LC-20A型液相色譜儀的日常操作與維護(hù)保養(yǎng)
公司地址：江西省南昌市解放西路明珠廣場(chǎng)C棟902室，福建省廈門市樂海北里35號(hào)403室
南昌捷島科儀專業(yè)生產(chǎn)銷售捷島牌GC1690系列，GC1620系列氣相色譜儀，并代理銷售、培訓(xùn)、維修上海伍豐、沃特世/Waters、安捷倫、島津、上海儀電上分廠、賽默飛世爾等國內(nèi)外知名品牌氣相色譜儀、液相色譜儀及其配件耗材，優(yōu)惠價(jià)格、培訓(xùn)、維修請(qǐng)銷售、培訓(xùn)和維修統(tǒng)一客服，：，歡迎經(jīng)銷商和終端用戶在線或與訂購，謝謝！
日常使用
>> 配置
系統(tǒng)組成：本系統(tǒng)由DGU-20A3脫氣機(jī)、2個(gè)LC-20AT溶劑輸送泵分為A，B泵、SIL-20A自動(dòng)進(jìn)樣器（7725手動(dòng)進(jìn)樣器）、C18填料色譜柱、CTO-20A柱溫箱、SPD-20A紫外-可見檢測(cè)器、CBM-20A系統(tǒng)控制器、LCSolution（Ver.1.21）工作站等組成。
>> 準(zhǔn)備
使用前應(yīng)根據(jù)待檢樣品的檢驗(yàn)方法準(zhǔn)備所需的流動(dòng)相，用合適的0.45μm濾膜過濾（有機(jī)相和水相分別選用各自的專用濾膜），超聲脫氣20min以上待用。
根據(jù)待檢樣品的需要選用合適的色譜柱（柱進(jìn)出口方向應(yīng)與流動(dòng)相流向一致）和定量環(huán)。 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液（也可在平衡系統(tǒng)時(shí)配制），用合適的0.45μm的樣品過濾器過濾后待用。 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。
注意：真空抽濾裝置和超聲波裝置為液相色譜實(shí)驗(yàn)室必須的輔助設(shè)備。
>> 開機(jī)和平衡系統(tǒng)
接通電源，依次開啟穩(wěn)壓電源、A泵、B泵、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器、檢測(cè)器、系統(tǒng)控制器，待泵和檢測(cè)器自檢結(jié)束后，打開電腦顯示器、主機(jī)，啟動(dòng)工作站軟件。
先把吸濾頭放入流動(dòng)相瓶中，打開排液閥，按purge鍵排液2～3分鐘，purge完畢后關(guān)閉排液閥啟動(dòng)泵送液（流速開始不宜太高應(yīng)為正常分析流速的50％～80％），如有柱溫條件可同時(shí)開啟柱溫箱，平衡系統(tǒng)30分鐘左右，此時(shí)可以同時(shí)進(jìn)行自動(dòng)進(jìn)樣器的purge操作（時(shí)間為15～25分鐘）自動(dòng)進(jìn)樣器清洗液一般使用與流動(dòng)相比例接近的不含緩沖鹽的試劑也可以用甲醇：水＝70：30或甲醇：水＝1：1代替，觀察檢測(cè)器基線平穩(wěn)后即可做樣。
注意：
1.如果使用前色譜柱中保存的流動(dòng)相為純甲醇或純乙腈，而新流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí)，應(yīng)先用純水沖洗色譜柱十分鐘左右再使用流動(dòng)相，以免鹽析出損壞系統(tǒng)。
2.如系統(tǒng)為正相和反相交換使用，應(yīng)先將所有管路用異丙醇清洗后再更換新流動(dòng)相使用。
>> 清洗系統(tǒng)和關(guān)機(jī)
手動(dòng)進(jìn)樣閥清洗：
數(shù)據(jù)采集完畢后，如使用的是手動(dòng)進(jìn)樣器請(qǐng)參看下圖清洗：
具體方法： 用注射器吸20ml超純水后套上沖洗頭，將清洗頭輕輕頂在進(jìn)樣口上（不宜用力太大，否則容易損壞進(jìn)樣口），使進(jìn)樣閥保持在Inject位置，慢慢將水推入，水將通過注射針導(dǎo)入口、引導(dǎo)管、注射針導(dǎo)入管和注射針密封圈，由樣品溢出管排出。
泵頭手動(dòng)清洗：
如系統(tǒng)中有泵頭自動(dòng)清洗裝置，則無需手動(dòng)清洗，否則需手動(dòng)清洗尤其使用完緩沖鹽流動(dòng)相時(shí)，清洗時(shí)使用下面工具，先用注射器吸入20毫升蒸餾水，套上針頭，插入泵頭清洗管任意一端，推入蒸餾水，另一端流入廢液杯，重復(fù)2～3次即可！
色譜柱清洗：
繼續(xù)以分析中使用流動(dòng)相沖洗10分鐘以上，待基線平穩(wěn)后關(guān)閉檢測(cè)器，沖洗色譜柱
如流動(dòng)相不含緩沖鹽，可以用甲醇：水＝70：30（或用純甲醇）直接沖洗30分鐘以上后把流速設(shè)為零，然后關(guān)閉所有儀器設(shè)備，順序?yàn)椋合韧顺龉ぷ髡拒浖?，再依次關(guān)閉系統(tǒng)控制器、檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、泵；
如流動(dòng)相含緩沖鹽可先用純水沖洗20～30分鐘后再用甲醇：水＝70：30（或用純甲醇）沖洗30分鐘以上，流速設(shè)零后再關(guān)閉儀器各部分電源，然后關(guān)閉總電源離開實(shí)驗(yàn)室。
日常使用中簡單故障的處理
當(dāng)LC泵不吸液或泵壓波動(dòng)超過0.5Mpa時(shí)需要進(jìn)行單向閥的清洗，清洗時(shí)需將單向閥有墊片的一面朝上，以防內(nèi)部零件散落。此處僅為LC-20AT的操作過程，其他類型的泵操作過程類似.
