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薄層色譜的操作方法 薄層色譜操作規(guī)程

時間:2020-05-15    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  【儀器網(wǎng) 使用手冊】薄層色譜是一種較新的色譜法,兼具柱色譜和紙色譜的優(yōu)點,能快速分離和定性分析少量物質(zhì)。薄層色譜性能優(yōu)異,操作也較簡單。
 
  1.選擇吸附劑
 
  吸附劑一般要求直徑為10~40μm,需要根據(jù)被分離物質(zhì)的性質(zhì)選擇,常用的吸附劑有以下幾種。
 
  硅膠:微酸性極性固定相,適用于酸性、中性物質(zhì)分離
 
  氧化鋁:堿性極性固定相,適用于堿性、中性物質(zhì)分離
 
  纖維素:含有羥基的極性固定相,適用于分類親水性物質(zhì)。
 
  聚酰胺:含有酰胺基極性固定相,適用于酚類、醇類化合物的分離。
 
  2.制備薄層板
 
  薄層板的質(zhì)量將決定分離的效果,應(yīng)該盡量均勻且厚薄一致。薄層板的制備主要有兩種方法:
 
  ①將潔凈干燥的玻璃板置于鋪板器中間,在鋪板槽中倒入糊狀物,自左向右推,將糊狀物均勻地涂在玻璃板上。
 
 ?、趯⒄{(diào)成糊狀物倒在玻璃板上,或用角匙舀到玻璃板上,再用玻璃棒或角匙鋪平并用手捏住玻璃板一角,輕輕碰敲桌面,使薄層表面均勻并除去 糊狀物中的氣泡。
 
  制備完成后還需要將涂好的薄層板水平放置于室溫下晾干,然后放在烘箱內(nèi)加熱活化。(硅膠板需在烘箱內(nèi)慢慢升溫至105-110度后保溫30分鐘;氧化鋁板需在200-220度烘4小時)
 
  3.點樣
 
  將待測樣品溶在極性盡可能低的溶劑中配成1%的溶液。用一支平口的細(xì)毛細(xì)管蘸取少量樣品溶液點在薄板上。
 
  4.展開
 
  薄層層析有多種展開方式,可分為上行、下行、雙向展開等,這里介紹一下上行法和下行法。
 
  上行法:在缸中加入足夠量的展開劑,將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,密封缸蓋,待展 開前沿離薄板上端1cm時,取出薄層板,并用鉛筆輕輕畫下溶劑前沿,晾干。
 
  下行法:在展開缸的蓋子上裝一個小 鉤,將展開的紙片鉤住,并通過一濾紙條將展 開劑和紙片連起來。待展開劑前沿離紙片下端 1cm時,取出紙片,并用鉛筆輕輕畫下溶劑前 沿,晾干。
 
  5.顯色
 
  晾干薄板溶劑后對板上的組分進(jìn)行定位。將顯色劑以噴霧方式直接噴到薄層板上可顯示不同顏色的斑點。此外對于無色樣品,可采用帶熒光劑的吸附劑做薄板,展開后在紫外光下顯暗色斑點;對于在光學(xué)條件下不顯色的物質(zhì),可將薄板置于含有少量碘晶體的密閉容器中,與碘作用呈棕色斑點。
 
  6.Rf值計算
 
  用尺測量原點到色斑中心的距離除以原點到溶劑前沿的距離。不同的物質(zhì)往往有著不同的Rf值,根據(jù)這個就可以簡單判斷它們是否是同一物質(zhì),但Rf值相同之后,還要進(jìn)行進(jìn)一步判斷才能確定他們是否為同一個物質(zhì)。

薄層色譜儀的應(yīng)用如何?

    薄層色譜法,是將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。

    待點樣、展開后,與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比,用以進(jìn)行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。

    薄層掃描儀是可以對斑點進(jìn)行掃描的專用分光光度計,用可見光或紫外光作光源,線性掃描或鋸齒掃描薄層板展開后的斑點;

    該斑點就吸收該組分特征波長的單色光,剩余的單色光經(jīng)透射或反射或發(fā)射熒光,由檢測器積分起來,獲得這塊斑點面積的待測物質(zhì)含量。

    薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。

    一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達(dá)500mg的樣品。

    因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。

    此外,在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應(yīng)是否完成。

    薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑;

    帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細(xì)管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上;

    涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi),浸入深度為0.5cm。

    待展開劑前沿離頂端約1cm附近時,將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。

標(biāo)簽: 薄層色譜儀
薄層色譜儀 薄層色譜儀的應(yīng)用如何?_薄層色譜儀

薄層色譜儀的適用

    薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù),屬固—液吸附色譜;

    它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大;

    因此,又可用來精制樣品,此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質(zhì)。

    此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機(jī)反應(yīng)及進(jìn)行柱色譜之前的一種“預(yù)試”。

    薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細(xì)管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上;

    涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi),浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時;

    將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。

    薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。

    是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。

    一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;

    另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達(dá)500mg的樣品。

    因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。

    此外,在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應(yīng)是否完成。

標(biāo)簽: 薄層色譜儀
薄層色譜儀標(biāo)簽: 薄層色譜儀的適用_薄層色譜儀組合標(biāo)題:

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