1.安裝拆卸色譜柱必須在常溫下。 2.填充柱有卡套密封和墊片密封,卡套分三種,金屬卡套,塑料卡套,石墨卡套,安裝時不易擰的太緊。墊片式密封每次按裝色譜柱都要換新的墊片。 3.色譜柱兩頭是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被載氣吹到檢測器中。 4. 毛細(xì)管色譜柱 安裝插入的長度要根據(jù)儀器的說明書而定,不同的色譜汽化室結(jié)構(gòu)不同,所以插進(jìn)的長度也不同。需要說明的如果你用 毛細(xì)管色譜柱 采用不分流,汽化室采用填充柱接口這時與汽化室連接毛細(xì)管不能探進(jìn)太多,略超出卡套即可。氫氣和空氣的比例對FID檢測器的影響氫氣和空氣的比例應(yīng)1:10,當(dāng)氫氣比例過大時FID檢測器的靈敏度急劇下降,在使用色譜時別的條件不變的情況下,靈敏度下降要檢查一下氫氣和空氣流速。氫氣和空氣有一種氣體不足點火時發(fā)出“砰”的一聲,隨后就滅火,一般當(dāng)你點火電著就滅,再點還著隨后又滅是氫氣量不足。
液相色譜柱、特別是高效液相色譜柱的填裝,需要有較高的技巧和熟練的技能。因此,有人甚至將“裝柱”看作是“藝術(shù)加技術(shù)”。但是,只要掌握了一些基本的規(guī)律和方法,任何實驗室都可以填裝出具有較高柱性能的色譜柱。當(dāng)然,目前大多數(shù)實驗室多是購買商品預(yù)填裝柱來滿足分離、分析之需。但是在一些有特殊需要的情況下,或為節(jié)省經(jīng)費(fèi),在實驗室中自行填裝高效液相色譜柱還是可取的。
液相色譜柱填裝程序中應(yīng)該注意的問題:
?、俑邏翰僮鞯陌踩珕栴}。常發(fā)生的問題是柱子與勻漿罐連接不牢,造成加壓時柱頭被高壓沖下或柱子從勻漿罐上滑脫。此時,輕則填裝失敗,材料損失,重則造成人身傷害事故,一定要加以防范。除每次填裝前均須仔細(xì)確認(rèn)是否連接正確且牢靠外,可以還可加上由法蘭盤和長螺桿組成的預(yù)防脫落裝置,以防萬一。
?、谕ǔ?,先填裝的柱床較后填裝的柱床緊密。因此,當(dāng)使用時宜以相反的方向為宜,即讓近勻漿罐一端作為使用時流動相的出口,而填裝時的出口端則作為流動相的入口。
?、坌轮邮褂们皯?yīng)以甲醇沖洗20-30min, 后,再改用流動相平衡。
?、苄轮右诉x適宜的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行評價并記錄,以備存查和比較。
液相色譜柱是液相色譜儀的核心部件,且極易因使用不當(dāng)而損壞,不互溶的流動相,不正確的保存方式及清洗都會降低色譜柱的使用壽命。因此液相色譜柱的日常維護(hù)保養(yǎng)極為重要。
1.流動方向已明確標(biāo)明在色譜柱上,請正確安裝色譜柱,除非您想沖洗色譜柱入口的污染物,否則,請不要反接色譜柱。
2.反相柱做完實驗后,若使用流動相中含有緩沖溶液鹽,請在使用完畢后用不含緩沖劑的80%水-有機(jī)溶劑流動相沖洗色譜柱,后換成100%有機(jī)溶劑貯存。
3.正相色譜柱正相使用保存在純正己烷中,反相使用時需要將柱內(nèi)貯存液用異丙醇置換。
4.流動相與樣品在使用前可以用0.45um的微孔濾膜或用預(yù)處理柱(SPE固相萃取小柱)進(jìn)行預(yù)處理,并嚴(yán)格脫氣。
5.流動相pH需保持在2-8之間,請盡量不超過適用范圍。
6.柱溫不要大于60℃。
7.壓力最高不超過30Mpa,建議在20Mpa以內(nèi)使用。
8.使用新鮮溶劑,防止細(xì)菌增長。
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