與傳統(tǒng)分光光度計(jì)相比,超微量分光光度計(jì)要求的樣品體積小,不需要比色皿,比色杯清洗方便,只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測(cè)平臺(tái)上擦拭干凈即可。除此之外,實(shí)驗(yàn)過程也更為簡單,不需預(yù)熱,可隨時(shí)檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果顯示吸光度值的同時(shí),程序直接給出濃度值。超微量分光光度計(jì)與傳統(tǒng)相比,體積更小,更方便使用。
實(shí)驗(yàn)室如何選擇一款性價(jià)比高、質(zhì)量可靠的超微量分光光度計(jì),下面幾項(xiàng)指標(biāo)可以作為參考:
1、使用要求和預(yù)算:固定波長的價(jià)值量較低幾萬塊錢,可以做全波長掃描的價(jià)值量高,一般在6萬以上。如果僅要求可以測(cè)核酸、蛋白,可以選擇固定波長的。
2、檢測(cè)濃度范圍:根據(jù)日常提取樣品的濃度,范圍大的會(huì)檢測(cè)到15000ng/ul,范圍小的會(huì)在3000ng/ul。
3、光源:LED光源或者氙燈光源,
4、品牌:進(jìn)口或者國產(chǎn)。國產(chǎn)品牌的價(jià)位一般在3-5萬,進(jìn)口品牌的價(jià)位一般在4-10萬。對(duì)產(chǎn)品品牌要求高的,預(yù)算比較充足的用戶,可以考慮購買進(jìn)口品牌的;國產(chǎn)品牌的性價(jià)比高,技術(shù)水平也能達(dá)到國外的先進(jìn)水平。
紫外分光光度計(jì)就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計(jì)可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量。
紫外可見分光光度計(jì)詳細(xì)操作流程及校準(zhǔn)方法:
一、紫外可見分光光度計(jì)光度測(cè)量
在模式選擇屏幕中選擇<1.Photometric光度>選項(xiàng),將顯示參數(shù)配置屏幕;
用GOTOWL鍵設(shè)定測(cè)量波長;
按F2鍵設(shè)定進(jìn)樣控制;
按START/STOP鍵時(shí),測(cè)量開始,顯示測(cè)量屏幕;
如需做空白校正,應(yīng)在測(cè)量前先設(shè)置空白樣品,然后,按AUTO-ZERO鍵,將測(cè)量值置為OABS(100%);
二、紫外可見分光光度計(jì)校正
開機(jī)預(yù)熱10分鐘足矣;
放入黑塊和標(biāo)樣(沒有的自己配),關(guān)閉蓋子;
校0;
把燈光對(duì)著黑塊,把透光度調(diào)0;
把燈光對(duì)標(biāo)樣,將吸光度調(diào)到100%;
三、參比溶液介紹
參比溶液又稱空白溶液。測(cè)量時(shí)用作比較的、不含被測(cè)物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常,用參比溶液掃描的曲線應(yīng)是一條平坦的直線。有時(shí),基體中,雖不含被測(cè)物質(zhì),但含有別的物質(zhì),這時(shí)必須保證其不影響測(cè)試。經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測(cè)物質(zhì),此時(shí)必須經(jīng)過純化將其除去。否則將影響測(cè)定結(jié)果。
四、紫外可見分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)
1.開機(jī)前應(yīng)先預(yù)熱15分鐘,然后開機(jī)自檢;
2.濕度要控制在75%左右,溫度在5~30度之間;
3.儀器要穩(wěn)壓電源,接地要好。并且避免陽光直接照射;
5.常見故障及處理方法:
光門不能完全關(guān)閉:修復(fù)光門部件,使其完全關(guān)閉;
透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕;
儀器嚴(yán)重受潮:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會(huì)兒使其干燥,并更換干燥劑;以上為紫外可見分光光度計(jì)的具體操作方法及使用注意事項(xiàng),希望能給予您幫助。