氣相色譜儀是指將分析樣品在進樣口中氣化后,由載氣帶入色譜柱,通過對欲檢測混合物中組分有不同保留性能的色譜柱,使各組分分離,依次導入檢測器,以得到各組分的檢測信號的儀器。
氣相色譜儀除一般用于對樣品定量和定性分析外,還能測定樣品在固定相上的分配系數(shù)、活度系數(shù)、分子量和比表面積等物理化學常數(shù)。
氣相色譜儀在使用中應(yīng)注意三個重要方面的因素:
1、氣相色譜儀氣體純度的因素:
氣相色譜儀使用氣源的純度要求必須在99.99%以上,但是許多操作者對于不同氣相色譜儀檢測器要求不同氣源純度的情況沒有足夠的重視。在使用中,有可能因氣源純度不夠而導致氣相色譜儀檢測器檢測基線和限高不穩(wěn)定。例如使用純度為98%的氫氣作為氣相色譜儀檢測器的燃氣氣源,在檢測器的104MΩ靈敏度擋位上使用時,可能由于氫氣純度不夠而導致測器檢基線嚴重不穩(wěn),就好像有永遠顯示不完的波峰。載氣純度不高含有微量氧時就會影響到毛細管柱的使用壽命。
2、氣相色譜儀氣流比例的選擇的因素:
在使用氣相色譜儀FID氫火焰離子檢測器對樣品進行分析時,需要N2-H2-Air火焰被點燃后轉(zhuǎn)化為富氧焰,即空氣應(yīng)該過量以確保氫氣完全燃燒,三種氣體的較佳比例為Air:H2=6~8、:1,N2:H2=1:0.85~1、或空氣量應(yīng)該更大。在此條件下的檢測器穩(wěn)定性和靈敏度高,能夠保證作出的定量校正因子可靠。
3、環(huán)境條件的因素:
氣相色譜儀對溫度環(huán)境的要求并不特殊,一般在5~35℃的室溫條件下即可滿足操作要求,對于濕度環(huán)境一般要求在20%~85%為宜。在高濕度的地區(qū),使用某些型號的氣相色譜儀價格時,會因為環(huán)境濕度大而導致儀器的絕緣性能下降,若在高靈敏度擋位操作響應(yīng)值則會下降。工作人員在使用儀器時遇到上述現(xiàn)象應(yīng)該采取必要的措施。
高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現(xiàn)對試樣的分析。
高效液相色譜法:
特指一種用液體為流動相的色譜分離分析方法。它在經(jīng)典色譜理論的基礎(chǔ)上,采用了高壓泵、化學鍵合固定相高效分離柱、高靈敏專用檢測器等新實驗技術(shù)建立的一種液相色譜分析法。
高壓:150-350*105Pa
高效:大于30000塔板/米
高靈敏:10-9g(紫外檢測)、10-11g(熒光檢測)
液相與氣相色譜儀的區(qū)別:
1、分析對象的區(qū)別
GC:適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點較低的樣品;但對高沸點、揮發(fā)性差、熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣品,尤其對大多數(shù)生化樣品不可檢測占有機物的20%
HPLC:適于溶解后能制成溶液的樣品(包括有機介質(zhì)溶液),不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,對分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分子和離子型樣品均可檢測用途廣泛,占有機物的80%
2、流動相差別的區(qū)別
GC:流動相為惰性,氣體組分與流動相無親合作用力,只與固定相有相互作用。
HPLC:流動相為液體,流動相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對分離起正向作用。且流動相種類較多,選擇余地廣,改變流動相極性和pH值也對分離起到調(diào)控作用,當選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動相也可以增大分離選擇性。
3、操作條件差別
GC:加溫操作
HPLC:室溫;高壓(液體粘度大,峰展寬?。?/p>