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薄層色譜的實驗器材選擇 薄層色譜操作規(guī)程

時間:2020-05-15    來源:儀多多儀器網    作者:儀多多商城     
  【儀器網 使用手冊】薄層色譜有好幾種類型,實驗時使用的器材也有不同的材料可以選擇。使用薄層色譜進行分析時,需要根據目標物質選擇合適的實驗器材,才能更好地進行實驗,保證結果準確。
 
  背襯板
 
  背襯板的材料一般有三種:玻璃、鋁和塑料。玻璃板具有高耐化學性和良好的熱穩(wěn)定性,可重復使用,適用于炭化,是常用的背襯。但是非常容易破損,而且不能輕易切割成所需尺寸,厚度>1.0 mm比鋁板或塑料背板要厚很多。
 
  鋁箔板易于操作且抗破損,比玻璃板輕薄,可降低運輸成本,節(jié)省倉儲空間,還可以很容易地用剪刀剪成所需尺寸。鋁箔板具有強吸附層附著力,適用于含有高濃度水的洗脫液。但是不能重復使用,而且對于諸如無機酸和濃氨的試劑而言,不如玻璃具有耐化學性。
 
  塑料或聚酯 (PET) 板背襯也輕便且靈活。與鋁箔板一樣,它們可以切割成所需尺寸并存儲在實驗室筆記本中以備將來參考。它們還具有很好的耐溶劑性能。但是塑料板熱穩(wěn)定性低,炭化必須在比玻璃更低的溫度下進行,而且柔性吸附層可能更容易開裂。
 
  吸附層/基質
 
  硅膠:微酸性極性固定相,適用于酸性、中性物質分離。常見的薄層色譜吸附劑,不具有氧化鋁的催化性能。
 
  氧化鋁:堿性極性固定相,適用于堿性、中性物質分離
 
  纖維素:含有羥基的極性固定相,適用于分類親水性物質。可以是微晶纖維素或纖維纖維素。當在微晶纖維素層上分離時,斑點通常比在纖維纖維素層上分離時更緊湊。
 
  聚酰胺:含有酰胺基極性固定相,適用于酚類、醇類化合物的分離。具有低擴散性,允許具有大強度的嚴格限制的樣品點。不推薦使用腐蝕性顯影試劑。
 
  粘合劑
 
  聚合物(有機)粘合劑:含有聚合物粘合劑的吸附層板通常堅固,使樣品處理和應用更容易。它們還允許在顯影溶劑中使用更高的水含量。適用于所有薄層色譜應用(使用炭化進行可視化的應用除外)。
 
  無機粘合劑:比沒有粘合劑或石膏粘合劑的吸附層板更堅固,耐水的并且與水性顯影劑相容。通常用于制備型薄層色譜板,對于需要炭化以便可視化的應用,或開發(fā)或可視化試劑與有機粘合劑相互作用時,推薦使用帶有無機粘合劑的板。
 
  石膏:容易斷裂,不建議將它們用于含有超過20%水的顯影溶劑。但是允許含有目標分子的斑點容易地從洗脫和回收支持物上刮下,推薦用于需要炭化以便可視化的應用。

薄層色譜儀的適用

    薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜;

    它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大;

    因此,又可用來精制樣品,此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質。

    此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種“預試”。

    薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上;

    涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內,浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時;

    將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。

    薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。

    是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。

    一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;

    另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達500mg的樣品。

    因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。

    此外,在進行化學反應時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應是否完成。

標簽: 薄層色譜儀
薄層色譜儀標簽: 薄層色譜儀的適用_薄層色譜儀組合標題:

薄層色譜法在中藥復方制劑中的應用

  薄層色譜法又簡寫為TLC,常用于中藥成方制劑中有效成分的定性鑒別。由于該方法鑒別專屬性強,使用設備簡單,易于操作,故應用廣泛,在目前的藥品質量標準定性鑒別中(如中國藥典和國家食品藥品監(jiān)督管理局標準),已大大地超過了顯微鑒別、理化鑒別和光譜鑒別。

