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安捷倫液相色譜儀的標(biāo)準(zhǔn)操作程序 液相色譜操作規(guī)程

時(shí)間:2020-05-15    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  Agilent液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序
 
  1.目的:建立一個(gè)液相色譜的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。
 
  2.范圍:適用于Agilent液相的使用。
 
  3.責(zé)任:使用Agilent液相的化驗(yàn)員。
 
  4.程序
 
  4.1工作環(huán)境
 
  實(shí)驗(yàn)室溫度為20~27℃,溫度變化<3℃/hr,相對(duì)濕度<80%,液相色譜儀工作臺(tái),長(zhǎng)2米、寬0.8米、承重大于80公斤,離墻距離0.3米以上。單相交流220V,(+5%~10%),50~60Hz,有單獨(dú)的良好接地。配置穩(wěn)壓電源,功率大于2.5千瓦。
 
  4.2使用前的準(zhǔn)備
 
  4.2.1二次蒸餾水,(建議用0.45微米水相濾膜過濾);甲醇或乙晴(色譜純),(建議用0.45微米有機(jī)相濾膜過濾);其他樣品所需流動(dòng)相,(都需經(jīng)過0.45微米濾膜過濾)。將上述溶劑放入超聲波池,除去氣泡,方可使用。
 
  4.2.2把流動(dòng)相放入溶劑瓶中,打開purge閥,單擊pump圖標(biāo),出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單,單擊setup選項(xiàng),進(jìn)入pump編輯畫面,設(shè)flow:5ml/min,單擊OK;單擊pump圖標(biāo),出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單,單擊pump control選項(xiàng),選中ON,單擊OK,則系統(tǒng)開始purge,直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續(xù)purge,直到所有要用通道無氣泡為止;單擊pump圖標(biāo),出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單,單擊setup選項(xiàng),進(jìn)入pump編輯畫面,設(shè)flow:1.0ml/min,關(guān)閉purge valve。單擊pump下的的瓶圖標(biāo),輸入溶劑的實(shí)際體積和瓶體積,也可輸入阻止分析和關(guān)泵的體積,單擊OK。
 
  4.2.3進(jìn)行樣品前處理(稀釋或溶解至所需濃度)。
 
  4.3實(shí)驗(yàn)步驟
 
  4.3.1準(zhǔn)備
 
  4.3.1.1開啟Agilent 1100LC各模塊電源。
 
  4.3.1.2打開計(jì)算機(jī),雙擊online圖標(biāo)。
 
  4.3.1.3從"view"菜單中選擇"method and run control"畫面,單擊"view"菜單中的"show top toolbar","show status toolbar","system diagram","sampling diagram"使其命令前有"√"標(biāo)志。
 
  4.3.2數(shù)據(jù)采集方法編輯
 
  4.3.2.1從“method"菜單中選擇"edit entire method"項(xiàng),選中除"data analysis"外的三項(xiàng),單擊OK,進(jìn)入下一畫面。
 
  4.3.2.2在"method comments"中加入方法的信息(如This is for test!),單擊OK進(jìn)入下一畫面。
 
  4.3.2.3泵參數(shù)設(shè)定
 
  在"flow"處輸入流量1ml/min,在"solvent"處輸入流動(dòng)相中各溶劑所占的比例,也可"insert"一行"timetable",編輯梯度。在"pressure limits max"處輸入柱子的zui大耐高壓,以保護(hù)柱子,單擊OK進(jìn)入下一畫面。
 
  4.3.2.4柱溫箱參數(shù)設(shè)定
 
  在"temperature"下面的方框內(nèi)輸入所需的溫度,并選中它點(diǎn)擊"more>>"鍵,如圖所示,選中"same as left"使柱溫箱的溫度左右一致,點(diǎn)擊OK進(jìn)入下一畫面。
 
  4.3.2.5 VWD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定
 
  在"wavelength"下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng),在"peak width(response time)"下方點(diǎn)擊下拉式三角框,選擇合適的響應(yīng)時(shí)間,如>0.1min 。 在"timetable"中可以"insert"一行,可以輸入隨時(shí)間切換的波長(zhǎng)。
 
  4.3.2.6在"run time checklist"中,選中"data acquisition",單擊OK。
 
  4.3.2.7單擊“method"菜單,選中"save method as",輸入一方法名,單擊OK。
 
  4.3.2.8從"run control"菜單中選擇"sample info"選項(xiàng),輸入操作者姓名,在"data file"中選擇"manual"或"prefix"。
 
