食品、醫(yī)療、化工、農(nóng)林等行業(yè)的材料分析及質(zhì)量控制部門(mén)進(jìn)行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具,是生產(chǎn)、教育、科研單位分析實(shí)驗(yàn)室的比備常規(guī)儀器之一。 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)該儀器操作簡(jiǎn)單、功能完善、可靠性高,在國(guó)內(nèi)居比較好水平。該儀器操作簡(jiǎn)單、功能完善、可靠性高,可廣泛用于藥品檢驗(yàn)、藥物分析、環(huán)境檢測(cè)、衛(wèi)生防疫食品、化工、科研等領(lǐng)域?qū)ξ镔|(zhì)進(jìn)行定性、定量分析。是生產(chǎn)、科研、教學(xué)的必備儀器。 紅外分光光度計(jì). 一般的紅外光譜是指2.5-50微米(對(duì)應(yīng)波數(shù)4000--200厘米-1)之間的中紅外光譜,這是研究研究有機(jī)化合物常用的光譜區(qū)域。紅外光譜法的特點(diǎn)是:快速、樣品量少(幾微克-幾毫克),特征性強(qiáng)(各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。紅外光譜儀是化學(xué)、物理、地質(zhì)、生物、醫(yī)學(xué)、紡織、環(huán)保及材料科學(xué)等的重要研究工具和測(cè)試手段,而遠(yuǎn)紅光譜更是研究金屬配位化合物的重要手段。