  下面對薄層色譜法在中藥復方制劑中的應用做一些分析:

  一、醫(yī)院制劑由于其自身的特殊性,如只能在本院銷售,生產和檢驗設備簡陋,生產量小,劑型和品種相對較多,生產中常以水煎煮為主。故在選擇處方中的薄層定性藥材時,應以選擇水溶性成分為先。如芍藥苷、梔子苷、黃芪甲苷、龍膽苦苷、人參皂苷等苷類或綠原酸、阿魏酸等易溶于水的有機酸類成分。

  二、仔細分析處方。選擇方中薄層定性的藥材,應先選取以粉碎入藥的藥材。因為這部分藥材中的有效成分一般沒被破壞,特別是一些含有揮發(fā)性成分的藥材,如薄荷、香附、荊芥等,在薄層層析中以藥材作為對照品,很容易鑒別出來。

  三、對處方中含有多糖類或淀粉質較多的藥材,如麥冬、北沙參、黨參等,可采取先酸解后用有機溶劑提取的方法。經這樣處理后,薄層層析斑點一般都比較清晰,藥檢所復核時往往容易通過。

  四、在使用展開劑時,在同等條件下,應選擇無毒或毒性較小的有機溶劑。如選用環(huán)己烷而不選用正己烷,選用甲苯而不選用苯。以減少有機溶劑毒性對人體的侵害。

  五、對樣品的取樣量不宜太大。如果取樣量太大,點樣時往往因樣品的濃度太高而造成點樣困難,展開時斑點又不易分離而使薄層圖譜不清晰。

  六、對中藥復方制劑的液體劑型,提取分離方法應溶劑法,用適宜的有機溶劑提取。如是提取水溶性成分,應考慮對樣品進行脫脂處理。對酒劑、酊劑或搽劑中含有的樣品,應先在水浴上蒸去后再作下一步的處理。如液體劑型不宜用有機溶劑提取,也可采用先將藥液置水浴上蒸干(或加入適量硅藻土分散),再用有機溶劑提取的方法。

  七、對中藥復方制劑的固體劑型,提取分離方法可選用超聲提取法、回流提取法或溶劑提取法(應先將樣品加定量水溶解)等。超聲提取方法簡單,所需時間短,目前使用較多,應,但在使用過程中應注意一個問題,如提取時使用的有機溶劑是,超聲處理時間應控制在10~20min以內,超聲時容器不能密閉太緊,以免瓶塞沖出或全部揮發(fā),特別是在氣溫較高的夏天,尤其要注意。

  八、對中藥復方制劑的外用劑型,如軟膏劑、黑膏藥、貼膏一類,在樣品處理時,應首先考慮去掉賦形劑后再對樣品進行處理。如用凡士林制成的軟膏,可用有機溶劑除去凡士林。

  九、樣品經薄層展開后,觀察層析情況,筆者認為應多選擇在日光下觀察為主。原因為大多數醫(yī)院制劑室未建立暗室,在紫外光燈下拍照有困難。

  十、對樣品中某些成分的提取分離,可先采取相類似的方法,然后再選用不同的定容溶液和展開劑,即可達到目的。如同時提取某些皂苷類、苷類、有機酸類等。

  十一、在中藥復方制劑中,往往藥味較多,化學成分較為復雜,給單一成分的分離造成一定困難。為了達到分離的目的,在具體操作中,可以考慮使用高速離心,柱層析、氧化鎂凈化、水或氨試液洗滌等多種操作方法。但在使用這些方法時,必須注意不能把應提取的有效成分棄掉了。

  十二、在用碘蒸氣或氨蒸氣對薄層板顯時,所加的量不宜過多,使用的容器必須密閉,操作人不得離開,必須等到薄層斑點顯度適宜時,才可取出。

標簽: 薄層色譜
薄層色譜 薄層色譜法在中藥復方制劑中的應用_薄層色譜

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