在使用高效液相的過程中,管路的堵塞是常發(fā)生的故障之一。下文為您介紹液相色譜管路堵塞的原因與解決方法。
液相色譜管路阻塞的原因:
1、沒有很好過濾流動(dòng)相;
2、樣品中有微粒;
3、泵或進(jìn)樣器墊圈產(chǎn)生碎片;
4、預(yù)柱、護(hù)柱和分析柱中漏出填料;
5,毛刺和銼屑進(jìn)入;
6、流動(dòng)相中的結(jié)晶鹽;
7、微生物
8、系統(tǒng)中進(jìn)入了其它顆粒性物質(zhì)。
液相色譜管路阻塞解決方法:
系統(tǒng)中管路阻塞的現(xiàn)象很少見,常見的是燒結(jié)過濾片(玻璃砂芯)阻塞。用燒結(jié)過濾器或過濾片(孔徑2-10um)能去掉阻塞管路的微粒(如0、25mm管徑)。用系統(tǒng)分段法檢查阻塞的管路,從后向前分別松開接頭檢查,找到阻塞管路后,應(yīng)立即拆下來(lái)疏導(dǎo)或換新。
如果是非剛性物質(zhì)阻塞,如生物樣品中的生化物質(zhì)(蛋白質(zhì))、微生物等,可用極細(xì)的金屬絲導(dǎo)通,也可以在火頭上燒一燒,使有機(jī)物炭化,而后再導(dǎo)通。
如果是剛性物質(zhì)阻塞,要導(dǎo)通則十分困難,采用反沖的辦法有時(shí)能成功。就是將管子調(diào)頭用泵沖洗。操作時(shí)要注意保護(hù)眼睛和裸露的皮膚,因阻塞物會(huì)以很高的速度沖出來(lái)。無(wú)法導(dǎo)通的管路要換上同樣規(guī)格的管子。如果換上新管后又被阻塞,則應(yīng)該停機(jī)檢查上面提到的引起阻塞的幾種原因。
液相色譜柱是液相色譜儀的核心部件,且極易因使用不當(dāng)而損壞,不互溶的流動(dòng)相,不正確的保存方式及清洗都會(huì)降低色譜柱的使用壽命。因此液相色譜柱的日常維護(hù)保養(yǎng)極為重要。
1.流動(dòng)方向已明確標(biāo)明在色譜柱上,請(qǐng)正確安裝色譜柱,除非您想沖洗色譜柱入口的污染物,否則,請(qǐng)不要反接色譜柱。
2.反相柱做完實(shí)驗(yàn)后,若使用流動(dòng)相中含有緩沖溶液鹽,請(qǐng)?jiān)谑褂猛戤吅笥貌缓彌_劑的80%水-有機(jī)溶劑流動(dòng)相沖洗色譜柱,后換成100%有機(jī)溶劑貯存。
3.正相色譜柱正相使用保存在純正己烷中,反相使用時(shí)需要將柱內(nèi)貯存液用異丙醇置換。
4.流動(dòng)相與樣品在使用前可以用0.45um的微孔濾膜或用預(yù)處理柱(SPE固相萃取小柱)進(jìn)行預(yù)處理,并嚴(yán)格脫氣。
5.流動(dòng)相pH需保持在2-8之間,請(qǐng)盡量不超過適用范圍。
6.柱溫不要大于60℃。
7.壓力最高不超過30Mpa,建議在20Mpa以內(nèi)使用。
8.使用新鮮溶劑,防止細(xì)菌增長(zhǎng)。