2.長(zhǎng)期保存色譜柱:
如色譜柱要長(zhǎng)時(shí)間保存,必須存于合適的溶劑下。對(duì)于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲(chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲(chǔ)存于水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上。儲(chǔ)存的溫度好是室溫。
在液相色譜操作過程中,我們需要下面的問題,方便維護(hù)液相色譜柱。 A柱子在裝卸、更換時(shí),動(dòng)作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng),以免柱床產(chǎn)生空隙。 B.如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱,這樣有助于延長(zhǎng)柱子的壽命。 C.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使液相色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。 D.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?nbsp; E.如使用柱溫控制裝置時(shí),應(yīng)注意在通人流動(dòng)相后才能升溫。 F.一般說來液相色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效。 G.選擇使用適宜的流動(dòng)相,以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一個(gè)預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。 H.避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。 I.經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗液相色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50-75mL。 J.保存液相色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對(duì)禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長(zhǎng)時(shí)間。 K.液相色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi),使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。 L.在完成分離分析工作之后,不能馬上就關(guān)機(jī),需及時(shí)對(duì)色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,一般0.5h以上,以除去液相色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
色譜儀為進(jìn)行色譜分離分析用的裝置。下面小編給大家介紹下液相色譜和離子色譜具體是指什么? 液相色譜 1.高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography簡(jiǎn)稱HPLC)又稱高速或高壓液相色譜。該方法是吸收了普通液相層析和氣相色譜的優(yōu)點(diǎn),經(jīng)過適當(dāng)改進(jìn)發(fā)展起來的。它既有普通液相層析的功能(可在常溫下分離制備水溶性的物質(zhì)),又有氣相色譜的特點(diǎn)(即高壓,高速,高分辨率和高靈敏度);它不僅適應(yīng)于很多不易揮發(fā),難熱分解物質(zhì)的定性和定量分析,而且也適用于上述物質(zhì)的制備和分離?! 「咝б合嗌V按其固定相的性質(zhì)可分為高效凝膠色譜,疏水性高效液相色譜,反相高效液相色譜高效離子交換液相色譜,高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類型。用不同類型的高效液相色譜分離或分析各種化合物的原理基本上與相對(duì)應(yīng)的普通液相層析的原理相似。其不同之處是高效液相色譜靈敏,快速,分辨率高,重復(fù)性好,且須在色譜儀中進(jìn)行。 2.離子色譜 離子色譜是高效液相色譜的一種,是分析陰陽離子的一種液相色譜方法,該方法具有選擇性好、靈敏、快速、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),并且可以同時(shí)測(cè)定多種組分?! ⊥ǔG闆r下,離子色譜可以分為三種類型:離子交換色譜、離子排斥色譜、離子對(duì)色譜?! ?.離子交換色譜 離子交換色譜以離子間作用力不同為原理,主要用于有機(jī)和無機(jī)陰、陽離子的分離。 4.離子排斥色譜 離子排斥色譜基于Donnan排斥作用,是利用溶質(zhì)和固定相之間的非離子性相互作用進(jìn)行分離的。它主要用于無機(jī)弱酸和有機(jī)酸的分離,也可以用于醇類、醛類、氨基酸和糖類的分離。