取下連接管路
取下進(jìn)口單向閥處的流動(dòng)相輸液管
取下進(jìn)出口單向閥進(jìn)行清洗（用甲醇或異丙醇超聲20min）
T泵的單向閥（2個(gè)） |
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左單向閥 |
| 右單向閥 |
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D泵的單向閥（4個(gè)） |
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入口閥 |
| 出口閥 |
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當(dāng)系統(tǒng)壓力偏高時(shí)，可能是由于在線過濾片的污染所造成，判斷時(shí)先斷開色譜柱入口，用1ml/min的流速送液，柱前壓力應(yīng)低于0.8Mpa,如果超過則需要對(duì)在線過濾片進(jìn)行清洗或更換。以下流程僅為LC-20AT的操作過程。
在線過濾片拆卸過程：
1. 拆除連接管路
2. 取下在線過濾器
228-39082-91
3. 取下在線過濾片
228-32744
4. 安裝新的在線過濾片
在線過濾片的超聲清洗方法為：5%稀硝酸（30min）――水超聲清洗5分鐘――甲醇超聲清洗10min。
注意：稀硝酸與甲醇不能混和，否則有可能會(huì)引起爆炸。
當(dāng)LC泵頭漏液或輸液量超過限定值時(shí)需要進(jìn)行密封圈的更換，此處僅為LC-20AT的操作過程，其他類型的泵操作過程類似。
密封圈更換過程：
1. 首先按功能鍵FUNC鍵到CONTROL然后按Enter鍵進(jìn)入P-SET功能，輸入1，按Enter鍵，讓柱塞桿復(fù)位，泵送液指示燈自動(dòng)熄滅后既復(fù)位完畢。
2. 拆除相應(yīng)的管路
3. 拆除相應(yīng)的泵頭
4. 以專用工具取下舊的密封圈，并安裝新的密封圈
取密封圈時(shí)的注意事項(xiàng)：
1. 在拆除泵頭時(shí)應(yīng)交替均勻地?cái)Q下固定內(nèi)六角螺釘。
2. 取泵頭時(shí)應(yīng)雙手水平緩慢取下，防止折斷柱塞桿。
3. 密封圈需用專用工具進(jìn)行更換，取密封圈的工具有正反方向，凸頭的一面是取舊密封圈的，光滑的一面是用來裝新密封圈的。
4. 新密封圈甲醇浸泡5分鐘后換上。
5. 泵頭和密封圈之間有個(gè)環(huán)形墊片，請(qǐng)勿遺失。
密封圈的種類及壽命
泵的類型 | 編號(hào) | 圖片 | 壽命（輸液量） |
T 泵（20A系列） | 228-35145 | 180L | |
D泵（20A系列） | 228-35146 | 90L |
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高效液相色譜在使用過程中常會(huì)出現(xiàn)一些影響分析結(jié)果的問題，如果使用人員了解常見問題及其成因和相關(guān)解決方法，就能做到早預(yù)防勤維護(hù)，使分析結(jié)果保持較好的穩(wěn)定性與較高的精確性。
1.氣泡溢出
流動(dòng)相內(nèi)有氣泡，關(guān)閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進(jìn)入流動(dòng)相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產(chǎn)生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團(tuán)，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入流動(dòng)相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時(shí)，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開purge鍵清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，繼續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出，說明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸破壞，流動(dòng)相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥，打開泵，流速調(diào)至1.0~3.0ml/min,純水沖洗過濾器1小時(shí)左右。即可將過濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時(shí)即可。
2.色譜柱平衡
如果我們觀察到保留時(shí)間漂移，首先應(yīng)考慮色譜柱是否已用流動(dòng)相完全平衡。通常平衡需要10~20個(gè)柱體積的流動(dòng)相。但如果在流動(dòng)相中加入少量添加劑則需要相當(dāng)長的時(shí)間來平衡色譜柱。需要柱子的充分平衡，然后才能對(duì)HPLC進(jìn)行檢定。
3.柱壓高
⑴緩沖液鹽分如（乙酸銨等）沉積于柱內(nèi)；⑵樣品污染沉積。
處理對(duì)于第一種情況先用40~50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應(yīng)提高流速?zèng)_洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；對(duì)于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇（4+6）沖洗柱子，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。
4.無指示
⑴泵密封墊圈磨損；⑵大量氣泡進(jìn)入泵體。
處理對(duì)于第一種情況，更換密封墊圈；對(duì)于第二種情況，在泵作用的同時(shí)，用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。
5.不穩(wěn)定
原因系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動(dòng)相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲(chǔ)液器瓶底，避免吸入空氣，流動(dòng)相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。
6.峰分叉
⑴色譜柱被污染；⑵柱頭填料塌陷。
