振蕩培養(yǎng)箱9大操作注意事項
振蕩培養(yǎng)箱是一種植物,生物,微生物,遺傳,病毒,醫(yī)學,環(huán)保,食品,石油,化工等科研,教育和生產(chǎn)部門作霉菌、微生物的培養(yǎng)及育種試驗等精密培養(yǎng)制備不可缺少的實驗室設備。上海巴玖溫馨提示用戶振蕩培養(yǎng)箱在使用過程中需要注意的事項有哪些：
1、本設備在正常運行時，箱內(nèi)載物擺放應不影響空氣流通，以保證箱內(nèi)溫度均勻。
2、在使用過程中，嚴禁將手指伸入上下運動的間隙中。整機嚴禁在陽光直射的環(huán)境中使用。
3、振蕩培養(yǎng)箱在使用制冷時，環(huán)境溫度應低于32℃，環(huán)境溫度在25℃以上使用制冷時，開門次數(shù)應盡量減小。
4、插座的電氣額定參數(shù)應不小于本機的電氣額定參數(shù)并有良好的接地措施。
5、更換保險絲時，應將插頭從插座中拔出。電線或電氣設備故障后，應有專業(yè)人士修理。
6、加熱物體應先在環(huán)境溫度下冷卻后，再放入機器內(nèi)，嚴禁將加熱物體直接放入制冷培養(yǎng)箱中，以防產(chǎn)生危險。
7、設備的搬動要平行移動，任何一方向傾斜角應小于45度。
8、箱壁內(nèi)膽和設備表面要經(jīng)常擦拭，以保持清潔。擦洗機器時，應先拔掉電源。
9、振蕩培養(yǎng)箱長期不用，應撥掉電源線，以防止設備帶電傷人。并應定期(一般一季度)按使用條件運行2-3天，以驅除電氣部件的潮氣，避免損壞有關器件。
智能光照培養(yǎng)箱采用先進的微電腦可編程控制方式，可設置氣候箱的多項參數(shù)（溫度、濕度、光照度等）來模擬自然氣候；
微電腦智能液晶控制系統(tǒng)，溫度，濕度、光照度控制精確可靠，30段程序控制，每段設置時間范圍1-99小時。
雙門結構雙層密封，外門采用磁性膠條密封，內(nèi)置超大鋼化玻璃門與箱體采用硅膠條密封；
整體通透美觀，方便觀察箱內(nèi)物品的變化而不影響溫度的變化。
在使用智能光照培養(yǎng)箱時，應注意維護和保養(yǎng)：
1、培養(yǎng)箱外殼應可靠接地。
2、培養(yǎng)箱要放置在陰涼、干燥、通風良好、遠離熱源和日曬的地方。
放置平穩(wěn)，以防震動發(fā)生噪音。
3、為保證冷凝器有效地散熱，冷凝器與墻壁之間距離應大于100mm。
箱體側面應有50mm間隙，箱體頂部至少應有300mm空間。
4、培養(yǎng)箱在搬運、維修、保養(yǎng)時，應避免碰撞，搖晃震動；傾斜度小于45度。
5、儀器突然不工作，請檢查熔絲管(箱后)是否燒壞，檢查供電情況。
6、本培養(yǎng)箱制冷工作時，不宜使箱內(nèi)溫度與環(huán)境溫度之差大于25度。
二氧化碳培養(yǎng)箱是進行細胞培養(yǎng)的必要設備，那么在培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗是我們可以借鑒的呢？下面讓我們一起來看一下。
1、啟蒙老師的重要性
一般進實驗室都有師兄師姐帶著做，他們就是你做細胞的啟蒙老師。他們的操作手法、細節(jié)、理論講解就成了你操作的準則，如營養(yǎng)液、細胞瓶的擺放位置；滅菌處理程序；開蓋手法；細胞吹打手法等等。要學會他們的正確操作，在第一次的時候就要重視。
2、像養(yǎng)孩子一樣養(yǎng)細胞
細胞真的很脆弱，可以每天都去看看它，以防止出現(xiàn)培養(yǎng)箱缺水、缺二氧化碳、停電、溫度不夠等異?，F(xiàn)象，也好及時解決這些意外，避免重復實驗帶來的更大痛苦。
3、好細胞要及時保種
細胞要分批傳代，這樣即使有一批出了問題，還有一批備用的。像后者一般人可能不容易做到。有一次細胞污染了，全軍覆沒。當時可后悔沒有保種。
4、每種細胞都有自己的特性
細胞跟人一樣，不同的細胞，培養(yǎng)特性是不一樣的。培養(yǎng)過程中要細細體會。不同細胞株使用不同的培養(yǎng)基和血清。
如平滑肌細胞很活躍，喜歡熱鬧，2~3 天就好多人口，而且不太愛吃喝，真是可以養(yǎng)的孩子了。內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞性格相近，不過它很不講衛(wèi)生，也很邋遢，里面有很多分泌屋，要經(jīng)常換洗才行。RAW264.7 細胞也很開朗，而且很能吃，要經(jīng)常喂它，頭疼的是細胞很容易活化，培養(yǎng)它的瓶子和環(huán)境沒有內(nèi)毒素才好。
5、培養(yǎng)前的工作準備充分
包括耗材的處理、試劑的配置，無菌檢驗等等。
玻璃器皿的清洗。對于玻璃器皿（細胞瓶、裝營養(yǎng)液的瓶子、小青霉素瓶等）要先用洗衣粉刷干凈（注意死角），然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上，之后用清水沖洗 10 遍，除去殘留酸液。瓶子之類，沖洗過程要使勁搖晃。然后在雙蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎，160℃ 干烤 2 h 待用。
試劑配置。細胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可。并注意 pH 值的調節(jié)。
無菌檢驗。主要采用過濾除菌：如胰酶、抗生素、G-418 溶液、各類培養(yǎng)基、丙酮酸鈉、谷氨酰胺等。有些可以采用高壓滅菌：如 PBS、D-Hank's等。
6、試劑分裝保存
包括營養(yǎng)液、胰酶、血清等。
血清特別重要。血清必須貯存于 –20℃，如果一次無法用完一瓶，可將 40～50ml 分裝于無菌酸處理瓶中，甚至置青霉素瓶保存。一般廠商提供的血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。（一般情況下不影響細胞培養(yǎng)）
瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。
熱滅活是指 56℃，30 分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到 56℃后，將血清放入，待溫度升高到 56℃ 后計時，一般 5 分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清（包括不同批次）對細胞的影響。
7、無菌意識要強
實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射 30 分鐘滅菌，以 70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。
每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以 70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面。
無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以 70% 乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。
小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約 45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
8、選擇正確的培養(yǎng)基
不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用 neurobase 培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。
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