液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。
液相色譜柱的日常維護(hù):
1、每次開(kāi)機(jī)時(shí),流速和柱壓要逐漸增加,突然迅速增加,會(huì)使柱床受到?jīng)_擊,引起紊亂,產(chǎn)生空隙
2、在進(jìn)樣前使色譜系統(tǒng)充分平衡,是否平衡可由基線加以判斷
3、在進(jìn)樣前,檢查色譜系統(tǒng)的各個(gè)接頭,通常由此能發(fā)現(xiàn)是否有漏液現(xiàn)象。如有漏液,空氣會(huì)從漏縫進(jìn)入系統(tǒng)引起基線漂移,影響峰高和峰面積的重復(fù)性
4、不要把柱接頭上得太緊,否則易損壞接頭螺紋,引起滲漏
5、不要把柱子放在有氣流的地方或直接放到陽(yáng)光下,氣流和陽(yáng)光都會(huì)使柱子產(chǎn)生溫度梯度造成基線漂移;如果懷疑基線漂移是由溫度梯度引起的,可以設(shè)法使柱子恒溫
6、若儀器用做常規(guī)分析,樣品種類(lèi)有限,但分析次數(shù)很多,則不妨為每一類(lèi)常規(guī)分析配置一根專用柱,這樣有助于延長(zhǎng)柱壽命
7、如果懷疑樣品會(huì)污染色譜柱,可以用合適的溶劑幾百毫升、慢慢沖洗柱子過(guò)夜,第二天早晨再用流動(dòng)相重新平衡柱子約3min、
8、在因裝卸、更換、貯存等而挪動(dòng)柱子時(shí),動(dòng)作要輕,不要使其受到碰撞,以免柱床因震動(dòng)產(chǎn)生空隙或通道
9、柱要加標(biāo)簽,新舊分開(kāi),不要放在溫度變化很大的地方
10、液相色譜柱柱子不用或貯藏時(shí),應(yīng)封閉并貯存在惰性溶劑中
一、樣品預(yù)處理的重要性:
1、樣品預(yù)處理所用時(shí)間遠(yuǎn)大于色譜分離時(shí)間。
2、消耗大量的溶劑和其它化學(xué)品,占分析消耗總成本最大。
3、樣品預(yù)處理是實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和準(zhǔn)確性最差的環(huán)節(jié),是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果好壞的重要因素。
二、樣品預(yù)處理的目的:
1、除去微粒,減少干擾雜質(zhì)。
2、濃縮微量組分。
3、提高檢測(cè)的選擇性和靈敏度。
4、改善分離效果。
5、有利于色譜柱和儀器的保護(hù)。
6、使樣品形式和所用溶劑符合HPLC的要求。
三、樣品預(yù)處理達(dá)到的要求:
1、樣品全部轉(zhuǎn)化為低濃度溶液。
2、樣品溶液洗脫強(qiáng)度低于流動(dòng)相,與流動(dòng)相相溶。
四、樣品預(yù)處理的原則:
1、在樣品預(yù)處理過(guò)程中,盡可能防止和避免與待測(cè)組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
2、在樣品預(yù)處理過(guò)程中,如果與待測(cè)組分進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),那么這一反應(yīng)必須是已知的,而且可以定量的完成。
3、在樣品預(yù)處理過(guò)程中,要防止和避免待待測(cè)組分被玷污,盡可能減少無(wú)關(guān)化合物引入制備過(guò)程。
4、樣品的處理過(guò)程應(yīng)盡可能簡(jiǎn)單易行,所采用的樣品處理裝置尺寸應(yīng)與樣品處理量相適應(yīng)。
5、采樣之后應(yīng)盡可能快的進(jìn)行樣品的分析測(cè)定,或使用合適的方法消除可能的變化和干擾。
五、樣品預(yù)處理方法:
1、過(guò)濾、離心:
常用的濾膜材質(zhì)有纖維素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺應(yīng)用廣泛。
2、加速溶劑萃?。?/p>
加速溶劑萃取是在提高溫度(50~200℃)和壓力(10.3~20.6MPa)下,用溶劑萃取固體或半固體樣品。
3、超臨界流體萃取:
超臨界流體萃取是利用超臨界流體對(duì)物質(zhì)的特殊溶解性能原理而建立的萃取方法。
4、固相萃?。?/p>
固相萃取是通過(guò)采用選擇性吸附和選擇性洗脫對(duì)樣品進(jìn)行富集、分離和凈化,可以將其近似地看作一種簡(jiǎn)單的液固色譜過(guò)程。
5、固相微萃?。?/p>
固相微萃取是基于涂敷在纖維上的高分子涂層或吸附劑和樣品之間的吸附-解吸平衡原理,集采樣、萃取、濃縮和進(jìn)樣于一體的無(wú)溶劑的樣品微萃取方法。
有直接固相微萃取、頂空固相微萃取、膜固相微萃取和毛細(xì)管固相微萃取等。
6、液相微萃?。?/p>
液相微萃取是基于樣品和微升級(jí)甚至納升級(jí)有機(jī)溶劑之間的分配平衡原理,集采樣、萃取和濃縮于一體的環(huán)境友好的樣品微萃取方法。
有直接液相微萃取、中空纖維液相微萃取和頂空液相微萃取等。
7、衍生化:
有紫外衍生化、熒光衍生化和電化學(xué)衍生化等。