在食品分析中，無論是殘留分析還是成分分析，HPLC 也已成為不可或缺的。流動(dòng)相脫氣是HPLC 系統(tǒng)能得到可靠數(shù)據(jù)的一個(gè)很有效的措施。下面分析一下，高效液相色譜脫氣的必要性，并總結(jié)歸納了脫氣常用的方法。
一、脫氣的必要性
流動(dòng)相脫氣是HPLC 系統(tǒng)能得到可靠數(shù)據(jù)的一個(gè)很有效的措施。HPLC 泵在輸送液體時(shí)要產(chǎn)生很大的力量，由于氣體的壓縮比與液體相比大的多，因而當(dāng)氣泡存在時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)瞬間的流速降低和系統(tǒng)壓力下降。如果這個(gè)氣泡足夠大，液相泵將不能輸送任何溶劑，而且如果壓力低于預(yù)先設(shè)定的壓力低限，泵將停止工作。當(dāng)一個(gè)氣泡通過輸液泵時(shí)，由于系統(tǒng)壓力大，氣泡通常會(huì)溶解在流動(dòng)相溶液中，隨流動(dòng)相通過柱子。但是到達(dá)檢測(cè)器流通池時(shí)系統(tǒng)壓力又恢復(fù)到了大氣壓，因而氣泡可能在檢測(cè)器流通池中又顯現(xiàn)，在色譜圖上會(huì)出現(xiàn)不規(guī)律的毛刺。
二、脫氣方法
1、吹氦脫氣法。
利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性，在0.1MPa 壓力下，以約60 mL/min 流速通入流動(dòng)相儲(chǔ)液容器中10～15min，可以很有效地從流動(dòng)相中排除溶解的空氣，能排除接近80%的氧氣。采用一個(gè)高效分布式噴射流裝置，一體積的氦氣可從流動(dòng)相中將等體積的幾乎全部氣體排除。這意味著1L 氦氣通過1L 流動(dòng)相就可完成排氣這個(gè)工作。這種脫氣方法雖然好，但氦氣價(jià)格較高，很少使用。
2、加熱回流法。
此法的脫氣效果較好。在操作時(shí)要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會(huì)丟失，混合流動(dòng)相的比例會(huì)有變化。
3、抽真空脫氣法。
此法可使用真空泵，降壓至0.05～0.07MPa ，即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會(huì)使混合溶劑組成發(fā)生變化，從而影響到實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性，因此多用于單溶劑體系的簡(jiǎn)單分析。
4、超聲波脫氣法。
將欲脫氣的流動(dòng)相置于超聲波清洗機(jī)中，用超聲波震蕩10～20min。此法的脫氣效果最差。
液相色譜儀分析中柱平衡慢的常見原因是組分在舊的或新的流動(dòng)相中對(duì)柱吸附強(qiáng)度差異較大。要進(jìn)行一種特殊的分析，或者從一種方法改為另一種方法，需要很長(zhǎng)時(shí)間平衡?？煽紤]采用專用柱用于特殊的方法，不用時(shí)將柱拆下來，注滿適當(dāng)?shù)娜軇┗蛄鲃?dòng)相，密封保管，不再做其它的分析。 1、胺改良劑 胺改良劑如三乙胺，通常加在反相或離子對(duì)流動(dòng)相中，以減少樣品中破性組分的拖尾。常用1mmol/L~10mmol/L的濃度，平衡時(shí)間較長(zhǎng)。如果一開始就用高濃度的胺，可使柱很快達(dá)到平衡?！ ?、離子對(duì)試劑 季胺類離子對(duì)試劑，如四丁基銨離子（TBA）沖掉比較慢。用50~100倍柱體積的流動(dòng)相通過柱后，酸性組分的保留仍然變化?？梢缘霓k法用中間洗液：含100mmol/L~200mmol/L緩沖液或鹽的甲醇-水。顯然，要最后去掉痕量的TBA，需用強(qiáng)流動(dòng)相，加緩沖液是為了競(jìng)爭(zhēng)在酸性硅酸基質(zhì)上的TBA，產(chǎn)生離子交換作用?！ 姆聪嘀舷慈ラL(zhǎng)鏈陰離子對(duì)試劑，非常慢，想要完全除去是不可能的，甚至用100%的甲醇也不行。分析陽離子溶質(zhì)其保留一直不斷漂移，一定要用長(zhǎng)鏈離子對(duì)時(shí)，可以選用專用柱?！ ?、硅膠柱 用硅膠柱作正相分離，常發(fā)生保留突然改變，或增加或減少。其原因是流動(dòng)相改變時(shí)相應(yīng)的改變了水的含量，使硅膠柱的含水量變化。用水脫活，硅膠柱保留時(shí)間會(huì)減少很多?！ ?、四氫呋喃作流動(dòng)相 在反相流動(dòng)相中，加四氫呋喃（THF）不會(huì)影響到柱平衡。THF的性質(zhì)類似于甲醇或乙腈，但對(duì)某些種類的樣品也有偶然例外，如分離水溶性的維生素，從含THF變成無THF的流動(dòng)相，約需半天時(shí)間才能使柱平衡，這也證實(shí)該效應(yīng)對(duì)其它類別的樣品的影響。
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