處理對(duì)于第一種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇（4+6）沖洗柱子（沖洗時(shí)間的長短由樣品污染的情況而定），再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對(duì)于第二種情況，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分（污染的填料），裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復(fù)幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。
7.重復(fù)性差
⑴進(jìn)樣閥漏液；⑵加樣針不到位；⑶液量不足。
處理對(duì)于第一種情況更換進(jìn)樣閥墊圈；對(duì)于第二種情況保證加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài)，以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中，液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要，注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中，儲(chǔ)液器內(nèi)的溶液如長時(shí)間未用應(yīng)清洗儲(chǔ)液器并更換溶液，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無機(jī)鹽析出或沉積；樣品的前處理也很重要，任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì)，完全溶解，盡量減少對(duì)色譜柱的污染，以延長色譜柱的使用壽命，同時(shí)避免注射過濃的樣品溶液，以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞；色譜柱作好標(biāo)記，用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。
8.基線漂移
一般說來，機(jī)器剛起動(dòng)時(shí)，基線容易漂移，大概要半個(gè)小時(shí)的平衡時(shí)間，如果你用了緩沖溶液或緩沖鹽，還有就是在低波長下（220 nm）平衡時(shí)間相對(duì)會(huì)比較長，但如果你在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)基線漂移，則你要考慮下面的原因：
1）柱溫波動(dòng)。解決方法：控制好柱子和流動(dòng)相的溫度，檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對(duì)著柱溫箱；
2）流通池被污染或有氣體。 解決方法：用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池（可以斷開柱子）。如有需要，可以用1N的硝酸（不要用鹽酸）；
3）紫外燈能量不足。解決方法：更換新的紫外燈；
4）流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。
解決方法：檢查流動(dòng)相的組成，使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑；
5）樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線。
解決方法：使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之間。在分析過程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子；
6）檢測(cè)器沒有設(shè)定在最大吸收波長處。解決方法：將波長調(diào)整至最大吸收波長處；
7）流動(dòng)相的PH值沒有調(diào)節(jié)好。解決方法：加適量的酸或堿調(diào)至較佳PH值。
高效液相色譜儀系統(tǒng)組成：液相色譜儀主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱子、柱溫箱、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對(duì)于整個(gè)系統(tǒng)而言，柱子、泵和檢測(cè)器是核心部件同時(shí)也是易出問題的主要部位。
液相色譜儀由高壓液體泵、檢測(cè)器及液相色譜柱等三部分組成，其中液相色譜柱的正確安裝和使用，是液相色譜工作的關(guān)鍵；也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的必經(jīng)之路。
液相色譜柱的安裝：
1、液相色譜柱的結(jié)構(gòu)：
a、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。
柱接頭采用低死體積結(jié)構(gòu)，柱接頭是兩端螺紋組件，一端是為7/16英寸外螺紋，另一端是3／16英寸的內(nèi)螺紋(國內(nèi)外已規(guī)范化)。7／16英寸外螺紋與1／4英寸柱管(Φ6.35mm)連接，中間放置壓壞用于密封。3／16英寸的內(nèi)螺紋與1／16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接，中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封。為了盡量減少柱外死體積，在安裝色譜柱時(shí)，用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底，然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長度應(yīng)嚴(yán)格控制在2．5mm長或其他固定尺寸)。
在兩端柱接頭內(nèi)，柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或?yàn)V網(wǎng))，用于封堵柱填料不被流動(dòng)相沖出柱外而流失?？罩鹘M件均為316#不銹鋼材質(zhì)，能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性，故使用時(shí)要注意，柱及連接管內(nèi)不能長時(shí)間存留此類溶劑，以避免腐蝕。
b、柱填料：
液相色譜柱的分離作用是在填料與流動(dòng)相之間進(jìn)行的，柱子的分類是依據(jù)填料類型而定。
正相柱：多以硅膠為柱填料。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種，其顆粒直徑在3—10 ?m的范圍內(nèi)。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN，-NH2等官能團(tuán)即所謂的鍵合相硅膠。
反相柱：主要是以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合十八烷基官能團(tuán)(ODS)的非極性填料。也有無定型和球型之分。
常用的其他的反相填料還有鍵合C8、C4、C2、苯基等，其顆粒粒徑在3—10 ?m之間。
449717568
