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液相色譜柱的再生與保存及操作規(guī)程

時間:2020-05-10    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  【儀器網(wǎng) 維修保養(yǎng)】液相色譜柱是消耗品,隨著使用時間的增長與使用次數(shù)的增加,色譜柱的效果會下降。此時需要對色譜柱進行清潔與再生,保證檢測的效果。同樣,色譜柱的保存也會影響使用壽命與使用效果。在使用完成之后須特別注意。
 
  色譜柱的再生
 
  反相柱
 
  1.準備95:5的濃甲醇水溶液、純甲醇、異丙醇與二氯甲烷作為流動相;
 
  2.按順序沖洗色譜柱,每種流動相流經(jīng)色譜柱的量應(yīng)不少于20~30倍色譜柱體積;
 
  3.按相反的順序沖洗。
 
  正相柱
 
  1.準備正己烷、異丙醇、二氯甲烷與甲醇作為流動相,所有流動相必須嚴格脫水;
 
  2.按順序沖洗色譜柱,每種流動相流經(jīng)色譜柱的量應(yīng)不少于20~30倍色譜柱體積,異丙醇粘度大,沖洗時應(yīng)注意放慢流速;
 
  3.按相反的順序沖洗。
 
  離子交換柱
 
  1.陽離子柱的再生可采用稀酸緩沖溶液沖洗;
 
  2.陰離子柱的再生可采用稀堿緩沖溶液沖洗。
 
  注意:以上的再生方法不是不可變通的,實際操作中,使用者可按照自身情況選擇合適的溶劑作流動相溶解色譜柱內(nèi)的污染物。但無論用什么方法再生,色譜柱都不能恢復(fù)原來的效果。
 
  色譜柱的保存
 
  反相柱:儲存于純甲醇或乙腈中;
 
  正相柱:儲存于純正己烷中,注意須嚴格脫水;
 
  離子交換柱:儲存于含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞的水中,并用塑料堵頭堵上。
 
  注意:若色譜柱使用過含鹽濃度較高的流動相,則須用超純水替換原來的流動相再選擇合適的溶液儲存。

在使用液相色譜儀要注意那四點

  液相色譜儀作為分析實驗室高端必備儀器之一,是實驗室分析員應(yīng)用頻率較高的儀器,縱然是經(jīng)常使用的經(jīng)驗豐富的老司機在使用過程里不可避免的還是往往疏忽一些問題,從而導(dǎo)致一些儀器的故障。方便快速的分析過程固然重要,但是為了多種樣品而忽略了一些細節(jié)步驟,總是會犯些錯。在使用液相色譜儀時四大關(guān)鍵因素,對正確使用極為重要,下面給大家說說:

  1、液相色譜儀本身

  對于儀器本身一般不會有問題,特別是剛買回來的新儀器。對于儀器本身重要的就是儀器的校驗,剛買回來的儀器一般都是由賣家先對儀器做系統(tǒng)的確認工作(包括IQ、PQ、OQ),確認順利通過后,再請國家或省級儀器檢定局的來校驗,檢定合格后就可以放心使用了,除此之外,一些做得好的公司每半年會對儀器進行一次的內(nèi)部校驗,目的就是為了保證儀器的正??蛇\行狀態(tài)。

  2、色譜條件:

  色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。

  流動相就涉及到配制流動相所用到的水和試劑試液,水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大于18、2兆歐級別,試劑試液要求用色譜級別的,原因為防止水和試劑試液中的雜質(zhì)對色譜結(jié)果的干擾。

  色譜柱會因不同的品種而有不同的要求,但每根色譜柱都有它的清洗要求,這個在色譜柱說明書上都可以找到,一定要根據(jù)上面的要求進行,否則會造成色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短,檢測波長也會因品種的不同有不同的要求,這里需要指出的是要注意觀察檢測器氘燈能量的變化,比如基線波動大,活性成分的響應(yīng)值突然變小等,都有可能是氘燈的能量不足所引起的,氘燈一般建議使用800小時,但實際上使用時間不止,可根據(jù)實際情況更換。

  流速也因品種的不同而不同,一般為1、0ml/min,流速是不可隨意改動的,特別是作為QC人員,但是作為研發(fā)人員,有時為了摸索條件或進行方法耐用性驗證,會對流速進行改變以評價方法的適用性。對于進樣量因不同的品種也有不同規(guī)定,如果使用六通閥自動進樣,一般進樣精密度都很好,不需強調(diào)什么。

  3、操作人員:

  首先,作為液相色譜儀操作人員,一定要認真學(xué)習(xí)液相的說明書,掌握液相硬件和軟件的操作,掌握日常的維護保養(yǎng),掌握最基礎(chǔ)故障的排除和維修。