  4.3.2.9從"instrument"菜單中,選擇"system on"。
 
  4.3.2.10單擊OK,等儀器ready,基線平穩(wěn),從"method"菜單中選擇"run method",進(jìn)樣。
 
  4.3.2.11進(jìn)樣時(shí),閥門位置處于"inject"位置,進(jìn)樣針取樣量應(yīng)為所規(guī)定體積的三倍,用濾紙拭凈針頭表面殘留液,進(jìn)樣時(shí)要輕而快,進(jìn)樣完畢應(yīng)快速將閥門搬至"load"位置,進(jìn)樣完畢,數(shù)分鐘后將進(jìn)樣針拔下,閥門回復(fù)到"inject"位置。 4.3.3數(shù)據(jù)分析方法編輯
 
  4.3.3.1從"view"菜單中,單擊"data analysis"進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫面。
 
  4.3.3.2從"file"菜單中選擇"load signal"選項(xiàng),選中您的數(shù)據(jù)文件,單擊OK。
 
  4.3.3.3做譜圖優(yōu)化,從"graphics"菜單中選擇"signal options"選項(xiàng),從"ranges"中選擇"auto scale"及合適的顯示時(shí)間,單擊OK,或選擇"use ranges"調(diào)整。反復(fù)進(jìn)行,直到圖的比例合適為止。
 
  4.3.3.4積分
 
  4.3.3.4.1從"integration"中選擇"auto integrate",如積分結(jié)果不理想,再從菜單中選擇"integration events"選項(xiàng),選擇合適的"slope sensitivity","peak width","area reject","height reject"。
 
  4.3.3.4.2從"integration"菜單中選擇"integrate"選項(xiàng),則數(shù)據(jù)被積分。
 
  4.3.3.4.3如積分結(jié)果不理想,則重復(fù)上兩步動(dòng)作,直到滿意為止。
 
  4.3.3.4.4單擊左邊"√"圖標(biāo),將積分參數(shù)存入方法。
 
  4.3.3.5打印報(bào)告
 
  4.3.3.5.1從"report"菜單中選擇"specify report"選項(xiàng),進(jìn)入。
 
  4.3.3.5.2單擊"quantitative results"框中"calculate"右側(cè)的黑三角,選擇所需的報(bào)告形式,其他選項(xiàng)不變,單擊OK。
 
  4.3.3.5.3從"report"菜單中選擇"print report",則報(bào)告結(jié)果將打印到屏幕上,如想輸出到打印機(jī)上,則單擊"report"底部的"print"鈕。
 
  4.3.4關(guān)機(jī)
 
  4.3.4.1關(guān)機(jī)前,先用水和有機(jī)溶劑對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行梯度沖洗,然后再用有機(jī)溶劑沖洗系統(tǒng),然后關(guān)泵(適用于反相色譜柱)。[正相色譜柱用適當(dāng)?shù)娜軇_洗]
 
  4.3.4.2退出化學(xué)工作站,及其他窗口。
 
  4.3.4.3關(guān)掉Agilent1100電源開關(guān),計(jì)算機(jī)(用shut down關(guān))。
 
  4.4.1色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不用,存放時(shí),柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑,兩端封死。
 
  4.4.2對(duì)于手動(dòng)進(jìn)樣器,當(dāng)使用緩沖液時(shí),要用水沖洗進(jìn)樣口,同時(shí)搬動(dòng)進(jìn)樣閥數(shù)次。
 
  4.4.3流動(dòng)相使用前必須過濾、超聲,不能使用多日存放的純化水(易長(zhǎng)菌),應(yīng)每天更換純化水。

液相色譜儀對(duì)周圍的環(huán)境的要求

  液相色譜儀和大多數(shù)分析儀器一樣,對(duì)儀器周圍的環(huán)境有一定的要求,但沒有太特殊的的要求,滿足一般分析儀器室的基本條件,就能保證儀器的穩(wěn)定運(yùn)行和安全操作。

 ?。?)照明:

  室內(nèi)照明要光線適中,避免陽光直射。為避開直射光線對(duì)儀器操作、觀測(cè)的影響,儀器(顯示屏)應(yīng)側(cè)向光線。實(shí)驗(yàn)室窗戶要掛窗簾,以便隨時(shí)調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度。

