熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù)，從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數(shù)的測定，不但可以做一般的定量分析，而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化，從而闡明分子結構與功能之間的關系。熒光分光光度計的激發(fā)波長掃描范圍一般是190~650nm，發(fā)射波長掃描范圍是200~800nm?？捎糜谝后w、固體樣品（如凝膠條）的光譜掃描。 熒光分光光度計的原理： 由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過濾過和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。 物質熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài)，這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的，在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出，從而產(chǎn)生熒光。 不同物質由于分子結構的不同，其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜，因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進行物質的鑒定。 在溶液中，當熒光物質的濃度較低時，其熒光強度與該物質的濃度通常有良好的正比關系，即IF=KC，利用這種關系可以進行熒光物質的定量分析，與紫外-可見分光光度法類似，熒光分析通常也采用標準曲線法進行。
超微量分光光度計是一類很重要的分析儀器，常用于定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器，常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。無論在物理學、化學、生物學、醫(yī)學、材料學、環(huán)境科學等科學研究領域 ,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門 ,紫外可見分光光度計督有廣泛而重要的應用。
超微量分光光度計是精密光學儀器，正確安裝、使用和保養(yǎng)對保持儀器良好的性能和保證測試的準確度有重要作用。
超微量分光光度計的日常維護和保養(yǎng)：
1.光源的壽命有限，為了延長光源使用壽命，在不使用儀器時不要開光源燈，應盡量減少開關次數(shù)。
2.單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內，不能拆開。選擇波長應平衡地轉動，不可用力過猛。為防止色散元件受潮生霉，必須定期更換單色器盒干燥劑(硅膠)。若發(fā)現(xiàn)干燥劑變色，應立即更換。
3.必須正確使用吸收池，應特別注意保護吸收池的兩個光學面。
4.光電轉換元件不能長時間曝光，且應避免強光照射或受潮積塵。
5.儀器若暫時不用要定期通電，每次不少于20～30min，以保持整機呈干燥狀態(tài)，并且維持電子元器件的性能。
紫外-可見分光光度計是由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。光源的功能是提供足夠強度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜。
紫外光區(qū)通常用氫燈或氘燈.見光區(qū)通常用鎢燈或鹵鎢燈。單色器的功能是將光源發(fā)出的復合光分解并從中分出所需波長的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種。
日常維護
要懂得分析儀器的日常維護和對主要技術指標的簡易測試方法，經(jīng)常對儀器進行維護和測試，以保證儀器工作狀態(tài)。
1.溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。
他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降;造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。
維護保養(yǎng)時應定期加以校正。應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特別是地處南方地區(qū)的實驗室。
2.環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也會影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內衛(wèi)生條件，防塵等。
3.儀器使用一定周期后，內部會積累一定量的塵埃，由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內部進行除塵工作；
同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑，恢復原狀，再進行一些必要的檢測、調校與記錄。
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