一、樣品預(yù)處理的重要性:
1、樣品預(yù)處理所用時間遠大于色譜分離時間。
2、消耗大量的溶劑和其它化學品,占分析消耗總成本最大。
3、樣品預(yù)處理是實驗的重復(fù)性和準確性最差的環(huán)節(jié),是影響實驗結(jié)果好壞的重要因素。
二、樣品預(yù)處理的目的:
1、除去微粒,減少干擾雜質(zhì)。
2、濃縮微量組分。
3、提高檢測的選擇性和靈敏度。
4、改善分離效果。
5、有利于色譜柱和儀器的保護。
6、使樣品形式和所用溶劑符合HPLC的要求。
三、樣品預(yù)處理達到的要求:
1、樣品全部轉(zhuǎn)化為低濃度溶液。
2、樣品溶液洗脫強度低于流動相,與流動相相溶。
四、樣品預(yù)處理的原則:
1、在樣品預(yù)處理過程中,盡可能防止和避免與待測組分發(fā)生化學反應(yīng)。
2、在樣品預(yù)處理過程中,如果與待測組分進行化學反應(yīng),那么這一反應(yīng)必須是已知的,而且可以定量的完成。
3、在樣品預(yù)處理過程中,要防止和避免待待測組分被玷污,盡可能減少無關(guān)化合物引入制備過程。
4、樣品的處理過程應(yīng)盡可能簡單易行,所采用的樣品處理裝置尺寸應(yīng)與樣品處理量相適應(yīng)。
5、采樣之后應(yīng)盡可能快的進行樣品的分析測定,或使用合適的方法消除可能的變化和干擾。
五、樣品預(yù)處理方法:
1、過濾、離心:
常用的濾膜材質(zhì)有纖維素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺應(yīng)用廣泛。
2、加速溶劑萃取:
加速溶劑萃取是在提高溫度(50~200℃)和壓力(10.3~20.6MPa)下,用溶劑萃取固體或半固體樣品。
3、超臨界流體萃取:
超臨界流體萃取是利用超臨界流體對物質(zhì)的特殊溶解性能原理而建立的萃取方法。
4、固相萃?。?/p>
固相萃取是通過采用選擇性吸附和選擇性洗脫對樣品進行富集、分離和凈化,可以將其近似地看作一種簡單的液固色譜過程。
5、固相微萃?。?/p>
固相微萃取是基于涂敷在纖維上的高分子涂層或吸附劑和樣品之間的吸附-解吸平衡原理,集采樣、萃取、濃縮和進樣于一體的無溶劑的樣品微萃取方法。
有直接固相微萃取、頂空固相微萃取、膜固相微萃取和毛細管固相微萃取等。
6、液相微萃取:
液相微萃取是基于樣品和微升級甚至納升級有機溶劑之間的分配平衡原理,集采樣、萃取和濃縮于一體的環(huán)境友好的樣品微萃取方法。
有直接液相微萃取、中空纖維液相微萃取和頂空液相微萃取等。
7、衍生化:
有紫外衍生化、熒光衍生化和電化學衍生化等。
與比重計相關(guān)儀器液相色譜儀是由檢測器、輸液泵、進樣器、柱溫箱、混合器、色譜柱等部分組成。判斷液相色譜儀的指標有噪音,漂移,最小檢測濃度,定性定量重復(fù)性等。
1、液相色譜儀噪音是指由液相色譜儀的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其他液相色譜儀非溶質(zhì)作用產(chǎn)生的高頻噪聲和基線的無規(guī)則波動。噪音的大小直接關(guān)系到液相色譜儀檢測器的檢測靈敏度,噪音越大,檢測的靈敏度就越低。
2、液相色譜儀檢測器最小檢測度(也稱檢測限)是考核液相色譜儀檢測器靈敏度的重要參數(shù)指標。CL=2×Nd×C/H(CL:液相色譜儀最小檢測濃度Nd:噪音C:液相色譜儀樣品濃度最小檢測濃度H:樣品峰高)。
3、液相色譜儀檢測器漂移是指儀器穩(wěn)定后一段時間內(nèi)基線漂離液相色譜儀基線原點的距離,通常用來衡量液相色譜儀穩(wěn)定快慢。高品質(zhì)的液相色譜儀能在較短的時間內(nèi)達到穩(wěn)定,從而在一定程度上提高了液相色譜儀分析效率。
4、液相色譜儀定性、定量重復(fù)性主要是研判液相色譜儀穩(wěn)定性的指標,這對于分析液相色譜儀樣品來說是非常重要的。好的液相色譜儀其穩(wěn)定性應(yīng)該是十分優(yōu)秀的,這就要求多次液相色譜儀進樣保留時間及含量的一致性,這樣做出來的液相色譜儀檢測結(jié)果才能準確使人信服。
5、液相色譜儀操作方便性無論是對新手還是成熟的用戶都是很重要的。色譜儀自動化程度越高操作越簡單,越有利于提高液相色譜儀分析效率,同時也為以后液相色譜儀分析方法的拓展提供有力。
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