  一般液相色譜儀的操作規(guī)程也是有操作人員起草的,所以只要嚴格按照操作要求進行操作,一般不會出現(xiàn)問題,當然這里需要特別指出的是對于液相的日常維護保養(yǎng)很重要,比如流動相的過濾、脫氣、泵密封墊的清洗、系統(tǒng)管路的清洗、溶劑過濾頭的清洗等,倘若不堅持,很容易導(dǎo)致色譜柱堵塞、系統(tǒng)壓力過強、色譜峰異常等不必要的故障,浪費時間。

  其次,操作人員在配制液相色譜儀分析用待測樣品溶液時,由同一個人單獨完成,以免不必要的偶然誤差從而造成分析的失敗或誤差。

  4、液相安裝環(huán)境:

  液相色譜儀應(yīng)盡量安裝于水平、遠離振動、電磁干擾的屋內(nèi)的臺面上,有條件的話盡量將液相數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)分隔開,一個是防止色譜基線噪音偏大,基線不穩(wěn)等,一個是為減少對人體的危害。

標簽: 液相色譜儀
液相色譜儀 在使用液相色譜儀要注意那四點_液相色譜儀

氣相色譜儀與液相色譜儀的主要差異

  色譜法是一種常見的分離技術(shù),其原理是利用欲分離組分在兩相間具備不同的分配系數(shù),以流動相對固定相中的混合物進行洗脫,混合物中的不同物質(zhì)以不同速度沿固定相移動,最終達到分離的效果。
  按兩相的物理狀態(tài),可以分為氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC),在現(xiàn)代樣品分析中,氣相色譜和液相色譜都是普遍采用的分析方法,但兩者也存在許多不同之處,具備不同的特性,這些特性也決定了它們不同的應(yīng)用范圍。
  一、氣相色譜儀液相色譜儀的主要差異
  1.流動相區(qū)別
  GC:流動相為惰性氣體,流動相與組分無親合作用力,只與固定相有相互作用。
  LC:流動相為液體,流動相與組分間有親合作用。
  2.色譜柱長度區(qū)別
  GC:色譜柱長度在幾米到幾十米不等。氣相色譜由于載氣的相對分析量較低,分子間隙大,故粘度低,流動性好,組分在氣相中流動速度快,因此可以增加柱長,以提高柱效。
  LC:色譜柱通常在幾十到幾百毫米。
  3.分析樣品選擇性
  GC:相對分子質(zhì)量較?。ㄒ话阈∮?000),低沸點(一般小于500℃),易揮發(fā),熱穩(wěn)定性。
  LC:更適用于分析高沸點,難揮發(fā),熱穩(wěn)定性差,分子質(zhì)量較大(1000--2000)的液體化合物。
  據(jù)統(tǒng)計,氣相色譜能分析的有機物只占全部有機物的15%-20%,其可分析樣品的范圍小于液相色譜,但隨著近幾年技術(shù)的更新,如頂空進樣和裂解進樣等,進一步擴大了氣相色譜的分析范圍。
  4.檢測器差異
  GC:氫火焰離子化檢測器(FID),熱導(dǎo)檢測器(TCD),電子捕獲檢測器(ECD),火焰光度檢測器(FPD),氮磷檢測器(NPD)。
  LC:紫外檢測器,熒光檢測器,示差折光檢測器。
  5.其他方面
  GC:需要將樣品在氣化室氣化,需要較高的檢測溫度,采用尖頭進樣針。
  LC:不必對樣品氣化,常溫即可檢測,采用平頭進樣針。
  二、GC與LC的主要相同點
  基礎(chǔ)的原理相同,都是吸附-脫附平衡,利用組分在固定相和流動相中的分配系數(shù)不同達到分離的目的。也就是說,兩者都是利用物質(zhì)在流動相和固定相中的分配系數(shù)的差別,從而在兩相間反復(fù)多次(1000-1000000次,甚至更多)的分配,使原來分配系數(shù)差別很小的各組分分離開來。在本質(zhì)上,都是利用“相似相溶”原理,利用色譜柱進行分離。
  氣相色譜具有分離效率高,分離速度快,樣品用量少,選擇性好,檢測靈敏度高等特點,在食品、環(huán)境、化工等領(lǐng)域都具有廣泛的用途;液相色譜分析范圍廣,對于難分離混合物的分析具有很好的準確性,樣品回收容易,因此液相色譜不僅僅作為一種分析方法,也作為一種分離手段應(yīng)用在食品醫(yī)藥等行業(yè)。
  隨著應(yīng)用領(lǐng)域的不斷深入,單一的色譜分析技術(shù)已經(jīng)不能完全滿足現(xiàn)有的市場需求,所以誕生了氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(GCMS)、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LCMS)等新的分析技術(shù),用于更好地分離分析樣品。

標簽: 氣相色譜儀 液相色譜儀
氣相色譜儀 液相色譜儀 氣相色譜儀與液相色譜儀的主要差異_氣相色譜儀 液相色譜儀

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