  (2)通風(fēng):

  使用液相色譜儀分析過程中,由于流動(dòng)相中含有揮發(fā)性有機(jī)溶劑(甲醇、乙睛等)會(huì)產(chǎn)生有害氣體,對(duì)儀器中的光學(xué)元件帶來腐蝕,應(yīng)注意儀器室的通風(fēng),以排除室內(nèi)有害氣體、保持空氣清新。

  通風(fēng)主要有兩種方式:一種自然通風(fēng),定時(shí)打開門窗,讓內(nèi)外空氣對(duì)流;另一種是強(qiáng)制通風(fēng),如用通風(fēng)柜、排風(fēng)扇等,及時(shí)將有害氣體排出室外。

 ?。?)環(huán)境溫度和濕度:

  適宜的溫度和濕度是保障HPLC儀正常運(yùn)行、性能穩(wěn)定的必要條件。

  HPLC儀一般要求室溫在20一30℃之間,日溫度變化2一3℃,不要波動(dòng)太大,否則,在開機(jī)分析時(shí)會(huì)影響色譜分離;

  夏季一定要控制室溫不要超過30℃,溫度太高會(huì)使流路系統(tǒng)產(chǎn)生氣泡,影響檢測(cè)器的正常工作(如熒光檢測(cè)器)。室內(nèi)相對(duì)濕度應(yīng)控制在60%以下。

 ?。?)供電:

  液相色譜室應(yīng)設(shè)有照明電源和動(dòng)力電源,動(dòng)力電可供儀器運(yùn)行使用。為減少噪音的干擾,儀器應(yīng)遠(yuǎn)離瞬時(shí)供電的大功率電器設(shè)備,如:大型電動(dòng)設(shè)備(超低溫冰箱、電烤箱等)、電梯、空調(diào)系統(tǒng)等。為保證HPLC輸液泵的精度,必須要保證穩(wěn)定的輸人電壓,為此,建議色譜室應(yīng)設(shè)有和儀器負(fù)荷相當(dāng)?shù)姆€(wěn)壓電源。室內(nèi)墻上應(yīng)安裝有接地電阻符合要求的地線,用于儀器設(shè)備保護(hù)性接地的公用地線接地電阻≤4Ω。

 ?。?)潔凈度:

  懸浮于空氣中的顆粒物質(zhì)會(huì)對(duì)色譜儀器分析帶來干擾,使本底和噪聲升高,成為分析測(cè)試的污染源,直接影響高純物質(zhì)的純度與痕量雜質(zhì)的分析。

標(biāo)簽: 液相色譜儀
液相色譜儀 液相色譜儀對(duì)周圍的環(huán)境的要求_液相色譜儀

液相色譜儀的維修保養(yǎng)

  液相色譜儀作為實(shí)驗(yàn)室常見的一款產(chǎn)品,日常維護(hù)與保養(yǎng)中有哪些需要注意的地方,我們來介紹一下:

  1、流動(dòng)相的抽作要求:

  高效液相級(jí)色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾;

  流動(dòng)相脫氣至關(guān)重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法)

  2、吸濾頭:

  特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動(dòng)相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。

  3、單向閥

  如遇到泵壓不穩(wěn)或流動(dòng)相不能抽取,則可能是單向閥出現(xiàn)問題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時(shí)須按其安裝的方向放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!

  4、泵頭:

  泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請(qǐng)維修(如漏液,或更換柱塞桿及其密封墊等)

  5、過濾器:

  當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時(shí),有可能是此部件被污染, 拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片。

  6、排液閥:

  此處不能完全密封或漏液時(shí)一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。

  7、手動(dòng)進(jìn)樣器:

  平時(shí)應(yīng)注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗;如出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染,一般須申請(qǐng)維修或更換配件。

  8、流通池:

  在色譜峰不正常時(shí)會(huì)可能是此部件補(bǔ)污染。可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗(可根據(jù)說明書進(jìn)行操作或申請(qǐng)維修)。

  9、工作站

  出現(xiàn)死機(jī)可重起計(jì)算機(jī);不正常運(yùn)行時(shí),首先可更換電腦測(cè)試其硬件故障;或在本機(jī)上重新插拔接口、重新安裝軟件。

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液相色譜儀 液相色譜儀的維修保養(yǎng)_液相色譜儀

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