流動相相當于液相的血液，可以想象對液相的重要程度。那么流動相都需要注意什么呢?　　01、過濾溶劑　　溶劑在使用前一定要用0.5μm的過濾器過濾，如果使用固體化學試劑(緩沖鹽)配制流動相，過濾特別重要，不能讓固體微粒污染泵，阻塞進樣器和柱頭過濾片。本實驗室有水溶性和脂溶性兩種過濾膜供選擇(反光面朝上)，過濾水溶性流動相時(如甲醇/水)，先用1～2mL甲醇潤濕過濾膜，有助于快速抽濾?！　?2、保持儲液瓶的清潔　　用普通溶劑瓶作流動相儲液器應不定期廢棄瓶子，最后一次應用HPLC級的水或溶劑清洗，不能在清洗過程中留下污跡?！　?3、保證溶劑的質量　　一定要用HPLC級的溶劑，水也應達到HPLC級，同樣也要使用高純度的緩沖鹽。　　一些因流動相引起的常見問題　　01、流動相脫氣不充分　　流動相受熱，或者流動相不同組分混合時會有氣體產(chǎn)生，氣泡進入泵內引起壓力波動，增加噪音，色譜圖上出現(xiàn)毛刺?？稍囉孟铝蟹椒ń鉀Q問題：流動相再脫氣;采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用;改系統(tǒng)內混合為系統(tǒng)外預混合?！　?2、流動相供給不暢　　流動相用完，管道中吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn)。應經(jīng)常觀察儲液器中流動相的量，加足流動相保證所有的樣品分析完畢。輸液管道上裝沉子沉至瓶底，儲液器蓋上留一小孔正好夾住進液管，使其不能上下移動?！　∵^濾器阻塞引起管道和泵腔空化，壓力不穩(wěn)。過濾器被微粒所阻塞或長霉，去掉過濾器后如果系統(tǒng)運轉正常，說明已找出問題，換上新的過濾器則可。有時候換上新的過濾器仍然不暢，那就需要查查流動相的制備過程，或者換大孔徑的過濾器。不管如何，流動相都需要重新過濾?！　×魉龠^高、阻力大，造成空化現(xiàn)象，這是由于過濾器孔徑、管道內徑、流速和溶劑黏度等引起的。如果流速大于10mL/min，常會出現(xiàn)這種現(xiàn)象?！　∈褂孟铝蟹椒ń鉀Q：　　(1)使用低流速;　　(2)換大孔徑的過濾器;　　(3)增加進液管道內徑;　　(4)抬高或加壓儲液器;　　(5)不用過濾器，但流動相一定要先過濾;　　(6)儲液器蓋子太緊，在儲液器內形成真空，打出的流動相不連續(xù)。應松開蓋子或留有1mm的縫隙;　　(7)進液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液，注意調整進液管道或更換新的。其它問題包括滲漏或接頭松動、泵部件損壞等，都能引起供液不正常?！　?3、流動相和儲液器被污染　　由于污染，噪音越來越大，檢測器基線上升。污染物可能被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統(tǒng)，而再以穩(wěn)定的濃度流出來，所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時弱流動相可以使污染物聚在柱頂，流動相強度增加后污染物可能被洗脫出來一個大的偽峰。有時基線噪音突然增大或突然提高，都是因為反復加進新的流動相或系統(tǒng)用得太久(通宵)所造成的。新加進的流動相有污染物或者流動相長霉，繁殖了細菌。　　臟的儲液器會污染清潔的流動相。每種流動相備有專用的儲液器，或者定期報廢儲液器?！　×鲃酉辔廴緛碜赃@幾個方面　　04、試劑質量不高，玻璃器皿不合格;　　微生物的影響;　　配制流動相時操作不當?shù)?　　因此要求高純度化學試劑和HPLC級溶劑;　　玻璃器皿按規(guī)定清洗干凈;　　為防止微生物生長，每天要用甲醇清洗系統(tǒng);　　懷疑系統(tǒng)內生長了微生物，可用稀硝酸沖洗即可(注意不要損壞柱和管道系統(tǒng));　　真空脫氣時防止泵油帶入流動相;　　用清潔的惰性塞子、攪棒、過濾器和玻璃器皿配制流動相;　　已經(jīng)污染的流動相一定要廢棄掉。