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液相色譜儀HPLCC18色譜柱的日常保養(yǎng)與維修及選購指南

時間:2020-05-10    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  1.C18色譜柱的日常使用與保養(yǎng)
 
  在日常分離分析工作中,色譜柱使用是否得當,直接影響色譜柱的壽命。下面介紹C18柱在日常使用過程中應注意的事項。
 
  (1)柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產(chǎn)生空隙。(2)如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置1根專用柱,這樣有助于延長柱子的壽命。(3)如使用柱溫控制裝置時,應注意在通入流動相后才能升溫。(4)流動相使用前需進行脫氣處理,以免降低柱效和影響檢測等。樣品溶液需經(jīng)適當?shù)那疤幚砑斑^濾,以減少柱污染和堵塞。(5)在更換流動相種類時,應注意溶劑的互溶性,防止發(fā)生鹽析現(xiàn)象。(6)柱子的實際操作壓力應低于填裝時的zui高壓力,在zui高壓力一半以下。一般不超過20 593.965~29 419.95 kPa。在低壓力(≤14 709.975 kPa)的范圍使用,可使柱保持長時期的高柱效。(7)C18色譜柱屬非極性鍵合相色譜柱,流動相的pH值應嚴格控制在2~7之間,以免損壞柱子。(8)在完成分離分析工作之后,不應立即停機,需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗,一般0.5 h以上,以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。(9)如果流動相中有鹽類,首先用水充分清洗。如果是胺類(如三甲胺類或四丁基胺類)添加到流動相中,要用50%甲醇和0.05%磷酸溶液混合溶劑沖洗,不要只用水沖洗。(10)C18一般用100%甲醇作為保存溶劑,以防柱子干裂而損壞。嚴禁水或緩沖溶液長時間在色譜流路中保留。(11)選用合適的C18保護柱,以保護分析柱免受雜質(zhì)顆粒及不可逆吸附的干擾物的影響。保護柱內(nèi)裝填料顆粒度應與分析柱填料的顆粒度盡量一致。(12)柱的保存期不宜太長。短期不用的C18柱,用甲醇沖洗30~60 min,然后將柱兩端密封。較長期不用的柱子,一是采取定期沖洗,再密封的方法;二是在沖洗后,柱兩端各裝1只有一定容量的灌滿甲醇的容器(只裝一端也可),以補充在較長存放期間柱內(nèi)溶劑的蒸發(fā)。
 
  2.C18色譜柱的維修
 
  色譜柱在日常使用過程中,盡管保護嚴格,樣品和流動相盡管經(jīng)過前處理,但經(jīng)過長時間的使用,仍然難以完全避免柱子受到污染,固定相流失、板結、柱床塌陷以及柱效下降等。有些可以通過維修,使部分柱效恢復。
 
  2.1 柱污染再生技術 色譜柱污染后,可以用合適的溶劑沖洗,使柱效再生。C18柱常規(guī)的再生洗滌方法是:分別用甲醇、三氯甲烷、甲醇/水各60 mL依次通過色譜柱,再用100%甲醇60 mL平衡色譜柱后封存,柱效將恢復正常。必要時,根據(jù)柱污染性質(zhì)(如有機污染、鹽類污染等),采用0.05 mol/L H2SO4、0.5 mol/L H3PO4或0.1 mol/L EDTA鈉鹽沖洗,然后再用水沖洗,zui后用100%甲醇平衡色譜柱后封存。對于嚴重污染的C18柱,可采用水、甲醇、氯仿、乙烷依次沖洗后,按順序倒過來再沖洗1次,每次所用溶劑60 mL,不接檢測器,zui后用100%甲醇平衡色譜柱封存。
 
