1、每日觀察培養(yǎng)箱溫度是否符合規(guī)定。發(fā)現(xiàn)異常情況及時請專業(yè)人員修理。
2、箱內(nèi)照明異常時要及時更換照明燈具。
3、發(fā)現(xiàn)加熱(制冷)異常時檢查加熱爐絲(壓縮機)是否損壞,損壞后及時修復。
4、及時清潔培養(yǎng)箱外衛(wèi)生,保持潔凈無塵。每周應(yīng)用消毒水對培養(yǎng)箱內(nèi)膽徹底清潔一次。每季度更換不同品種的消毒水,以免產(chǎn)生耐藥菌種。
5、每年應(yīng)對此設(shè)備進行一次性能驗證。
6、使用該設(shè)備前認真檢查電源電壓與儀器要求是否相符。
7、設(shè)備不使用時,置各控制開關(guān)處于非工作狀態(tài),切斷電源。
二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。
二氧化碳培養(yǎng)箱作為實驗室常用的一款儀器,在使用過程中有哪些需要注意的事項,我們來列舉一下:
1、二氧化碳培養(yǎng)箱未注水前不能打開電源開關(guān),否則會損壞加熱元件。
2、二氧化碳培養(yǎng)箱運行數(shù)月后,水箱內(nèi)的水因揮發(fā)可能減少,當?shù)退恢甘緹?WLow12)亮時應(yīng)補充加水。先打開溢水管,用漏斗接橡膠管從注水孔補充加水使低水位指示燈熄滅,再計量補充加水(CP-ST200A加水1800ml,CP-ST100A加水1200ml),然后堵塞溢水孔。
3、二氧化碳培養(yǎng)箱可以做高精度恒溫培養(yǎng)箱使用,這時須關(guān)閉CO2控制系統(tǒng)。
4、因為CO2傳感器是在飽和濕度下校正的,因此加濕盤必須時刻裝有滅菌水。
5、當顯示溫度超過置定溫度1℃時,超溫報警指示燈(OverTemp7)亮,并發(fā)出尖銳報警聲,這時應(yīng)關(guān)閉電源30分鐘;若再打開電源(溫控)開關(guān)(Power20)仍然超溫,則應(yīng)關(guān)閉電源并報維修人員。
6、鋼瓶壓力低于0.2MPa時應(yīng)更換鋼瓶。
7、盡量減少打開玻璃門的時間。
8、如果二氧化碳培養(yǎng)箱長時間不用,關(guān)閉前必須清除工作室內(nèi)水分,打開玻璃門通風24小時后再關(guān)閉。
9、清潔二氧化碳培養(yǎng)箱工作室時,不要碰撞傳感器和攪拌電機風輪等部件。
10、拆裝工作室內(nèi)支架護罩,必須使用隨機專用扳手,不得過度用力。
11、搬運培養(yǎng)箱前必須排除箱體內(nèi)的水。排水時,將橡膠管緊套在出水孔上,使管口低于儀器,輕輕吸一口,放下水管,水即虹吸流出。
12、搬運二氧化碳培養(yǎng)箱前應(yīng)拿出工作室內(nèi)的擱板和加濕盤,防止碰撞損壞玻璃門。
13、搬運培養(yǎng)箱時不能倒置,同時一定不要抬箱門,以免門受損。
二氧化碳培養(yǎng)箱作為精密培養(yǎng)設(shè)備,要求CO2濃度、溫度、控制精度高,誤差小,使生物細胞,組織等的培養(yǎng)成功率、效率都得到改善。相對于普通培養(yǎng)箱,二氧化碳培養(yǎng)箱具有不可替代優(yōu)勢性能。
為什么大多數(shù)細胞培養(yǎng)需要用二氧化碳培養(yǎng)箱?用普通培養(yǎng)箱不行嗎?
我們知道,一般細胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間,由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中重要的pH緩沖系統(tǒng)),大多數(shù)培養(yǎng)液用它來保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時,常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。
而對大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時細胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。
那么采用其他pH緩沖系統(tǒng)是不是就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了呢?人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低,如果細胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液中的HCO3-會被耗盡,這樣會影響細胞的正常生長。所以大部分動物細胞的培養(yǎng),還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。細胞培養(yǎng)液中常附加其他的pH緩沖系統(tǒng),比如HEPES緩沖系統(tǒng),來增加pH緩沖能力。在pH7.2-7.4之間有很強的緩沖能力,當透氣的培養(yǎng)器皿被拿到二氧化碳培養(yǎng)箱外面的時候,由于空氣中二氧化碳濃度很低,培養(yǎng)液中碳酸鹽緩沖系統(tǒng)就會失去效果,這時候緩沖系統(tǒng)就能繼續(xù)保持pH的穩(wěn)定。