  2.2 柱污染的修復 在柱污染再生無效或已知柱污染嚴重時,可以采用柱修補的方法解決,但柱污染深度不宜超過5 mm。方法是將特制小鏟將污染部分挖去,再用與柱填料相同的固定相與流動相混合制成漿狀,然后將漿狀固定相仔細補入被挖去的部分(盡量使后填補的固定相接近原裝的緊密程度),修平端面即可。修好的柱子如果柱頭兩端的篩板的孔徑是一致的,可將柱子顛倒過來使用一般時間,目的是借助流動相沖洗作用,恢復柱床緊密程度。
 
  2.3 柱塌陷的修復 柱塌陷的原因很多。對于塌陷不太嚴重時,如果柱頭兩端的篩板孔徑是一致的,可將柱顛倒使用一般時間,即可恢復性能。當塌陷嚴重(5 mm左右)時,可采用柱污染的修復方法修補即可。

液相色譜儀選購技巧

  一、技術指標優(yōu)異:
  首先是如何看指標。液相色譜儀的指標很多,有泵的、檢測器的、色譜柱等等。我們認為要看主要技術指標,根據(jù)國家標準,儀器的主要指標有噪音,漂移,最小檢測濃 度,定性定量重復性等。這些指標都要放在系統(tǒng),回路里去看,去比較。就是需要把各單元裝置都要聯(lián)接好,如接好色譜柱,進樣閥,并且要通上流動相。因為您在 分析中也都是聯(lián)接好以后才可以進行分析的,而不是單單用個檢測器或是泵的。
  然后在這個基礎上,我們再去比較這些主要指標。
  1、噪音
  是指由儀器的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其他非溶質(zhì)作用產(chǎn)生的高頻噪聲和基線的無規(guī)則波動。噪音的大小直接關系到儀器的檢測靈敏度,噪音越 大,檢測的靈敏度就越低。對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好,否則噪音過大將會導致基線不穩(wěn),甚至影響分析結果。
  2、漂移
  是指儀器穩(wěn)定后一段時間內(nèi)基線漂離原點的距離,通常用來衡量儀器穩(wěn)定快慢。高品質(zhì)的儀器能在較短的時間內(nèi)達到穩(wěn)定,從而在一定程度上提高了分析效率。
  3、定性定量重復性
  主要是考核儀器穩(wěn)定性的指標,這對于分析樣品來說是非常重要的。好的儀器其穩(wěn)定性應該是十分優(yōu)秀的,這就要求多次進樣保留時間及含量的一致性,這樣做出來的結果才能使人信服。
  4、最小檢測濃度(最小檢測限)
  最小檢測限是反映儀器靈敏度的重要參數(shù)。CL=2NdC/H(CL :最小檢測濃度 Nd:噪音 C:樣品濃度最小檢測濃度 H:樣品峰高)由上式可見,最小檢測濃度是和噪音成正比的,噪音越大,最小檢測濃度就越大,靈敏度就越低。某些廠家回避了這個指標,說明他們不愿在最小檢 測濃度的基礎上去比較噪音。

標簽: 液相色譜儀
液相色譜儀標簽: 液相色譜儀選購技巧_液相色譜儀組合標題:

液相色譜柱的使用和維護

    在液相色譜操作過程中,我們需要下面的問題,方便維護液相色譜柱
    A柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產(chǎn)生空隙。
    B.如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱,這樣有助于延長柱子的壽命。
    C.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使液相色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
    D.應逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?br/>    E.如使用柱溫控制裝置時,應注意在通人流動相后才能升溫。
    F.一般說來液相色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
    G.選擇使用適宜的流動相,以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一個預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
    H.避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。
    I.經(jīng)常用強溶劑沖洗液相色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進行清洗時,對流路系統(tǒng)中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50-75mL。
    J.保存液相色譜柱時應將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。
    K.液相色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結濾片被堵塞,這時應更換濾片或將其取出進行清洗;另一種可能是大分子進人柱內(nèi),使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。
    
    L.在完成分離分析工作之后,不能馬上就關機,需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗,一般0.5h以上,以除去液相色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。

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液相色譜柱 液相色譜柱的使用和維護_液相色譜柱

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